CTLA4Ig和CD40LIg基因修饰的骨髓间充质干细胞在肝移植排斥反应中的作用

目的探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白（CTLA4Ig）和白细胞分化抗原40配体免疫球蛋白（CD40LIg）基因修饰的骨髓间充质干细胞（BMSCs）在大鼠肝移植排斥反应中的作用及其可能的机制。方法采用改良“Kamada”双袖套法建立Lewis-BN大鼠原位肝移植模型75只，随机分为5组，每组15只。A组（对照组）：肝移植时门静脉输注等渗盐水；B组（BMSCs组）：肝移植时门静脉输注BMSCs；C组（CTLA4Ig转基因BMSCs组）：肝移植时门静脉输注携带CTLA4Ig基因的BMSCs；D组（CD40LIg转基因BMSCs组）：肝移植时门静脉输注携带CD40LIg基因的BMSCs；E组（CTLA4Ig和CD40LIg转基因BMSCs组）：肝移植时门静脉输注CTLA4Ig和CD40LIg转基因的BMSCs。观察大鼠术后存活时间和肝功能变化情况，HE染色观察移植肝脏病理形态学改变，酶联免疫吸附法检测大鼠外周血中白细胞介素2（IL-2）、IL-4、IL-10、干扰素（IFN）Y水平。多组样本均数的比较采用单因素方差分析，多组生存率比较采用Kaplan—Meier生存曲线分析。结果术后E组大鼠存活时间显著长于A、B、C组和D组（F=18．634，p=0．018），C组和D组又较A、B组显著延长（p〈0．05），C组和D组的差异无统计学意义护〉0．05）。术后第10天A组丙氨酸氨基转移酶、总胆红素水平明显高于4个治疗组（p〈0．05）。A组术后移植肝HE染色显示重度排斥反应；B组显示中度排斥反应；C组和D组显示轻度排斥反应；E组病理学检查未显示明显排斥反应。术后与4个治疗组相比，A组IL-2、IFNv水平明显升高，而IL-4、IL-10水平显著降低∽值均〈0．05）。结论CTLA4Ig转基因BMSCs联合CD40LIg转基因BMSCs输注能显著抑制肝移植大鼠急性排斥反应，有效延长移植肝存活时间，其效果要优于单纯BMSCs组和单基因修饰BMSCs组。