硒对糖尿病患者的内皮细胞表达P38信号通路和MCP-1的影响

目的:探讨P38MAPK和MCP-1的关系及其在糖尿病动脉粥样硬化中的作用以及硒的作用机制。方法:分别以高葡萄糖、糖基化终末产物(AGE)、胰岛素或过氧化氢体外孵育人脐静脉内皮细胞(HUVEC),并以Westernblot法或RT-PCR法检测P38MAPK和MCP-1在HUVEC的表达。检测并比较有无P38MAPK特异抑制剂SB203580或硒预处理,以上4种因素对P38MAPK和MCP-1在HUVEC表达的影响。结果:高葡萄糖、AGE、胰岛素或过氧化氢均可独立激活P38MAPK,并增加MCP-1在HUVEC的表达。SB203580显著抑制MCP-1的表达。硒抑制P38MAPK的活化并减少MCP-1的表达。结论:P38MAPK是MCP-1的上游信号分子,表明P38MAPK可能是糖尿病动脉粥样硬化发生的始动信号之一。硒可能通过抑制P38MAPK磷酸化而抑制MCP-1表达,有预防动脉粥样硬化作用。

辛伐他汀与P38信号通路对Ⅳ型胶原及纤维连接素表达的影响

目的:研究P38信号通路(P38MAPK)与Ⅳ型胶原(ColⅣ)蛋白及纤维连接素(FN)mRNA表达的关系,探讨P38MAPK在糖尿病肾病中的作用,以及辛伐他汀(SI)在防治糖尿病肾病中的作用机制。方法:在体外模拟糖尿病状态,分别以高葡萄糖(HG)、糖基化终末产物(AGE)或过氧化氢(H2O2)孵育大鼠肾小球系膜细胞(RMC),以Westernblot或RT-PCR检测P38MAPK和ColⅣ及FN在RMC中蛋白或mRNA的表达。检测并比较有无P38MAPK特异性抑制剂(SB203580)或SI预处理时,以上3种因素对P38MAPK和ColⅣ蛋白及FNmRNA在RMC中表达的影响。结果:HG、AGE或H2O2均可单独激活P38MAPK,增强磷酸化P38MAPK、ColⅣ及FN在RMC中的表达。SB203580可显著抑制ColⅣ蛋白及FNmRNA的表达;SI可抑制P38MAPK的活化并减少ColⅣ蛋白及FNmRNA的表达。结论:P38MAPK是ColⅣ及FN的上游信号分子,表明P38MAPK可能是糖尿病肾病发生的始动信号之一。SI可能是通过抑制P38MAPK磷酸化进而抑制ColⅣ蛋白及FNmRNA的表达,具有防治糖尿病肾病的作用。

P38信号通路在人脐静脉内皮细胞表达环氧化酶-2中的作用

目的:探讨P38信号通路(P38MAPK)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达环氧化酶2(COX2)的作用,从而研究P38MAPK在糖尿病动脉粥样硬化中的作用。方法:分别以高葡萄糖、糖基化终产物(AGE)、高胰岛素和过氧化氢刺激HUVEC;检测P38MAPK和COX2在HUVEC的蛋白表达。以P38MAPK特异性抑制剂SB203580预处理HUVEC后,再用上述四种因素刺激HUVEC,检测COX2在HUVEC的蛋白表达。结果:高葡萄糖、AGE、高胰岛素和过氧化氢均可独立激活P38MAPK,使磷酸化P38MAPK表达量增加,COX2蛋白表达量也增加;SB203580预处理后,COX2表达被显著抑制。结论:P38MAPK调控COX2的表达,它是COX2的上游信号分子,可能是动脉粥样硬化发生的始动信号之一。

巨噬细胞中ABCA1表达及曲格列酮干预的影响

目的研究在不同的刺激因素及曲格列酮的干预作用下ATP结合盒转运体A1(ATP-binding cassette A1,ABCA1)在巨噬细胞中表达的变化,从而探讨ABCA1在糖尿病动脉粥样硬化中的作用机制及曲格列酮的防治作用。方法在体外模拟糖尿病状态,分别以高葡萄糖、高胰岛素或糖基化终末产物刺激巨噬细胞,以曲格列酮预处理,再以上述3种因素刺激,检测巨噬细胞中ABCA1 mRNA表达的变化。结果高葡萄糖、高胰岛素或糖基化终末产物均可抑制ABCA1 mRNA在巨噬细胞中的表达;曲格列酮预处理后,ABCA1 mRNA在巨噬细胞中的表达增加。结论糖尿病状态下的多种因素可抑制ABCA1 mRNA在巨噬细胞中的表达;曲格列酮可减弱这种作用,提示高糖等因素减少ABCA1 mRNA表达的作用可能与PPARγ有关。曲格列酮可能延缓糖尿病患者患动脉粥样硬化。

高压力及曲格列酮对THP-1源泡沫细胞ATP结合盒转运子A1表达的影响

目的观察高压力及曲格列酮干预对THP-1源泡沫细胞ABCA1 mRNA及蛋白表达的影响。方法将THP-1源泡沫细胞分为9组:对照组、120组、140组、160组、180组、120T组、140T组、160T组和180T组。对照组、120组、140组、160组和180组分别在0～180mmHg压力下培养48h;其余4组则先给予曲格列酮干预后,再分别在相应压力下继续培养48h,终止实验。结果120组、140组、160组和180组ABCA1 mRNA表达较对照组明显减少,120T组、140T组、160T组和180T组与相应组比较,mRNA表达明显增加,差异有显著性(P<0.05或P<0.01),120T组和140T组mRNA表达与对照组相当(P>0.05),ABCA1蛋白表达与mRNA类似。结论高压力下调了THP-1源泡沫细胞ABCA1 mRNA和蛋白表达。曲格列酮能阻断或减弱这种作用,提示高压力减少ABCA1 mRNA和蛋白表达的作用与PPARγ有关。