强力宁对四氯化碳、乙醇诱导的肝纤维化大鼠模型肝脏Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响

目的：探讨强力宁治疗对毒素性肝损伤－纤维化大鼠模型肝脏内Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达的影响，从分子水平揭示强力宁对肝纤维化的治疗作用及机理。方法：采用四氯化碳皮下注射和饮用乙醇水溶液方法诱导大鼠肝损伤－纤维化模型，同时部分予以强力宁治疗，在四氨化碳等处理后定期处死大鼠收集血清和肝脏标本，采用异硫氰酸胍－酚－氯仿一步法抽提肝组织总ＲＮＡ，用地高辛标记的Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｃＤＮＡ探针与各组肝组织总ＲＮＡ进行斑点杂交，比较各组标本肝脏Ⅰ、Ⅲ型前胶原的表达水平。结果：四氯化碳等损伤后肝脏内Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达显著增高，而强力宁能够抑制损伤后肝脏内Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的异常增高的表达。结论：强力宁能够通过抑制毒素致肝损伤动物模型肝脏内Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因的表达来抑制肝纤维化的发生。

肺炎衣原体对不同细胞株的敏感性研究

目的 肺炎衣原体（Ｃｐｎ）是继鹦鹉热衣原体、沙眼衣原体之后鉴定的第三种衣原体。血清学研究表明，大部分人群均感染过Ｃｐｎ。它还和多种疾病有关，尤其是最近人们注意到Ｃｐｎ 与动脉粥样硬化（ＡＳ）之间存在密切关系。明确这种病原学关系对更好地明了ＡＳ发病机理，及对ＡＳ的诊断与治疗的研究至关重要。Ｃｐｎ 的分离和培养比其它衣原体困难，因此，选择一种合适的宿主细胞是关键所在。方法和结果 本文选择了ＨＬ，Ｈｅｐ－ ２ 和ＭｃＣｏｙ 三种细胞作比较；Ｃｐｎ 则选用ＴＷ－ １８３和ＡＲ－ ３９ 原型株。经培养后计算包涵体形成单位（ＩＦＵ），以比较各种细胞敏感性的差别。结论 经Ｓｔｕｄｅｎｔ－ Ｎｅｗ － Ｋｅｕｌ分析，发现Ｈｅｐ－ ２细胞是最适合繁殖Ｃｐｎ

肺癌与肺炎衣原体感染关系的研究

目的:研究肺炎衣原体(Cpn)和肺癌之间的关系。方法:采用间接微量免疫荧光法检测肺癌标本43例和非肺癌呼吸科病人19例肺组织中Cpn特异性抗原。结果:肺癌组Cpn抗原表达水平明显高于对照组:肺癌组中Cpn-Ag阳性率88.4%(38/ 43),对照组阳性率26.3%(5/19),p<0.0001。结论:肺癌患者易患Cpn感染,Cpn感染与肺癌有一定的关系,值得临床重视。

检测人动脉瘤组织中肺炎衣原体特异性抗原的临床意义

目的 :探讨肺炎衣原体 (Cpn)特异性抗原与动脉瘤的关系。方法 :利用直接免疫荧光 (IF)方法检测新鲜 -冰冻或福尔马林 -固定标本中Cpn特异性抗原的存在。结果 :新鲜 -冰冻标本中Cpn特异性抗原的阳性率是 :腹主动脉瘤组为 83.0 % (15 /18) ,正常血管组 12 .5 % (1/ 8) ,P <0 .0 1。此外 ,用IF方法检测了 40例档案保存的石蜡包埋冠状动脉瘤标本和正常血管组织切片 ,Cpn特异性抗原检出率分别是 :87.5 % (35 / 40 )和 0 (P <0 .0 0 1)。结论 :Cpn特异性抗原的高检出率见于人动脉瘤体组织中 ,推测Cpn引起的动脉粥样硬化可能是形成人动脉瘤的病因之一。

应用原位PCR法检测肝癌组织中的HBV DNA

目的探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）与肝细胞癌（ＨＣＣ）的关系。方法采用直接原位聚合酶链反应（ｉｎｓｉｔｕＰＣＲ，ＩＳＰＣＲ），对６４例福尔马林固定石蜡包埋的ＨＣＣ组织（其中６１例附癌周组织）切片中的ＨＢＶＤＮＡ进行检测，并与传统的免疫组织化学原位杂交和组织抽提核酸ＰＣＲ法进行了比较。结果ＩＳＰＣＲ对石蜡包埋的ＨＣＣ组织中的ＨＢＶＤＮＡ检测高度敏感，检出率为７１．９％（４６／６４），而相应组织应用免疫组织化学法（ＨＢｓＡｇ）、原位杂交和组织抽提核酸ＰＣＲ法的结果分别为１７．２％（１１／６４）、５４．７％（３５／６４）和５７．８％（３７／６４）。癌周组织中的ＨＢＶＤＮＡ的检出率明显高于癌组织者，为７８．７％（４８／６１）。ＩＳＰＣＲ检测还显示，ＨＢＶＤＮＡ在肝细胞与癌细胞中主要分布于胞浆，较少见于胞核。在癌组织中，核阳性占４８．４％（３１／６４），癌周组织中则为２４．６％（１５／６１）。结论ＨＢＶＤＮＡ在癌周及癌组织存在情况的复杂性提示ＨＢＶ的感染、整合在ＨＣＣ发生中的作用远非清楚。

