鼻咽癌p53蛋白表达与p53基因结构改变及mdm_2蛋白表达的关系和意义

目的：探讨影响NPCp53蛋白表达的因素、p53和mdm2蛋白在NPC发生中的变化和意义。方法：采用免疫组化法检测p53和mdm2蛋白、Southern杂交法检测p53基因结构。结果：31例p53蛋白阳性的NPC中10例（32．3％）有p53基因结构改变；在2．8／6kh（4例）与8kb（6例）HindⅢ杂交片段者之间，mdm2蛋白表达有显著差异（P＝0．0238）。无p53基因结构改变的21例NPC中12例mdm2蛋白表达阳性和9例阴性。p53和mdm2蛋白表达在中－重度异型性改变（32例）与轻度异型性改变（21例）之间，或与NPC（34例）之间均有显著差异（P＜0．01）；两蛋白同时表达率在中一重度异型性改变时从“0”骤升至50．0％，非常接近NPC（54．3％）。结论：p53基因结构改变和mdm。蛋白过度表达是影响NPCp53蛋白过度表达的两个因素；不同类型p53基因结构改变所产生的p53蛋白激活MDM2的功能并不相同；p53和mdm2蛋白过度表达，尤其两蛋白协同作用，可能在NPC发生中起重要作用。

应用组织微阵列技术分析各期鼻咽癌组织p16的表达

目的 构建高通量组织微阵列 /组织芯片 (high throughputtissuemicroarray/tissuechip) ,明确p16基因表达与鼻咽癌的相关性及探讨组织芯片技术的可行性。方法 用组织阵列仪制备按不同临床分期排布的组织芯片 ,然后用免疫组织化学LSAB法检测一张组织芯片上 2 5 9例鼻咽活检组织样本中p16蛋白表达 ,并分析p16蛋白表达在鼻咽癌组织的分布状况及其与临床分期的相关性。结果在正常鼻咽黏膜组织、Ⅰ～Ⅳ期及未分期鼻咽癌组织中p16蛋白的缺失情况分别为 0 / 18、3/ 3、86 3%(38/ 44 )、86 8% (5 9/ 6 8)、82 1% (2 3/ 2 8)、88 8% (87/ 98)。鼻咽癌组织中p16蛋白表达率低于鼻咽非癌组织 (χ2 =82 5 8,P <0 0 0 1) ,p16蛋白表达与鼻咽癌的临床分期无显著相关性 (χ2 =0 0 9,P =0 76 9)。结论 鼻咽癌中p16蛋白的高频缺失提示p16基因在鼻咽癌的发生发展中起重要作用 ,而这种表达缺失在早晚期鼻咽癌中的一致性又提示p16蛋白缺失是鼻咽癌形成过程中的一个早期事件。应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的 ,具有快速、方便、经济、准确的特点。

应用间期荧光原位杂交技术检测原发性肝细胞癌c-myc基因扩增的临床意义

目的 探讨c myc基因在原发性肝细胞癌中的扩增及其与临床及预后的关系。方法 应用间期核荧光原位杂交技术对 10 0例原发性肝癌和 6例带卫星结节的肝癌组织标本进行检测。结果 92 % (92例 )原发性肝癌组织存在c myc基因扩增 ,其中高拷贝数扩增达 37% (37例 ) ,低拷贝数扩增 5 5 % (5 5例 ) ,只有 8% (8例 )无扩增。结合临床资料分析 ,c myc扩增与患者临床分期、肿瘤大小和病理类型无明显相关 (P >0 .0 5 ) ,原发肿瘤和相应卫星结节肿瘤组织具有相似的c myc基因扩增水平和相同病理类型的特点。在可随诊两年半的 90例病例中 ,91.1% (82例 )病例有c myc基因扩增 ,其中高拷贝数扩增 34例 ,低拷贝数扩增 48例 ,无扩增 8例。分析c myc扩增程度与患者术后复发的时间及生存期关系 ,发现c myc高拷贝数扩增的病例术后 1年内复发率 (70 .6 % ,2 4/ 34 )高于c myc低拷贝数扩增 (39 6 % ,19/ 48)和无扩增者 (12 5 % ,1/ 8) ,三者之间差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。而在术后 >12个月的复发率则与c myc不同扩增程度间差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。另外 ,c myc高拷贝数扩增者术后 2年存活率明显低于低拷贝数扩增和无扩增者 (P =0 .0 0 1)。结论 原发性肝细胞癌存在高频率的c myc基因扩增 ,基因扩增与患者临床?

钙结合蛋白S100A2对肝癌细胞生长增殖的抑制作用

目的 探讨钙结合蛋白S10 0A2对肝癌细胞生长增殖的抑制作用。方法 构建绿色荧光蛋白 S10 0A2融合基因的重组表达载体 ,经脂质体介导转入QGY770 1肝癌细胞中进行表达 ,应用荧光显微镜直接观察融合蛋白的表达和定位 ;通过肿瘤细胞集落形成实验 ,观察外源性S10 0A2表达对体外培养细胞增殖能力的影响 ;以流式细胞仪分析S10 0A2对肿瘤细胞增殖周期的影响 ;通过裸鼠接种实验 ,观察S10 0A2对肿瘤细胞在体内增殖能力的影响。结果 绿色荧光蛋白 S10 0A2融合蛋白表达、定位在胞浆和胞核 ,而单一的绿色荧光蛋白 (载体对照 )则只定位在胞浆中 ;细胞在液体和半固体培养基中培养的细胞集落形成率 ,实验组 (QGY770 1/A2 )明显低于载体对照组 (QGY770 1/pc)和细胞对照组 (QGY770 1) ;细胞周期分析显示 ,实验组细胞有G1和G2 期阻制 ,DNA合成量明显减少 ;实验组裸鼠体内移植瘤重量明显低于两个对照组。结论 外源性S10 0A2可抑制QGY770 1肝癌细胞在体外的集落形成和在裸鼠体内的增殖能力 ,并对细胞周期有阻滞作用。