贻贝粘蛋白中多巴氧化还原状态表征方法研究

目的对高效液相色谱法表征贻贝粘蛋白中多巴氧化-还原状态可行性进行研究。方法用高效液相色谱法、Arnow法和考马斯亮兰法测定贻贝粘蛋白中多巴含量及蛋白质含量。结果随着氧化时间延长,贻贝粘蛋白样品中蛋白含量不变,还原态的多巴含量下降。加速氧化和自然存放样品的色谱峰保留时间均随着放置时间的延长发生偏移,与多巴的氧还还原状态变化有关。结论高效液相色谱法可以用来表征贻贝蛋白的氧化还原程度,对于产品设计研发与质量控制具有重要意义。

贻贝黏蛋白在BALB/c小鼠中的免疫原性研究

目的:评估贻贝黏蛋白(MAP)注射入小鼠体内时的免疫原性,并为其临床应用提供安全性依据。方法:选择BALB/c小鼠72只,采用随机数表法将小鼠分为试验样品组(S组)、阴性对照组(N组)、阳性对照组(P组)、阳性抑制组(D组)、阳性促进组(P*组)及空白对照组(C组)6组,每组小鼠根据不同实验选取不同数量。通过免疫学实验评估MAP对小鼠免疫系统的影响,对T淋巴细胞转化功能、巨噬细胞吞噬功能、体液免疫应答、体重和脏器系数以及血液学和脾淋巴细胞总数对免疫器官组织学的影响进行评估。结果:注射高剂量MAP时,小鼠产生免疫应答;但S组与N组比较,临床等效剂量MAP产生的免疫原性未产生显著差别。S组与N组对淋巴细胞表面CD4、CD8和CD3、CD19标志的表达差异无统计学意义(t=0.171,t=0.995,t=0.240,t=0.163;P>0.05);MAP对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力无明显的促进或抑制作用,S组与N组之间的差异无统计学意义(t=1.14,P>0.05)。MAP对小鼠的体液免疫应答和免疫因子水平、小鼠的体重和免疫器官(胸腺和脾脏)和小鼠的白细胞计数未产生显著影响,且未表现出刺激小鼠脾淋巴细胞增长的迹象,S组脾淋巴细胞总数虽低于N组,但差异无统计学意义(t=1.85,P>0.05)。结论:临床等效剂量MAP对BALB/c小鼠的体液免疫和细胞免疫未产生影响,应用于小鼠时安全性良好。