推进组织学与胚胎学双语教学培养高素质医学人材——双语教学改革阶段性成果简介

经过两年多的组织学与胚胎学双语教学改革,我们在双语教学大纲编写、课程设置、教材建设、教学工作安排和学生考试等方面,已取得了阶段性的成果,达到了学校批准立项的教学改革专项(双语课程建设)研究课题预期目标,为我们进一步完善组织学与胚胎学双语教学改革打下了坚实的基础。

组织学与胚胎学课程应用TBL教学的初步探索

以团队为基础的学习(team based learning,TBL)教学是在以问题为基础的学习(problembased learning,PBL)教学基础上改革创新的一种新型教学模式,与传统的以教师为主体的教学模式存在着较大的差异,强调学生之间的团队合作。在运用TBL的过程中,我们发现该模式既明显提高了学生的学习积极性、主动性和团队合作精神,但同时也暴露了一些不足之处。针对这些不足,我们提出了一些可能的解决方案。这些经验和教训可为今后TBL模式在组织学与胚胎学教学中的应用提供有益的借鉴。

《Textbook of Histology and Embryology组织学与胚胎学》双语教材的使用初评

目前在医学院校全面引用医学专业原版外文教材进行双语教学可能有一定的难度。本文认为,在一定时期内,采用原版外语教材改编的双语教材进行授课,可能更有利于现行双语教学的开展,并平稳过渡到应用原版外语教材进行教学,这可充分调动教师和学生参与双语教学的积极性,达到教与学相长的目标。

留学生组织与胚胎学实验教学的教学方法探讨

随着各高校留学生的招生,留学生教学的研究成为一崭新的课题,其教学模式、教学方法及教学手段等问题都具有极大的探索价值。本文结合在组织胚胎学教学过程中的一些体会,探讨医学院校基础课开展医学留学生全英语教学的经验与体会,并提出了自己的一些建议。

《组织学与胚胎学》考试辅导教材在课程学习中的作用

为了在有限的教学时数下,更好地实现教好和学好组织学与胚胎学这门课程的目标,我们把多年来在授课、辅导和答疑工作中所得到的经验与教训经过总结归纳,精心编写了《组织学与胚胎学》考试辅导教材,让它在课程学习中起到辅助学习作用。在随访的教师和学生中认为,《组织学与胚胎学》考试辅导教材简明、实用,对组织学与胚胎学课程的学习起着相得益彰的重要作用。它相当教师的无名助手,学生的无名导师,利教利学。

以教材建设提升组织学与胚胎学课程教学水平的探索与实践

为了适应新时代医学教育发展的需要,本教学团队近年来大胆进行教学改革,探索与实践了组织学与胚胎学课程教材创新建设。根据国内组织学与胚胎学课程特点、课程性质、授课老师的教学能力和英语水平、学生的学习能力、英语水平及专业知识基础,我们组织了国内相关高等医学院校的部分教师编写了具有新时代特色的组织学与胚胎学课程理论课和实验课教材,并获得一些有利于提高该课程教学水平的教学成果。这些成果对于国内组织学与胚胎学课程在开展双语教学改革,培养高素质医学人材方面具有一定的指导意义,体现了教授们全程负责完成全英文组织学与胚胎学教学大纲,课程内容设置和双语教学工作安排,教授们积极参与全英文组织学与胚胎学教材的编写工作以及在核心学术期刊上发表相关的教学论文。同时,大胆让年青教师在全英文组织学与胚胎学双语教学中得到锻炼,提高他们在组织学与胚胎学课程开展双语教学的积极性及巩固其教学效果。

神经元中继器——新专业名词浅析

当成年哺乳动物发生严重脊髓损伤后,皮质脊髓束等下行神经纤维(轴突)是很难长距离跨越损伤处再生长,导致损伤处以下的瘫痪肢体的运动功能难以恢复。30多年前,有学者首次在脊髓损伤处成功移植了胚胎脊髓组织,并期待移植组织可以修复受损伤的脊髓结构和功能。由此,迈出了形成神经元中继器(neuronal relay)理念的第一步;设想通过移植同源性胚胎神经元在脊髓损伤处起到“手拉手接驳”中继上、下行神经传导通路的作用。

