微生物学教学标本长期保存的研究

在微生物学教学中,常需制备细菌和真菌等培养物标本,供学生实验示教观察。然而,这些标本需临时制备,且存在传染的危险性。为此我们依据甲醛蒸气熏蒸消毒的原理创用“甲醛液熏蒸法”保存微生物学教学标本,经长期的使用观察,效果甚为满意,现报告如下。

广州市某大学学生肺炎支原体感染的血清流行病学研究

本文报道广州市某大学86年级新生自入学开始至1年半期间内,从先后三次健康检采集血清标本共1064份,应用微量补体结合试验测检其肺炎支原体(MP)抗体,阳性率第一次(1986.9)为者225名,血清的MP补结抗体阳性率(阳转率)分别为0.89%(2/225)、22.42%(50/223)和20.0%(35/175)。第二、三次血清MP补结抗体阳转率较第一次的阳性北有非常显著差异(P值<0.01)。提示该批大学生在入学一年半期间内,可能发生过MP感染的流行。

单克隆抗体免疫结合物治疗裸鼠CEM T-淋巴瘤的研究

应用抗CDT抗原决定簇的单克隆抗体3A1与抗癌药Adriamycin交联成免疫结合物(免疫导向药物),在人T淋巴瘤裸鼠模型体内进行治疗试验,结果显示2.0mg/kg单抗免疫结合物为最佳治疗剂量,可作为治疗T淋巴瘤的一种有效制剂。

应用生物素标记的凝集素分析登革Ⅱ型病毒糖蛋白

应用十二种生物素标记的凝集素,分析了经SDS-PAGE和电转印分离的登革Ⅱ型病毒(D_2V)糖蛋白。结果表明:D_2V的包膜糖蛋白E可与三种D-甘露糖特异的凝集素(conAPSA及LCA)结合,提示E蛋白的寡糖链为高甘露糖型。D_2V的糖基化非结构蛋白NS_1可与两种D-甘露糖特异的凝集素conA及LCA结合,提示NS_1的寡糖链亦为高甘露糖型。实验结果还显示了一些可能为C6/36细胞感染D_2V后新合成、合成量增加或减少以至完全受抑制的糖蛋白成分,有关这些糖蛋白的性质、功能、意义尚不清楚。在本实验条件下,这种生物素标记凝集素印迹法证明了其敏感性和糖基特异性,可以作为分析各种微量含糖大分子的一种实用方法。

骨髓增生异常综合征的免疫与临床

近年来,骨髓增生异常综合征的临床免疫学研究发展很快。本文综述其发病机理、临床表现、实验室检查、治疗和预后等方面与临床免疫学相关的研究进展。

生物高技术与新一代疫苗

接种疫苗在预防传染病方面已取得显著成效。通过接种牛痘苗,在全球范围内消灭了天花,就是最成功的例子之一。但是,传染病仍然是人类健康的严重威胁。据世界卫生组织估计,每年约有500万儿童死于白喉、百日咳、破伤风、结核、脊髓灰质炎、麻疹等传染病,另有500万儿童因患上述传染病而导致残疾。全世界约有2亿人感染乙型肝炎病毒(HBV),1亿5千万人患疟疾,爱滋病(AIDS)的流行正迅猛增多,这些都急需疫苗加以控制。

黄病毒的分子生物学——进展与展望

1984年国际病毒分类委员会(ICTV)建议将黄病毒属从披膜病毒科(Togaviridae)划出来成为新的病毒科——黄病毒科(Flaviviridae)。Westaway等给黄病毒科作了如下的定义:由一组有包膜的单链RNA病毒组成,直径为40—50nm。包膜通常含糖蛋白;RNA有传染性,RNA的分子量约为4×10~6Dalton,3′末端缺乏多聚腺苷酸(PolyA)。体外实验中,病毒基因组RNA可翻译出结构蛋白,无亚基因组(Subgenomic)mRNA合成。成熟病毒颗粒的形态发生位于改变了的内浆网小池(cisternae)中。黄病毒科目前仪由黄病毒属(Flavivirus)组成,黄病毒属大约包括70种病毒。

