胞内Ca^(2+) 、Na^+ 和ATP的稳定性介导NMDA诱导兴奋保护作用(英文)

目的:研究N甲基D天冬氨酸(NMDA)诱导大鼠小脑颗粒神经元兴奋毒性保护作用的机制。方法:分别用Ca2+和Na+敏感的染料Fura2/AM和SBFI/AM测定胞内Ca2+和Na+浓度[(Ca2+)i,(Na+)i]。并用反向高效液相色谱法测定胞内三磷酸腺苷(ATP)的含量。结果:①在NMDA预处理组与非处理组,谷氨酸均迅速触发胞内Ca2+反应高峰,两者无显著性差异。而后在NMDA处理组,胞内Ca2+迅速下降,并维持在高于静息Ca2+水平的平台状,撤离谷氨酸后,[Ca2+]i迅速下降并恢复至静息水平;而NMDA非处理组则相反。②谷氨酸均诱发上述两组神经元[Na+]i升高,在NMDA非处理组,[Na+]i均高于NMDA预处理组。③谷氨酸消耗胞内ATP,而NMDA预处理组则减少胞内ATP的耗竭。结论:NMDA诱导兴奋毒性保护作用是通过减少ATP的消耗而增强胞内Ca2+和Na+的自稳态。

脑活素对原代培养大鼠小脑颗粒神经元影响的研究

目的 研究脑活素 (现药名施普善 )对原代培养的大鼠小脑颗粒神经元的影响。方法 采用原代培养的大鼠小脑颗粒神经元 ,观察脑活素对细胞形态学及生存的影响。用噻唑蓝 (MTT)法测定细胞存活率。结果 脑活素在 0～ 40mL/L浓度下 ,剂量依赖性诱导小脑颗粒神经元死亡。兴奋性氨基酸受体拮抗剂地佐环平 (MK -80 1)可保护低浓度脑活素 (<5 0mL/L)的神经毒性。脑活素浓度 >5 0mL/L时MK - 80 1无明显保护作用。而对照药物胞二磷胆碱 (0～ 10g/L)、单唾液酸四己糖神经糖甙脂 (GM - 1,0～ 2 0mg/L)两者被认为具有护脑作用的药物 ,对小脑颗粒细胞均无毒性作用。结论 脑活素对原代培养的大鼠小脑颗粒神经元具有毒性作用 ,其机制部分是通过兴奋性氨基酸介导的。

胆红素对原代培养不同类型大鼠神经元的毒性作用

目的 观察胆红素对大鼠不同类型神经元的毒性作用及机制。 方法 采用原代培养的大鼠小脑颗粒神经元、皮质神经元及海马神经元 ,观察低浓度 (0～ 17.1μm ol/ L)胆红素对其毒性的影响。用二乙酸荧光素染色法测定神经元存活率 ,荧光技术测定细胞内胆红素的含量。 结果 胆红素呈剂量依赖性地诱导小脑颗粒神经元死亡 ,在胆红素浓度为 4.3、8.6及 17.1μm ol/ L 时 ,颗粒神经元的存活率分别为 (5 0 .1± 3.1) %、(18.5± 2 .3) %和 (2 .0± 2 .4) % ;皮质神经元的存活率分别为(90 .7± 7.8) %、(85 .3± 5 .3) %和 (74.5± 2 .4) % ;海马神经元的存活率分别为 (75± 6 ) %、(6 2± 5 ) %和 (4 9± 5 ) %。胆红素对大脑皮质神经元及海马神经元的毒性明显低于颗粒神经元。加入胆红素 3h后 ,颗粒神经元、皮质及海马神经元细胞内胆红素的荧光强度分别为 33.4± 2 .3、10 .7± 3.0、2 1.9±4.3,小脑颗粒神经元内胆红素含量明显高于海马及皮质神经元 (P<0 .0 1)。 结论 小脑颗粒神经元较海马及皮质神经元对胆红素的毒性敏感 。