丙型肝炎病毒抗体快速检测试剂国家参考品的研制

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)为单股正链RNA病毒,主要通过血源性传播,呈全球性流行趋势,不同性别、种族及年龄对HCV均易感[1]。有数据显示,目前全球患有丙型肝炎的人数为1.85亿,我国人群的感染率为3.2%[2]。丙型肝炎发病隐匿,慢性化程度高,可导致肝硬化甚至肝癌[3-4]。

人细小病毒B19实验室诊断技术研究进展

人细小病毒B19(B19V)是细小病毒科的一种小的非包膜单链DNA,在人群中普遍存在。B19病毒能够通过呼吸道、血液、胎盘等进行传播,进而引起儿童传染性红斑、再生障碍危象、胎儿积水和宫内胎儿死亡等疾病。本文主要从B19病毒的基因分型、蛋白表达、感染机制及实验室检测技术等方面来综述B19病毒的性质和诊断情况,以期提供更多关于其生物学特性的信息,这可能有助于研究人员对检测方法的应用及发展有更深层次的了解。

尿酸测定试剂盒质量分析研究

尿酸是客观反映人体嘌呤及肾脏功能的常规临床检验指标,也是肾小管中重要的运转介导物质[1-2]。近来,该项指标用于冠状动脉粥样硬化检查的研究较多[3],有研究显示,当尿酸水平上升为正常水平的1.5倍时,冠心病的发病率可提升[4]。部分临床研究表明,高尿酸所导致的高尿酸血症可以导致胰岛素抵抗,而胰岛素抵抗是影响心衰临床预后的重要指标,该指标的升高可对心衰预后产生不良影响[5]。高尿酸血症本身也可导致严重的痛风症状[6],而痛风的临床症状主要表现为痛风石的产生、严重的关节炎症、畸形、疼痛甚至死亡,痛风石中主要成分为无机盐和尿酸[7]。

五厂家EB病毒抗体检测试剂盒血清学诊断鼻咽癌的比较

目的通过比较EB病毒抗体检测试剂盒血清学诊断鼻咽癌的准确性和检测结果的一致性,为试剂盒在临床上的使用选择和性能改进提供依据。方法使用五厂家的EB病毒衣壳抗原IgA和IgG抗体检测试剂盒(VCA IgA和VCA IgG试剂盒)、核抗原1 IgA和IgG抗体检测试剂盒(EBNA1 IgA和EBNA1 IgG试剂盒)、早期抗原IgA和IgG抗体检测试剂盒(EA IgA和EA IgG试剂盒)以及Zta IgA抗体检测试剂盒,分别检测33例鼻咽癌患者(NPC)、30例健康体检者(HD)和41例非鼻咽癌的其他肿瘤患者(NNPC)血清或血浆样本。结果 A厂家的VCA IgA试剂盒灵敏度高于其他厂家同品种试剂盒,但对于NNPC特异度最低(36.6%);而D厂家VCA IgA试剂盒的特异度最高(97.6%),且对HD的特异度均大于90%。B和D厂家的EBNA1 IgA试剂盒间阳性、阴性符合率分别为92.1%和100.0%。A和E厂家的EA IgA试剂盒的灵敏度均较低而特异度高,试剂盒间阳性符合率低(39.4%),阴性符合率高(98.6%);而VCA IgG试剂盒的灵敏度高但特异度低。A和C厂家的EBNA1 IgG试剂盒的灵敏度高(100.0%,97.0%)但特异度低(3.3%,13.3%)。C厂家EA IgG试剂盒检测所有样本结果均为阴性。结论五个不同厂家VCA IgA、EA IgA试剂盒诊断鼻咽癌的准确性和检测结果的一致性存在差异,特别是A厂家和其他国内厂家同品种试剂间差异明显,需根据临床目的进行选择。三家国产VCA IgA试剂盒的灵敏度需进一步提高。相反,EBNA IgA试剂盒诊断鼻咽癌的准确性和结果一致性较好。单独使用VCA IgG和EBNA1 IgG试剂盒血清学诊断鼻咽癌的特异度差,其判读界值可能需根据检测目的进行调整。

