单细胞凝胶电泳法分析指标及检测DNA交联的标准断裂剂的研究

目的 寻求单细胞凝胶电泳计算机成像与分析系统中的有效分析指标 ,为H2 O2 在 1℃条件下作为检测DNA交联的标准DNA断裂剂提供依据。方法 常规培养Vero细胞 ,消化后悬浮在PBS中 ,H2 O2 染毒 ,分别在 37℃和 1℃条件下孵育 1h ,常规单细胞凝胶电泳 ,专用软件分析其图像。结果 H2 O2 的染毒浓度在 2 5 0 0 μmol/L以下时 ,尾长、尾面积、尾矩和尾积分等指标均有剂量 -效应关系 (T =37℃时 ,r分别为 0 .6 80 ,0 .72 5 ,0 .796 ,0 .798;T =1℃时 ,r分别为 0 .6 85 ,0 .717,0 .6 2 2 ,0 .714,P均 <0 .0 1)。在H2 O2 浓度较高的另一实验中 ,当H2 O2 为 2～ 7μmol/L时 ,仅尾矩和尾积分间存在这种关系 ;H2 O2 各剂量 (2 0、10 0、5 0 0、2 5 0 0 μmol/L)在 37℃时对DNA的损伤程度均明显高于1℃时。两种条件下上述 4个指标都存在剂量 -效应关系。结论 由该系统得到的尾矩和尾积分所反映的DNA损伤信息更准确、更全面、适用范围更广 ,但尾长可用作较初步的研究 ;H2 O2 在