豚鼠弓形虫抗体ELISA检测方法的建立及应用

目的建立以弓形虫重组抗原的豚鼠弓形虫抗体ELISA方法，并进行初步应用。方法根据重组抗原的工作浓度包被酶标板，确定酶标二抗浓度，对方法的特异性、灵敏度、稳定性和重复性等进行测试。结果确定酶标二抗最佳稀释度为1：8000；与豚鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LCM）、仙台病毒（sv）、肺炎病毒（PVM）及呼肠孤3型（Re03）阳性血清均无交叉反应；对已知阳性血清的检测上限可达1：2560；6个月的稳定性试验显示A490值的相对偏差均小于15％；批内变异系数（cv）5．7％～9．5％，批间变异系数（CV）1．9％～9．0％；对182份样本的检测表明豚鼠弓形虫抗体阳性率为7．14％（13／182），与IFA检测结果的符合率为100％，与商品化试剂盒的阳性符合率为92-3％，阴性符合率为100％。结论建立的豚鼠弓形虫重组抗原ELISA检测方法可用以弓形虫抗体的常规检测。