电子输尿管硬镜的过氧化氢低温等离子体灭菌效果研究

电子输尿管硬镜与图像处理系统配合使用,可用于输尿管疾病的检查、诊断和治疗。此类医疗器械具有安全、术后并发症少、缩短手术及住院时间等优点[1]。由于电子输尿管硬镜预期使用过程中会接触人体内部组织,因此使用前必须进行灭菌达到无菌状态。医院消毒供应中心(central sterile supply department,CSSD)常用的灭菌方式包括高压蒸汽灭菌法、过氧化氢低温等离子体灭菌法、甲醛灭菌法等[2-3]。电子输尿管硬镜通常由航空插头、光缆接口、镜管三部分组成,其中部分材料不耐受高温(温度不能高于60℃),因此只能选择低温灭菌方式。常用低温灭菌方式包括环氧乙烷灭菌、过氧化氢低温等离子体灭菌和碱性戊二醛浸泡灭菌等[4-5],其中过氧化氢低温等离子体灭菌法由于灭菌周期短、低温、不留消毒剂残余、安装方便等优点被广泛应用于内窥镜等可重复使用医疗器械的灭菌[6-7]。对电子输尿管硬镜的过氧化氢低温等离子体灭菌效果进行研究能为临床使用后CSSD等消毒应用提供指导。

河流弧菌核酸检测试剂国家参考品的建立

目的 建立河流弧菌核酸检测试剂国家参考品并制定质量标准。方法 收集并筛选河流弧菌核酸阳性和阴性临床分离株样本,建立河流弧菌核酸检测试剂国家参考品。使用不同试剂对参考品进行协作标定,并对参考品稳定性和均匀性进行考核。结果 河流弧菌核酸检测试剂国家参考品由20份样本组成,包括8份阳性参考品P1~P8、10份阴性参考品N1~N10、1份检测限参考品L和1份重复性参考品R,L经菌落计数法测定浓度为1×10^(8)CFU/mL。国家参考品的质量标准为阳性符合率8/8,阴性符合率10/10,检测限要求1∶104稀释或更高浓度时应均为河流弧菌阳性,重复性要求对稀释后的两个浓度水平的Ct值的变异系数(CV,%)均不大于5.0%。经过随机抽样检测,参考品均匀性符合要求,在2~8℃冷藏条件、室温放置7天均未影响参考品稳定性。结论 本研究研制了河流弧菌核酸检测试剂国家参考品,并制定了其质量标准,可用于相关定性检测试剂的质量评价。

副溶血弧菌核酸检测试剂国家参考品的建立

副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)是一种兼性厌氧的革兰氏阴性嗜盐菌、多形态球杆菌,其菌体呈弧状、杆状或丝状,无芽孢且无荚膜。由于在我国海产品检出率较高,引起食物中毒的比例较大,因此是我国一种重要的食源性病原菌。副溶血弧菌引起的食源性疾病在临床上以呕吐、腹痛、腹泻及水样便为主要症状,少数情况下诱发败血症[1]。副溶血弧菌引起疾病的致病因子主要有溶血素,即耐热性直接溶血素(thermostable direct hemolysin,TDH)、耐热性直接溶血素相关的溶血素(TDH related hemolysin,TRH)和不耐热性溶血素(thermolabile hemolysin,TLH),但这些致病因子在副溶血弧菌致病过程中的作用机制还缺乏系统深入的认识[2]。

