体外受精与胚胎移植研究进展

作者综述我院自１９９０年建立体外受精与胚胎移植技术应用于治疗不育的研究。目前本技术已处于国内领先地位，技术的改进着重于如下几方面：①改进治疗周期超排卵方案，提高卵子受精率；②改良选择性减胎术，达到准确、简便、安全，减少多胎妊娠；③应用体外受精与胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）技术为卵巢早衰患者及遗传病夫妇提供赠卵、赠胚胎治疗的方法；④建立第２代ＩＶＦ－ＥＴ技术，应用卵母细胞单精显微注射技术（ＩＣＳＩ）治疗严重男性因素与不明原因不育，同时展望人工辅助破‘壳’（ａｓｉｓｔｅｄｈａｔｃｈｉｎｇ）和提高子宫内膜对胚胎的接受性及提高种植率和妊娠率，利用显微注射操作技术发展种植前的诊断。

卵浆内单精子注射术治疗阻塞性无精症的不育症

目的：评价附睾取精术结合卵浆内单精子注射技术治疗阻塞性无精症所致不育症的疗效。方法：对２４例精液常规检查无精症的男性不育患者之妻子，进行超排卵治疗３０个周期。获卵当日同时从患者阴囊行微切口附睾取精液，或经皮附睾穿刺抽吸术获得活动精子，进行卵浆内注射。精子准备方法可从常规的Ｍｉｎｉｐｅｒｃｏｌ法简化为作者自创的“Ｎ”字游出法。结果：３０个治疗周期共获卵３７８个，其中２９８个（占７８．８％）为减数分裂中期Ⅱ的卵子，可行显微精子注射，受精率和卵裂率分别为５５．７％和９４．６％；每周期平均移植的胚胎数３．６个。在所有治疗周期中共妊娠９例，其中流产１例，已分娩３例，继续妊娠５例，妊娠率为３０．０％／周期（９／３０）。结论：精路阻塞的无精症不育患者，只要获得活动精子，结合卵浆内单精子注射，仍然有机会获得妊娠。

卵巢早衰与卵子赠送22例分析

１９９２年１０月～１９９５年６月共进行卵巢早衰（ＰＯＦ）２２例３１周期卵子赠送。供者采用ＧｎＲＨ－ａ／ＨＭＧ／ｈＣＧ超排卵方案，受者采用外源性类固醇激素替代治疗（ＨＲＴ），周期第２１天行子宫内膜活检，选择子宫内膜分泌期病例采用受者丈夫精子于ＨＲＴ第１５～２０天进行体外授精和胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）。结果：临床妊娠率３６％（１１／３１），双胎妊娠４例，单胎任娠７例，１９９４年ｌ月１４日诞生国内首例ＰＯＦ卵子赠送新生儿，目前继续妊娠３例，流产６例。完整卵泡簇供卵组较ＩＶＦ－ＥＴ剩余卵子供卵组在移植胚胎数目、胚胎评分、移植后妊娠率显著提高，分别为Ｐ＜０．０５、＜０．００１及＜０．０５；而流产率显著降低，Ｐ＜０．００１；受卵者年龄＜３０岁组和＞３０组在移植胚胎数目和胚胎评分无显著差异（Ｐ均＞０．０５），而临床妊娠率分别为４２％和３２％，存在明显差异（Ｐ＜０．０５）。在ＨＲＴ第１６～１８天移植胚胎获得妊娠率较高（９／２２），大于ＨＲＴ第２０天或胚胎发育与子宫内膜发育相差超过±２天无妊娠病例。以上结果提示：ＨＲＴ和卵子赠送是ＰＯＦ患者获得妊娠的有效方法；卵子质量是影响胚胎发育、移植后妊娠率及自然流产率的重要因素；子宫内?

卵母细胞浆内睾丸精子显微注射治疗阻塞性无精子症二例妊娠报告

卵母细胞浆内睾丸精子显微注射治疗阻塞性无精子症二例妊娠报告李满庄广伦周灿权王长希李俐琳本生殖医学研究中心从睾丸曲细精管中分离精子进行卵母细胞浆内单精子注射术（ＩＣＳＩ）治疗２例阻塞性无精子症不育患者获得妊娠，现报告如下：一、病史资料例１３４岁，婚后６...