海南岛斑点热和斑疹伤寒立克次体抗体检测报告

斑点热群(Spotted Fever Group,SFG)立克次体感染在中国北部已经证实,最近在中国南部西双版纳也有报告。冯慧敏等 1986年在海南通什地区作过血清学调查,发现当地居民1.5％斑点热群立克次体抗体阳性。内田孝宏 1986年在日本四国地区自患者血液分离出一株斑点热群立克次体,经美国德克萨斯大学医学院鉴定为斑点热群中一个新种。

人α1/158Ⅴ型(α1c型)干扰素基因在大肠杆菌中的表达及其产物的初步纯化

采用DNA聚合酶链反应(PCR)技术,将本实验室从中国人胎肝细胞染色体DNA中发现和分离的IFN-α1/158V基因的原始克隆,改造成适于进行非融合蛋白原核表达的结构形式,并在大肠杆菌中获得高效表达。测得重组IFN-α1/158V的抗病毒活性为1.9×10~7单位/升菌液。随后又采用以单克隆抗体亲和层析为主的纯化流程对表达产物进行初步纯化,获得了在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现单一条带的纯化产物。

人ω1型干扰素基因在大肠杆菌中的表达

人ω型干扰素(huIFN-ω)是继α、β、γ后被发现的第4种干扰素型别。IFN-ω除具有与IFN-α相似的抗病毒功能外,在结构上还与动物滋养层干扰素高度相似,因此它既是人体滋养层蛋白启蒙研究的工具,又可能为人类生殖生物学研究提供直接信息。本文作者曾采用聚合酶链反应(PCR)技术首先在国内分离和克隆了IFN-ω1结构基因,这一初始克隆包括完整的成熟多肽及部分信号肽编码区。在此基础上。

人脐静脉内皮细胞的培养和连续传代

本实验用新生小牛视网膜提取物作血管内皮细胞生长促进剂,成功地使人脐静脉内皮细胞在体外连续培养23代以上。细胞倍增时间平均为16.6h,细胞传代时间平均为5 d,传代比率为1:2～1:3。用ABC法证明细胞内存在Ⅷ因子相关抗原(FⅧr-Ag),透射电镜下可见胞浆内含WP(Weibe1-Palade)小体,证实所培养的细胞为血管内皮细胞。

用PCR技术扩增恙虫病立克次体Sta58主要抗原基因的部分片段

参照国外发表的恙虫病立克次体Karp株sta58全基因序列,合成1对DNA引物(27个碱基和23个碱基),以Karp DNA为模板,成功扩增了长约Ikb的DNA片段。将PCR技术应用于立克次体研究,为今后用PCR检测立克次体以及立克次体分子克隆研究起了探索作用。

恙虫病立克次体Sta58主要抗原基因片段的克隆

作者利用其采用ＰＣＲ技术从恙虫病立克次体基因组中扩增出Ｓｔａ５８主要抗原基因的部分片段，约１ｋｂ，克隆入质粒ｐＳＰ７２的ＢａｍＨＩ、ＳｍａＩ位点，建重组质粒ｐＳＰＲＫ９，又将ｐＳＰＲＫ９中的ＡｃｃＩ小片段约５００ｂｐ亚克隆至ｐＳＰ７２构建重组质粒ｐＳＰＲＫ７。以上无性繁殖系的建可为我国开展恙虫病立克次体核酸杂交研究提供特异核酸探针。

肺炎支原体蛋白质抗原和核酸成分的研究进展

本文综述了用免疫吸印等技术对肺炎支原体(MP)粘附因子蛋白P_1的生物学特性和功能的研究动态;文献报道包括P_1在内的MP各蛋白质成分与其他支原体间存在交叉反应,但用P_1作抗原仍可提高免疫学试验的特异性。核酸杂交技术在MP感染的临床诊断实用上有着广阔的前景。在P_1氨基酸排列和基因的核酸序列方面研究也有一定的突破。