人细小病毒B19 IgG抗体检测试剂国家参考品的建立及应用

目的建立人细小病毒B19 IgG抗体检测试剂国家参考品并对试剂质量进行评价。方法收集并筛选B19 IgG抗体阳性和阴性样本,建立人细小病毒B19 IgG抗体检测试剂国家参考品,包括:阳性参考品10份、阴性参考品10份、重复性参考品1份和最低检测限参考品5份,以WHO第二代B19抗体(IgG)参考品进行溯源和标定,并进行稳定性考察。使用建立的参考品对人细小病毒B19 IgG抗体检测试剂盒进行质量评价。结果重复性参考品的标定结果为16 IU/m L,最低检测限参考品(S1~S4)的标定结果分别为29、14、7、4 IU/m L,S5为阴性基质血浆;室温(25℃)放置3d、4℃放置5d及反复冻融5次均不影响参考品的稳定性;试剂质量评价结果显示,阴性符合率1家为9/10,其余均为10/10,阳性符合率均为10/10,重复性均符合要求,最低检测限结果 1家为14 IU/m L、2家为7 IU/m L、3家为4 IU/m L。结论建立的参考品能够用于人细小病毒B19 IgG抗体检测试剂盒的质量控制。

2014年度风疹病毒IgM抗体检测试剂盒国家监督抽验质量分析

目的对风疹病毒Ig M抗体检测试剂盒进行国家监督抽验,评价其质量现状。方法采用法定检验结合探索性研究,对阴阳性符合率、检测限和重复性项目进行检验,结果法定检验显示16批次中15批次合格(93.8%),不合格项目为阴性符合率;探索性研究中仅11批次满足行业标准要求(68.8%),不合格项为阳性样本符合率、检测限和重复性。结论目前上市的风疹病毒Ig M抗体检测试剂盒存在一定的质量问题,建议今后在注册检验中,统一采用行业标准和国家参考盘,以促进企业改进产品质量。

人巨细胞病毒IgG抗体检测试剂盒国家监督抽验质量评价

人类巨细胞病毒（human cytomegalovirus,CMV）,属疱疹病毒科,乙组疱疹亚科,分子量为150×10~6 D,是直径为200 nm的线状双链DNA病毒,人是其唯一的宿主。巨细胞病毒的主要感染途径是与被感染病人接触,包括接触被感染病人的唾液、生殖器分泌物、尿液和乳汁,同时也可通过胎盘传播或发生医源性传染.

抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体)国家参考品的建立

ABO血型系统是人类第一个血型系统,也是人类血型系统中抗原免疫性最强的[1]。至今人们已发现红细胞上有36个血型系统,300多种血型抗原。ABO血型系统是临床输血和器官移植中最重要的血型系统,对献血者和受血者ABO血型的预先确认是输血工作中最为重要的实验,错误的ABO血型定型将导致严重的输血反应[2-3]。

病原菌多重核酸检测试剂盒分析性能质量评价研究

目的了解我国病原菌多重核酸检测试剂盒分析性能的现状,特别是检出限性能的基本情况,为相关研发企业和医疗机构使用者提供参考。方法根据体外诊断试剂行业标准《细菌和真菌感染多重核酸检测试剂盒(标准号YY∕T 1725-2020)》,使用“34种细菌和真菌感染多重核酸检测试剂国家参考品(批号370026-201801)”对10种不同检测技术原理的病原菌多重核酸检测试剂盒的分析性能进行评估,包括阳性符合率、阴性符合率、重复性及检出限等,并按照国家参考品的质量标准对评价结果进行统计分析。结果10款试剂盒中包括4款呼吸道感染试剂盒、3款中枢神经系统感染试剂盒及3款血流感染试剂盒,检测范围或病原谱覆盖8种革兰阳性细菌、14种革兰阴性细菌及10种真菌和非典型病原体。各试剂盒的阳性符合率、阴性符合率、重复性及检出限等分析性能均符合国家参考品的质量标准。呼吸道、中枢神经系统及血流感染试剂盒病原菌谱及检出限性能差异较大,检出限的中位数分别为5×10^(3)CFU/ml、1×10^(3)CFU/ml及1×10^(6)CFU/ml;各试剂盒病原菌谱中分布和出现频率较高的6种病原菌检出限中位值分别为5×10^(2)CFU/ml(肺炎链球菌)、3×10^(3)CFU/ml(金黄色葡萄球菌的)、1×10^(3)CFU/ml(流感嗜血杆菌)、5×10^(4)CFU/ml(铜绿假单胞菌)、3×10^(6)CFU/ml(鲍曼不动杆菌)及5×10^(4)CFU/ml(大肠埃希菌)。结论我国已经进入体外诊断试剂注册阶段的病原菌多重核酸检测试剂盒均具有较好的准确性、特异性及重复性。同时,研发企业应注意结合临床具体的需求,设计合理的试剂盒病原菌谱,并持续优化检出限性能。