卵母细胞浆内冷冻精子注射治疗不射精不育一例报告

卵母细胞浆内冷冻精子注射治疗不射精不育一例报告李满庄广伦张敏芳李俐琳射精障碍是引起男性不育的原因之一，而不射精症与无精症为其中最难治者，本生殖中心在卵浆内单精子注射（ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ＩＣＳＩ）的基础上，结...

卵子赠送妊娠后激素替代治疗剂量与时间的初步探讨

为了探讨卵子赠送妊娠后胎盘类固醇激素产生的时间；外源性激素替代治疗的合理剂量和疗程；药物减量和停药的指征。采用低剂量类固醇激素替代与卵子赠送技术使５例卵巢早衰患者、２例绝经前期患者获得单胎妊娠，在孕４～１２周应用放射免疫法连续测定血清雌二醇（Ｅ２）、雌三醇（Ｅ３）及孕酮（Ｐ）水平，并与５例正常单胎妊娠同期水平比较。结果：７例卵子赠送单胎妊娠均于孕１２周安全停药，均足月分娩。Ｅ２和Ｐ水平分别于孕５和６周开始上升，孕６和７周明显高于孕４周基础值（Ｐ分别＜０．００１和＜０．００２）。孕７～１２周血清Ｅ２水平与正常单胎妊娠组同期水平相似。血清Ｅ３水平从孕６～７周开始升高，孕１０～１１周稳定于２０～３０μｇ／Ｌ范围，与正常单胎妊娠组无区别。结论：胎盘组织从孕５～７周开始分泌Ｅ２和Ｐ进入母体外周血，提示胎盘功能出现，可考虑药物逐渐减量。Ｅ３从孕１０周起稳定在中期妊娠水平，提示黄体与胎盘功能交替完成，此时应停用外源性激素。

聚合酶链反应单链构象多态银染技术检测国人先天性双侧输精管缺如患者囊性纤维化跨膜转运调节物基因突变

为了探讨囊性纤维化跨膜转运调节物 (CFTR)基因在中国人先天性双侧输精管缺如 (CBAVD)患者中的突变频率及热点 ,应用聚合酶链反应 -单链构象多态 (PCR-SSCP)、银染技术及 PCR产物直接序列分析的方法检测了 32例 CBAVD患者 CFTR基因第 2、3、4、5、6 a、8、10、11、12、13、15A、17b、19A、2 0、2 1、2 3外显子区域上的突变情况。结果 :2例存在 PCR- SSCP电泳迁移的改变 ,经测序确认了 CFTR基因突变的性质。结论 :PCR- SSCP银染技术检出中国人 CBAVD患者 CFTR基因突变为 :ΔF50 8,2 2 5del C。所以此方法作为检测

显微注射受精的卵母细胞质膜穿破特点对受精和卵裂的影响

回顾性分析显微注射受精过程中，卵母细胞质膜穿破的不同情形对卵子存活、受精和卵裂结果的影响。根据显微注射过程，卵母细胞胞浆膜穿破的不同情形，将卵母细胞分为３组：Ａ组：显微注射针穿刺卵母细胞膜过程中，注射针直接进入胞浆内，无需回吸胞浆（ｎ＝３０７）；Ｂ组：注射针穿刺到胞浆深部时，轻微回吸少许胞浆，卵膜即穿破（ｎ＝７６９）；Ｃ组：注射针穿刺到胞浆深部时，用力回吸一定量胞浆，卵膜才穿破（ｎ＝４０５）。结果：Ａ组卵母细胞的存活率最低（７２６％），３组卵母细胞的正常受精率未见统计学差异，但卵裂质量则有显著差异，Ｂ组卵裂球质量较好（碎片＜５０％的卵裂球占７７９％）。结论：卵膜穿破的不同情形对卵母细胞的存活和受精卵的卵裂有一定影响，而对卵母细胞的正常受精影响不大。

卵母细胞浆内冷冻精子注射治疗不射精不育症1例报告

射精障碍是引起男性不育的原因之一，不射精症与无精症是其中治疗上最困难的问题，本生殖中心在建立卵浆内单精子注射（ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ＩＣＳＩ）技术治疗无精症的基础上，结合采用冷冻精子技术治疗不射精的一对不育夫妇...