督脉电针与神经干细胞移植联合应用促进大鼠受损伤脊髓组织产生神经生长活性物质

目的探讨督脉电针与神经干细胞移植联合应用能否促进受损伤脊髓组织产生神经生长活性物质。方法成年大鼠分为正常组、对照组、神经干细胞移植组(NSCs组)、督脉电针组(电针组)和督脉电针+神经干细胞移植组(电针NSCs组)。除正常组外均实施T10段脊髓全横断手术,其中电针组和电针NSCs组于术后5d进行电针治疗。分别于术后14 d和28 d取材,进行受损伤脊髓组织环一磷酸腺苷(cAMP)含量的放射免疫检测;用Westenblotting检测神经营养素-3(NT-3)、神经营养因子受体(Trk)以及生长相关蛋白-43(GAP-43)的水平。结果1.在术后14 d,NSCs组、电针组和电针NSCs组的脊髓损伤区cAMP含量较正常组有增加。但除电针组外,脊髓损伤区的上段或下段组织cAMP含量低于正常组。在术后28 d,电针NSCs组脊髓损伤区上段、下段组织cAMP含量仍保持较高水平。NSCs组和电针NSCs组的脊髓损伤区cAMP含量较正常组有所增加。2.NT-3、Trk及GAP-43的表达以电针组和电针NSCs组较为明显,对照组和NSCs组的3种蛋白表达均低于电针组和电针NSCs组。结论督脉电针能促进受损伤的脊髓组织产生cAMP;督脉电针与NSCs移植联合应用能保持受损伤的脊髓组织较高水平的cAMP,而且NT-3、Trk及GAP-43的含量也有增高的趋势。

体外定向诱导胚胎干细胞分化为表皮样干细胞的研究

目的 探索体外定向诱导小鼠胚胎干细胞 (embryonicstemcell,ES)分化为表皮样干细胞的条件 ,为胚胎干细胞来源的表皮样干细胞的临床应用 ,及ES细胞的定向分化机制的研究奠定基础。 方法 采用与人羊膜共培养法对小鼠胚胎干细胞进行定向诱导。实验分 3组 :1 羊膜上皮面向上 ,铺布全孔底 ;2 羊膜上皮面向上 ,铺布半孔底 ;3 以不加羊膜组为对照。用流式细胞仪、免疫组织化学技术对分化后的细胞进行鉴定。 结果 共培养 3～ 4d后 ,在第 1、2实验组中的人羊膜上皮面上 ,小鼠ES细胞形成表皮样干细胞集落 ,表达高水平的表皮干细胞特异标志物整合素 β1 、CK19和CK15。流式细胞仪检测结果显示 :整合素 β1 、CK19和CK15阳性细胞比率均较对照组有显著差异 (P <0 0 1)。而在第 2实验组中无羊膜覆处 ,细胞贴壁生长 ,形成表皮样细胞单层 ,细胞呈多边形 ,排列紧密 ,表达整合素 β1 ,仅见少数CK19和CK15阳性细胞散布于表皮样细胞之间。流式细胞仪检测结果显示 :整合素 β1 阳性细胞率与对照组有显著差异 (P <0 0 1) ,而CK19和CK15阳性细胞率与对照组差异不明显。 结论 人羊膜可诱导小鼠胚胎干细胞向表皮样细胞定向分化 ,并提示生长在羊膜上皮面上的细胞克隆可能是表皮样干细胞 。