重组人谬勒管抑制素/抗谬勒管激素国际参考试剂协作研究

血清谬勒管抑制素/抗谬勒管激素(AMH)水平可用于评估卵巢储备功能,辅助诊治相关疾病。世界卫生组织(WHO)生物标准化专家委员会在2018年制备了编号为16/190的AMH国际标准品候选品,并开展了协作标定,中国食品药品检定研究院应邀参加。按照WHO研究方案,采用多种化学发光法、酶联免疫法、酶联免疫荧光法和免疫荧光层析法进行标定。全球4个国家7个实验室提交了数据。结果显示,AMH国际候选标准品的免疫效价在282~1157 ng·安瓿^(-1)内,几何均值为511 ng·安瓿^(-1)[95%CI:426~612 ng·安瓿^(-1),n=16,均数变异系数(GCV)=42%],稳健均值为489 ng·安瓿^(-1),且稳定性满足要求。本实验室提交的免疫效价几何均值为448 ng·安瓿^(-1)(95%CI:377~531 ng·安瓿^(-1),n=8,GCV=23%),与WHO总结数据的相对偏差为-12.3%。因候选标准品与患者标本在多个方法中不具有互换性,且各种协作方法得到的结果存在较大差异,经WHO生物标准化专家委员会审核,确定16/190为人重组勒管抑制素/AMH第1次国际参考试剂,每安瓿489 ng。

血清中睾酮测定的能力验证研究

NIFDC-PT-319血清中睾酮测定能力验证计划是国家药品监督管理局项目,依据ISO/IEC 17043:2010《合格评定能力验证的通用要求》运作,该计划由中国食品药品检定研究院负责组织及实施。

趋化因子受体CXCR4在肾癌组织中的表达及其调控机制研究

目的研究趋化因子受体CXCR4在肾癌患者肿瘤组织中的表达水平,探讨CXCR4表达调控的可能机制。方法收集肾癌患者(未接受放化疗)的肿瘤组织和癌旁组织,将组织研磨后提取RNA,采用实时定量RT-PCR检测肿瘤组织和癌旁组织中CXCR4的表达水平;采用实时定量RT-PCR检测肾小管细胞HKC以及肾癌细胞系769P和786O中TGF-β的表达水平。复制缺陷型腺病毒Ad(E1-).s T和对照病毒感染786O细胞后24 h,采用2 ng/ml的重组人TGF-β刺激24 h,收集细胞,采用实时定量RT-PCR检测目的基因CXCR4的表达水平。同时,病毒感染后24 h,采用划痕法检测786O细胞的迁移能力。结果在肾癌患者中,肿瘤组织的CXCR4表达显著高于癌旁组织:12例患者中,有8例表达上调。与正常肾小管细胞相比,肾癌细胞系769P和786O中,CXCR4的上游分子TGF-β表达上调。在786O细胞中,TGF-β刺激可以显著提升CXCR4的表达水平;而Ad(E1-).s T可以在786O细胞中高效介导sT GF-βRIIFc的高效表达,并抑制CXCR4的表达和细胞的迁移能力。结论 CXCR4在肾癌组织中普遍表达上调,并受到TGF-β的调控,有望成为肾癌治疗的重要靶标。