登革病毒RNA诊断技术进展

近年核酸杂交、多聚酶链反应(PCR)新技术的建立、登革病毒(DENV)基因组克及序列分析成功,使DENV感染的诊断,从病毒分离、血清抗体检查,进入到对病毒RNA进行诊断的分子生物学新阶段。本文简述用核酸杂交技术及PGR诊断DENV-RNA的进展。

病毒核酸和蛋白分析的原理

病毒是由核酸和蛋白质两种基本成份所构成的一类最简单的特殊生物。它们严格地寄生于细胞内,以基因复制的方式进行繁殖。因而又有“分子生物”或“寄生分子”之称。 病毒学作为一门相对独立学科的历史还不到40年,进展却比较迅速。这与现代分子生物学方法的运用是分不开的。由于核酸和蛋白是病毒的主要功能成份,所以,在病毒学研究中,对核酸和蛋白的分析显得特别重要。病毒学的各个研究领域都涉及病毒核酸和蛋白的分析。

登革热Ⅱ型病毒受体的初步研究

本实验用甲基纤维素复盖层的c_6/36单层细胞微量蚀斑法的间接免疫荧光法,初步观察了登革热Ⅱ型病毒与靶细胞的联接反应情况。同时还制备了四种细胞的可溶性膜制剂,并研究了它们对登革热Ⅱ型病毒的抑制活性。结果提示,对登革热Ⅱ型病毒敏感的细胞表面存在登革热Ⅱ型病毒受体,在触发病毒感染阶段起重要作用。

轮状病毒感染中血清抗体对病毒多肽的反应性

建立人轮状病毒(HRV)电转印免疫印迹技术(electrotransfering immunoblotting,ETIB)分析了3个不同血清型别的HRV抗原与同型及异型豚鼠抗血清的ETIB反应。在此基础上,以HRV Wa,Yo,Hochi株为抗原,用ETIB法检测46例急性腹泻患儿,17例正常婴幼儿及30例脐带血血清中抗HRV各种多肽的抗体及其出现的动态。结果提示,不同血清型HRV每株的内外衣壳蛋白之间,分别具有共同的某些抗原决定簇。根据HRV ETIB反射扫描结果分析,HRV毒株之间其Vp3,Vp7显示出血清型别的特异性。HRV感染的病儿对Vp2、Vp6的抗体免疫反应性较强。各类多肽抗体的出现似有时间上的序次,其中以Vp6的抗体出现于病程的早期,其次是VpZ抗体。此外还发现病人血清HRV-ETIB反应阳性与自粪便中检出HRV-RNA阳性结果具相关性;在7例HRV-ETIB抗体阳性的脐血和正常婴幼儿血清中,均未发现VpZ的抗体。

小儿糜烂性口腔炎病毒病因及干扰素对病毒的抑制作用

本文研究了小儿糜烂性口腔炎的病毒病因,用人胚肾细胞及Hep—2细胞分离病毒,26例患儿有21例阳性(80.7％),从中取五株病毒进行鉴定,细胞病变特点属疱疹病毒,且均可被抗HSV—I抗体中和,结果表明HSV—I是本病的主要病原。体外实验证明,白细胞干扰素对新分离的HSV—I有较强的抑制病变作用,2.4～2.9Iu/ml白细胞干扰素即可抑制病毒的50％CPE。临床上试用干扰素局部治疗必获得显著的疗效。

登革Ⅱ型病毒(D_2V)空斑的快速滴定法

病毒空斑滴定法,是了解病毒含量的一种重要方法。过去的传统滴定法费时,耽误结果观察。目前,一些实验室致力于快速法而加以改进。益继鸿等报道,采用HeIa等细胞株对脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型等病毒进行了速成空斑测定,认为结果满意。登革Ⅲ型病毒(D_2V)空斑的滴定,通常亦需于24小时前预先制备C_6/36白纹伊蚊细胞板。