胚胎活检对种植前人胚胎发育的影响

随着显微操作技术日趋成熟，从移植入宫腔前的胚胎吸取１个或多个卵裂球，结合分子生物学诊断技术，进行人胚种植前遗传诊断（ｐｒｅｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｇｅｎｅｔｉｃｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ＰＧＤ）已成为可能。本中心自１９９６年开始探索人胚活检方法与时机，本文...

辅助人类胚胎孵出对着床的作用

辅助人类胚胎孵出对着床的作用李满庄广伦透明带（ＺｏｎａＰｅｌｕｃｉｄａ，ＺＰ）是早期胚胎卵裂球外周的非细胞结构性的粘蛋白，如同胚胎的“壳”，保持卵细胞或早期胚胎的完整性和整体性，受精时，容许单精受精。在胚胎着床前，它作为一道屏障，防止胚胎与来自体内的...

共同培养与早期胚胎体外发育

共同培养即将早期胚胎在体外与输卵管上皮层等辅助细胞一起培养,模拟早期胚胎生长的生理环境,是提高体外受精一胚胎移植(IVF-ET)成功率的一种方式。本文对其作用机理,建立方法,应用方式及研究展望等进行综述。

血管内皮生长因子在卵巢过度刺激综合征发病机理中作用的初步研究

目的 通过对卵巢过度刺激综合征 (OHSS)患者血管内皮生长因子 (VEGF)水平和表达的测定 ,初步探讨VEGF在OHSS发病机理中的作用。方法 采用酶联免疫吸附试验方法对 14例中、重度OHSS患者 (OHSS组 )和同期 13例非OHSS患者 (对照组 )取卵日卵泡液、人绒毛膜促性腺激素(hCG)注射日、胚胎移植 (ET)日血清VEGF水平进行测定 ;采用免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链反应技术检测取卵日卵巢黄素化颗粒细胞VEGF及其mRNA的表达。结果 OHSS组和对照组的卵泡液、hCG注射日血清VEGF水平分别为 (12 5 7 2± 6 48 0 )与 (1745 1± 80 2 4)ng/L ,(2 5 0 1± 10 9 5 )与(196 7± 81 7)ng/L ,两组比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;OHSS组ET日血清VEGF水平及注射hCG后血清VEGF水平变化程度 ,显著高于对照组 [分别为 (34 2 9± 15 8 5 )与 (2 2 2 2± 84 6 )ng/L ,(92 8±10 6 7)与 (2 5 9± 2 1 8)ng/L ,P <0 0 5 ]。OHSS组取卵日卵巢黄素化颗粒细胞VEGFmRNA的表达 ,显著高于对照组 ,VEGF/ β肌动蛋白比值分别为 1 5 0± 0 6 0、0 96± 0 5 6 (P <0 0 5 )。两组取卵日卵巢黄素化颗粒细胞有较活跃的VEGF表达。结论 VEGF在OHSS的发病机理中可能起一定的作用。

附睾、睾丸精子卵浆内单精子注射治疗阻塞性无精症引起不育

为评价附睾或睾丸精子卵浆内单精子注射（ＩＣＳＩ）治疗阻塞性无精症引起不育的疗效，对３１例无精子男性不育患者配偶进行超排卵治疗３７个周期，获卵当日从患者附睾取精，其中２４例获得活动精子，７例失败，改用钳取睾丸曲细精管从中分离精子以供ＩＣＳＩ。结果：共获卵４５３个，附睾、睾丸精子ＩＣＳＩ受精率分别为５５７％、６１７％，平均每周期移植胚胎３７个，总妊娠率每周期２９７％。结论：只要获得活动精子ＩＣＳＩ。