人乳头瘤病毒L1基因分型国家参考品的升级换代研制

目的 对人乳头瘤病毒(HPV)L1基因分型国家参考品升级换代,以提高基于L1检测靶区的HPV核酸(分型)试剂的质量。方法 研制包含了34种不同型别HPV L1的质粒样品。经商业化核酸检测试剂复核验证,分装组成国家参考品。采用荧光PCR法进行量值标定,并溯源至WHO第一代HPV16 DNA国际参考品。结合不同实验室的协作标定研究和适用性验证结果,确定参考品的质量标准,并进一步考察参考品的稳定性。结果 国家参考品包括34种不同型别HPV样本和5种HPV阴性病原体,型别上囊括了HPV68a和HPV68b亚型。34种不同型别HPV DNA含量为6.26~7.08 Log10 IU/mL,并要求各试剂准确性应能检出其检测范围内的所有型别且分型正确,其检出限应不高于104 IU/反应。结论 成功建立了新一代HPV L1基因分型国家参考品,用于评价L1检测靶区的HPV核酸检测试剂的质量。

非典型趋化因子受体的研究进展

非典型趋化因子受体(atypical chemokine receptors,ACKRs)指的是一类不能通过经典G蛋白进行信号转导的、具有七次跨膜结构域(TM1~TM7)的蛋白,分布于多种细胞、组织和器官;能结合多种配体,还能与经典趋化因子受体(conventional chemokine receptors,c CKRs)形成异源二聚体。ACKRs通过调节趋化因子的丰度、定位及可用性发挥着多种功能,包括趋化因子内吞、转胞吞、清除、提呈和贮存。ACKRs对正常人体的生物学功能的发挥及各种病理过程的发生发展均起着重要作用。本文就ACKRs亚家族的每个成员及其配体特征、功能及相互作用机制进行综述,以期为将来开发有效预防和治疗人体多种疾病的靶向药物提供参考。

戊型肝炎病毒感染状态下兔粪便菌群的变化探究

本研究旨在探究HEV感染状态下兔粪便菌群的变化差异。本研究收集粪便HEV RNA阳性与阴性兔粪便各4份,分为P组(n=4,P1~P4)和N组(n=4,N1~N4),对粪便16S rDNA基因序列中的V3V4区域进行高通量测序,并对所得数据进行了生物信息学分析。α多样性及PCoA分析结果显示2组间的粪便菌群组成存在明显差异;与阴性对照组相比,HEV感染组的拟杆菌门、酸杆菌门、绿弯菌门等显著增多(P<0.05),瘤胃球菌属、拟杆菌属等丰度显著减少(P<0.05)。HEV感染后兔粪便菌群的构成、丰度等均存在一定差异,粪便菌群有可能成为HEV感染的潜在生物标志物。

人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒评价

目的评价人乳头瘤病毒(HPV)核酸检测剂盒的性能。方法用HPV基因分型参考品作为标准品,按照抽验方案的要求对抽样的HPV核酸检测试剂盒[聚合酶链反应(PCR)-荧光探针法]的准确度、特异度和检测限进行评价。结果准确度和检测限的结果均符合企业产品注册标准的要求,而特异度结果中存在着HPV型别交叉反应现象。结论医疗器械监督抽验工作应将国产和进口医疗器械产品的抽验工作均纳入体系,持续监测产品的性能。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪微生物鉴定准确度快速评价参考品的研制

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight massspectrometry,MALDI-TOF MS)技术,简称飞行质谱技术,可在短时间内完成对微生物种属水平的鉴定[1]。基本原理是使用已知菌种的蛋白质图谱建立数据库,利用不同菌种核糖体蛋白(2~20 kD)大小的差异,将未知样本的检测图谱与数据库中的微生物参考图谱进行比对,鉴定结果[2-3]。与传统的微生物表型和生理生化检测方法相比,质谱鉴定的分子量范围大、扫描速度快、操作通量高,且对样品纯度要求不高[4]。除了可鉴定常见细菌和真菌,对临床厌氧菌、苛养菌、丝状真菌以及分枝杆菌等疑难微生物和相对复杂样品的鉴定能力也更强,同时对耐药微生物的鉴定准确性相对较好[5]。