猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)抗体ELISA检测方法的建立与初步应用

目的建立猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)抗体ELISA检测方法,应用于临床样品中FHV-1抗体的检测。方法培养猫肾传代细胞(CRFK),接种FHV-1病毒,制备CRFK正常抗原和FHV-1特异抗原,滴定山羊抗猫IgG-HRP和抗原最佳工作浓度,并进行特异性、敏感性、稳定性及精密性实验。结果正常抗原、特异抗原和酶结合物最佳工作浓度分别为0.05μg/mL、10μg/mL和1∶5 000;正常抗原、特异抗原批内变异系数分别为8.7%和5.8%,批间平均变异系数分别为11.9%和6.6%;检测灵敏度为1∶6 400;与猫细小病毒(FPV)、猫杯状病毒(FCV)均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于25%。结论建立的ELISA方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强,可用于猫FHV-1抗体的检测。

长爪沙鼠仙台病毒(SeV)抗体ELISA检测方法的建立与应用

目的建立长爪沙鼠仙台病毒(Se V)抗体ELISA检测方法,用于长爪沙鼠体内仙台病毒抗体的检测。方法孵育鸡胚,接种Se V,制备鸡胚尿囊液正常抗原和Se V特异抗原,滴定酶结合物和抗原最佳工作浓度,并进行特异性、敏感性、精密性、稳定性实验。结果正常抗原、特异抗原和酶结合物最佳工作浓度分别为0.1μg/m L、2μg/m L和1∶5 000;正常抗原、特异抗原批内变异系数分别为9.6%和8.4%,批间平均变异系数分别为9.0%和5.9%;检测灵敏度为1∶10 240;与沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)、小鼠肺炎(PVM)、呼肠孤病毒3型(Reo3)均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于25%。结论建立的ELISA方法特异性、敏感性强,重复性、稳定性好,检测结果,准确、可靠。可用于长爪沙鼠体内Se V抗体的检测。