体外定向诱导人胚胎干细胞分化为表皮样干细胞的研究

[目的]探索体外定向诱导人胚胎干细胞(hES细胞)分化为表皮样干细胞的条件,为研究其定向分化机理及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础.[方法]将人胚胎干细胞单独(对照组)或与人羊膜上皮面向上全铺或半铺布半孔底共培养4～5 d,观察其形态变化并分别用β1整合素,CK15及CK19免疫组化检测人胚胎干细胞向表皮样干细胞的分化.[结果]人胚胎干细胞与人羊膜共培养4～5 d后,在人羊膜上皮面形成表皮样干细胞集落,表达高水平的表皮干细胞特异标记物β1整合素、CK15和CK19.在无羊膜覆盖处,细胞贴壁生长,形成单层表皮样细胞,细胞呈多边形,排列紧密,大部分细胞表达β1整合素.对照组大量细胞死亡,未见β1整合素阳性细胞.[结论]在体外人羊膜可定向诱导人胚胎干细胞分化为表皮样干细胞,并提示在羊膜上皮面的细胞克隆可能是表皮样干细胞,而贴壁生长的细胞可能大部分是表皮样瞬间放大细胞.

不同局部穴位电针对大鼠受损伤脊髓组织降钙素基因相关肽表达的影响

目的:观察不同局部穴位电针对大鼠受损伤脊髓组织降钙素基因相关肽CGRP表达和分布的影响。方法:将25只SD大鼠分为5组:正常对照组、脊髓损伤组、非穴位电针组、夹脊穴电针组和督脉穴电针组。在显微镜下予脊髓全横断术(正常对照组除外),自术后第7天分别采用局部选取电针非穴位、电针夹脊穴和电针督脉穴的方法治疗3d(脊髓损伤组不予任何治疗),取材并以免疫荧光组织化学染色的方法观察脊髓背角CGRP阳性染色区面积变化,用蛋白免疫印迹杂交法检测脊髓CGRP含量变化。结果:非穴位电针组和夹脊穴电针组的脊髓背角CGRP含量与脊髓损伤组比较,均有所升高(P<0.05),但其CGRP阳性染色区面积没有明显差异(P>0.05)。督脉穴电针组的脊髓背角CGRP含量和CGRP阳性染色区面积与非穴位电针组、夹脊穴电针组和脊髓损伤组比较,有明显增高、增大(P<0.05)。结论:不同局部穴位电针对大鼠受损伤脊髓组织表达CGRP有不同的影响,其中督脉穴电针能够明显促进大鼠受损伤脊髓组织表达CGRP。

督脉电针与NSCs移植联合应用对大鼠脊髓全横断损伤组织NT-3含量及受体表达的影响

目的:探讨督脉电针与神经干细胞(NSCs)联合应用对大鼠脊髓全横断损伤组织神经营养素-3(NT-3)含量及其受体表达的影响。方法:将30只成年大鼠分为对照14d组、督脉电针14d组(电针14d组)、神经干细胞移植14d组(NSCs14d组)、督脉电针+神经干细胞移植14d组(电针NSCs14d组)、神经干细胞移植30d组(NSCs30d组)和督脉电针+神经干细胞移植30d组(电针NSCs30d组)6组,所有动物均实施T10段脊髓全横断手术,其中电针组和电针NSCs组于术后5d进行电针治疗。结果:①电针NSCs14d组受损伤的脊髓组织含有较高水平的NT-3,其次是电针14d组和NSCs14d组,对照14d组受损伤的脊髓组织含有较低水平的NT-3。②NSCs30d组和电针NSCs30d组脊髓全横断处的移植神经干细胞均有TrkC表达。结论:督脉电针与神经干细胞移植联合应用能够明显增高大鼠脊髓全横断损伤处邻近组织的NT-3水平;在大鼠脊髓损伤处及邻近组织有些移植神经干细胞表达TrkC。

人胚胎干细胞源性表皮样干细胞分化潜能

[目的]探讨人胚胎干细胞源性表皮样干细胞的分化潜能,为研究其分化的调控机制及寻找新的人皮肤组织工程种子细胞奠定基础。[方法]将人胚胎干细胞与人羊膜共培养4 d,定向诱导其分化为表皮样干细胞克隆,用胰酶消化后移植裸鼠皮下20 d、30 d及50 d。对移植后细胞的分化情况进行了形态学和免疫组织化学观察分析。[结果]人胚胎干细胞源性表皮样干细胞在裸鼠皮下20-30 d后,细胞分化为由单层或复层上皮样细胞构成的管状或泡状结构,它们可分别呈CEA和CK18阳性。种植50 d后,除上述结构外,可见角化复层扁平上皮、毛囊样、汗腺样及皮脂腺样等结构。[结论]研究结果提示人胚胎干细胞源性表皮样干细胞具有分化为角化复层扁平上皮及毛囊样、汗腺样和皮脂腺样等结构的潜能。

