斑马鱼在血液系统研究中的应用

斑马鱼为一种硬骨淡水鱼,其胚胎透明、发育和繁殖快,且70%以上的基因与人类相同。目前广泛地应用于遗传、发育、毒理、环境污染以及药物筛选等方面的研究。本文归纳整理斑马鱼血液系统常用的实验技术和检测方法,同时介绍与斑马鱼血液系统研究相关的常用斑马鱼转基因品系,以期为本领域的研究提供参考,促进斑马鱼在生命科学领域的应用。

虎杖3个单体成分对TGF-β1诱导A549细胞表型转化的干预作用

目的:探究虎杖苷、白藜芦醇和大黄素对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导下A549细胞表型转化的干预作用。方法:以1ng/mL TGF-β1诱导A549细胞,采用免疫荧光法观察虎杖苷、白藜芦醇和大黄素对表型标志性相关蛋白平滑肌α-肌动蛋白(SMα-actin)和纤连蛋白(fibronectin)表达的影响。结果:虎杖苷(25μmol/L)和白藜芦醇(20μmol/L)可抑制TGF-β1诱导的A549细胞SMα-actin和fibronectin的表达,大黄素(3.5μmol/L)对fibronectin的蛋白表达有抑制作用,对SMα-actin的表达有促进作用。结论:虎杖对肺纤维化的治疗作用可能通过多种不同结构类型的成分、不同的作用机制发挥疗效。

四物汤对模式生物斑马鱼血液系统与辐射损伤的影响

目的使用斑马鱼观察中药复方四物汤对辐射损伤血液系统的干预作用,明确斑马鱼是否可应用于中药对血液系统调控的研究。方法72只体重在0.14-0.20 g的4月龄成年雄性斑马鱼(Danio rerio)用于全部实验,首先取36只斑马鱼用于照射后血液发育动力学的变化观察,另外36只斑马鱼用于四物汤对照射后血液系统的干预作用研究。采用60Coγ射线照射,辐射剂量20 Gy,吸收剂量率97.33 cGy/min。在照射后血液发育动力学观察中,9只未照射作为0 d对照,余27只斑马鱼分别于照射后第7、14和30天麻醉,收集外周血细胞和肾髓中细胞,采用流式细胞仪分析细胞的绝对数量。依据照射后外周血和肾髓中细胞的动态变化情况判断血液发育动力学特征,藉此实施四物汤的药效观察。四物汤对照射损伤干预实验周期7 d,36只斑马鱼采用随机数表法分为未照射组、单纯照射组、药物2000组和药物5000组,每组9只。两个药物组的斑马鱼按上述条件20 Gy照射后第2天分别置于稀释了2000倍和5000倍的四物汤水中饲养,第7天收集各组斑马鱼的外周血和肾髓中细胞,比较判断四物汤对斑马鱼辐射损伤血液系统的干预作用。结果照射后斑马鱼血液发育动态变化明显,血液系统消融作用在第7天最明显,与未照射比较,斑马鱼的外周血细胞和肾髓总细胞数量分别下降26%和52%,差异均有统计学意义(t=4.535,28.987,P<0.05),肾髓中髓系单核细胞、淋巴细胞和红细胞数分别下降46%、79%和33%,差异均有统计学意义(t=18.457、66.900、9.872,P<0.05),前体细胞下降49%,但差异无统计学意义(P>0.05)。照射后第14天肾髓中各种细胞数均呈现上升,第30天恢复至照射前水平以上。斑马鱼照射后第2天开始连续6 d给予四物汤,药物5000组与单纯照射组比较,肾髓细胞总数、髓系单核细胞、前体细胞和红细胞分别增加了57%、125%、81%和35%,差异均有统计学意义(t=12.128、21.594、15.473、4.594,P<0.05),淋巴细胞增加了59%,而外周血红细胞数量两组比较差异无统计学意义(P>0.05);药物2000组各参数均与单纯照射组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论照射后斑马鱼血液系统发育呈现明显的先抑后扬的动态变化,一定浓度的四物汤对斑马鱼造血系统照射损伤有明显的干预作用,可为中药血液系统调控方面的研究提供参考。