壳聚糖与Ⅰ型胶原制备组织工程复合支架材料的扫描电镜研究

【目的】通过扫描电镜观察壳聚糖和Ⅰ型胶原在不同温度下以不同比例制备成冻干状组织工程复合支架材料的微观结构,以获得最佳浓度、比例、温度匹配组合,制备理想的组织工程复合支架材料。【方法】在-5℃、-20℃和-80℃将不同浓度的壳聚糖、Ⅰ型胶原以及它们不同比例的混合液冷冻12h后冻干24h,扫描电镜观察不同材料表面和内部的微观结构,并计算其平均孔径和孔隙率。【结果】壳聚糖、Ⅰ型胶原以及它们的混合液冻干后都形成白色海绵状固体,冷冻温度越低冻干后材料的孔径越小,孔隙率越低;材料的浓度越高冻干后孔径越小,孔隙率越低;壳聚糖-Ⅰ型胶原混合液中壳聚糖含量越高,材料冻干后孔径越小,孔隙率越低。【结论】壳聚糖-Ⅰ型胶原复合支架的孔径和溶液浓度、二者配比以及冻干前的冷冻温度密切相关。

结缔组织铺片脂肪组织油红染色在组织学实验教学中的应用

目的在传统结缔组织铺片基础上开展脂肪组织油红染色方法在医学本科生组织学实验教学中的应用。方法学生先进行疏松结缔组织铺片,并施行脂肪组织油红o-甲苯胺兰-伊红三重染色,然后镜下观察。结果油红o染色把结缔组织中的脂肪细胞内脂滴保存下来并染上红色。脂肪组织中央的细胞脂滴均匀红染,充满胞浆,周边的脂肪细胞胞浆中油红染色很少,细胞呈空泡状,显示出脂肪细胞亚群存在。甲苯胺兰染色使得疏松结缔组织中肥大细胞染成紫红色,胞核染色浅,细胞数量多、成群分布。伊红可使得结缔组织内除脂肪细胞、肥大细胞意外的其他细胞的胞浆和胶原纤维染成淡红色。结论传统的组织学平铺片技术基础上引入脂肪油红o-甲苯胺兰-伊红三重染色,可增强学生动手能力,并能很好地了解输送结缔组织中细胞的不同表型和分布,丰富组织学内容,把教学、科研连接一起,达到提高实验教学质量的目的。

人羊膜定向诱导胚胎干细胞分化为表皮样细胞机理的初步探讨

目的 :初步探讨人羊膜诱导小鼠胚胎干细胞向表皮样细胞定向分化的机理。方法 :小鼠胚胎干细胞与人羊膜在双层 6孔培养板中共培养 4 - 5d ,对照组未加羊膜 ,观察其形态学分化。分别用β1整合素、角蛋白 19/15和套膜蛋白免疫组化检测胚胎干细胞向表皮样细胞的分化。结果 :共培养 4 - 5d后 ,小鼠胚胎干细胞分化为表皮细胞样的单层细胞 ,细胞排列紧密 ,呈多边形 ,免疫组织化学染色显示 ,大部分细胞呈现 β1整合素阳性 ,少数细胞呈角蛋白 19和角蛋白 15阳性 ,未见套膜蛋白阳性细胞 ,对照组大部分细胞死亡 ,存活细胞形态各异 ,未见β1整合素、角蛋白 19/15和套膜蛋白免疫组化染色阳性细胞。结论

灵芝孢子在降低维甲酸诱导胚胎小鼠发生神经管畸形过程中对Cdk4表达的影响

目的探讨灵芝孢子在降低维甲酸诱导胚胎小鼠发生神经管畸形过程中对依赖细胞周期蛋白激酶4(Cdk4)表达的影响。方法给予实验对照组和灵芝孢子组妊娠E7.75d的小鼠一次性胃饲维甲酸,造成这2组孕鼠的胚胎出现神经管畸形。然后,给予灵芝孢子组孕鼠胃饲灵芝孢子溶液。在孕期E10.5d时取出2组孕鼠的胚胎,应用免疫荧光组织化学染色和Western blotting检测胚胎神经管神经上皮依赖细胞周期蛋白激酶4(Cdk4)的表达情况。结果在灵芝孢子组可以观察到形态正常的胚胎中,神经管的神经上皮细胞有Cdk4的表达,其表达水平与空白对照组及正常对照组相比较没有明显差异。在灵芝孢子组形态异常的胚胎中,其神经管的神经上皮细胞也有Cdk4的表达,但其表达水平与空白对照组及正常对照组相比较是低的。结论灵芝孢子可能是通过促进神经管神经上皮细胞上调Cdk4的表达来减轻维甲酸诱导的胚胎小鼠神经管畸形。

吗啡对大鼠脊髓Ⅱ板层中受损伤坐骨神经的传入纤维终末的影响——抗氟化物酸性磷酸酶组织化学研究

目的 探讨吗啡对钳夹损伤坐骨神经后其传入纤维终末在脊髓Ⅱ板层分布的影响。 方法 用显示抗氟化物酸性磷酸酶 (FRAP)组织化学方法 ,借助图像分析仪测量损伤坐骨神经后 15d和 30d吗啡组和对照组大鼠脊髓Ⅱ板层FRAP阳性反应物面积。 结果 损伤坐骨神经后吗啡组和对照组大鼠脊髓Ⅱ板层FRAP阳性反应区均有不同程度的缺失 ;对照组损伤坐骨神经后 30d的FRAP阳性反应物面积比 15d的FRAP阳性反应物面积增大 40 %。吗啡组损伤坐骨神经后 30d的FRAP阳性反应物面积比 15d的FRAP阳性反应物面积增大 2 2 %;同时也比对照组损伤坐骨神经后 30d的FRAP阳性反应物面积增大 19%。 结论 随着损伤坐骨神经后大鼠存活时间延长 ,其脊髓Ⅱ板层FRAP阳性反应物面积呈恢复性增大 ;吗啡能使坐骨神经损伤大鼠脊髓Ⅱ板层的FRAP阳性反应物面积明显增大。

灵芝孢子降低维甲酸诱导的孕鼠胚胎神经管畸形的发生

目的探讨灵芝孢子能否促进受维甲酸诱导,而停滞在G0/G1期的胚胎神经管神经上皮细胞重新进入细胞周期循环,继续增殖和分化,减少神经管畸形的发生。方法于实验对照组和灵芝孢子组小鼠孕期胚胎(E)7.75d时一次性胃饲全反式维甲酸,造成这两组孕鼠的胚胎出现神经管畸形。然后,给予灵芝孢子组孕鼠胃饲灵芝孢子溶液。在孕期E10.5d时取出两组孕鼠的胚胎,分别计数胚胎的神经管畸形发生率。应用免疫荧光组织化学染色和流式细胞仪检测胚胎神经管神经上皮的巢蛋白(nestin)表达情况。应用DNA定量荧光染色和RT-PCR技术检测胚胎神经管依赖细胞周期蛋白激酶2(Cdk2)mRNA和Cdk4 mRNA的转录。结果灵芝孢子组孕鼠胚胎的神经管畸形发生率显著低于实验对照组。神经管神经上皮细胞表达nestin的百分率也明显大于实验对照组。实验对照组孕鼠胚胎的神经管细胞在G0/G1期的比例则显著高于灵芝孢子组,但是实验对照组神经管细胞S期的比例低,低于灵芝孢子组形态正常的胚胎神经管细胞。RT-PCR检测发现,灵芝孢子组孕鼠胚胎神经管细胞能够正常转录Cdk4 mRNA,而实验对照组则低转录Cdk4 mRNA。结论灵芝孢子能够减少维甲酸诱导的妊娠小鼠孕期E10.5d胚胎神经管畸形的发生。