家兔的肺炎衣原体感染和动脉粥样硬化模型

目的 用新西兰白兔 (NZW )作为Cpn感染和AS的模型 ,来进一步探索Cpn和AS之间的关系。 方法 35只健康NZW兔分为 4组 ,分别为Cpn感染组 (I)、Cpn感染组同时予以高脂饮食组 (HI)、高脂饮食组 (H)和对照组 (C)。I和HI组于实验 1、3周经鼻腔每次感染 1mlCpn(1× 1 0 6IFU/ml)。H和HI组同时喂予高脂饲料。初次感染后 1 2周全部处死 ,取心、肺、肝和血管组织进行病理学、直接微量免疫荧光 (IF)和PCR检测。结果 HI组血管组织最大内膜厚 (MIT)和斑块面积指数 (PAI)均大于H组 (P <0 .0 5 )。I组血管未发现AS病变。Cpn抗原和DNA在 1 0只HI组家兔中检测到。

肺炎衣原体包涵体核酸组分衍化分析法的建立

吖啶橙 （ Ａ Ｏ） 染色可以作为肺炎衣原体 （ Ｃｐｎ） 包涵体的染色方法。它是一种快速检查 Ｃｐｎ 感染的较好方法，有可能替代荧光单抗染色的功能， 克服单抗染色时细胞结构显示不清的缺点， 具有简捷、价廉和既能反映衣原体包涵体的形态和成份， 又能反映包涵体不同时期 Ｒ Ｎ Ａ 和 Ｄ Ｎ Ａ 含量变化的独特优点。

脑卒中患者血清中的肺炎衣原体抗体和超敏C-反应蛋白

目的:分析脑卒中患者血清中肺炎衣原体抗体、超敏C-反应蛋白与脑卒中发病的关系及其临床意义。方法:选择2002-03/2006-02在金山医院神经科病房及门诊就诊的脑卒中患者80例作为脑卒中组,符合1995年脑血管疾病分类及诊断标准;同时选择80例未患脑卒中的健康人或医院内其他与脑血管疾病无关的患者作为对照组,其性别、种族、居住地与脑卒中组患者相匹配,两组观察对象均自愿参加观察。应用微量免疫荧光法检测两组观察对象血清中肺炎衣原体抗体(IgA,IgG),用胶乳增强免疫比浊法检测血清中超敏C-反应蛋白水平,用免疫比浊法检测血清总胆固醇、三酰甘油水平,并比较两组的差异。评估标准:肺炎衣原体-IgA阳性为滴度≥1∶16;肺炎衣原体-IgG阳性为滴度≥1∶64;超敏C-反应蛋白浓度在3mg/L以上被认为异常;总胆固醇超过5.7mmol/L为高胆固醇血症,三酰甘油超过1.7mmol/L为高三酰甘油血症。结果:纳入脑卒中组及对照组各80例,全部进入结果分析,无脱落。①两组观察对象血清肺炎衣原体-IgA,IgG的阳性检出率比较:脑卒中组肺炎衣原体-IgA阳性检出率显著高于对照组(73.8%,38.8%,P<0.01)。脑卒中组与对照组肺炎衣原体-IgG阳性检出率比较差异无显著性意义(55.0%,43.8%,P>0.05)。②两组观察对象血清超敏C-反应蛋白、血脂水平比较:脑卒中组血清超敏C-反应蛋白及总胆固醇水平均显著高于对照组[(6.75±0.25,2.32±0.18)mg/L;(5.64±0.72,4.32±0.68)mmol/L,P<0.01,0.05];两组血清三酰甘油水平相比差异无显著性意义[(1.82±0.73,1.61±0.68)mmol/L,P>0.05]。结论:高滴度的肺炎衣原体-IgA加上超敏C-反应蛋白水平升高可能是脑卒中危险的预兆物,而胆固醇是较三酰甘油更为密切地致动脉粥样硬化的危险因子。

鼻息肉与肺炎衣原体感染关系的分析

目的:分析肺炎衣原体(Cpn)和鼻息肉之间的关系。方法:采用微量免疫荧光法检测60例鼻息肉标本和20例非鼻息肉耳鼻咽喉-头颈外科患者鼻粘膜组织中Cpn特异性抗原(Cpn-Ag)。结果:鼻息肉组Cpn-Ag表达水平明显高于对照组:鼻息肉组中Cpn-Ag阳性率61．7％(37／60),对照组阳性率15.0％(3／20),P<0．01。结论:鼻息肉患者易患Cpn感染, Cpn感染率相对高,值得临床重视。

鼻息肉患者肺炎衣原体的检测

目的探索肺炎衣原体(chlamydia pneumoniae,Cpn)与鼻息肉之间的关系。方法用直接免疫荧光法检测外周血单核细胞(peripheral blood mononclear cell,PBMC)中的 Cpn 特异性抗原(Cpn-Ag),间接微量免疫荧光法检测血浆中 Cpn 抗体。结果在73例鼻息肉患者和87例正常人血浆中,Cpn IgG 的阳性检出率分别为65.8%(48/73)和32.2%(28/87),P<0.001;Cpn IgM 的阳性检出率分别为30.1%(22/73)和12.6%(11/87),P<0.01;PBMC 中的 Cpn-Ag 阳性检出率分别为86.3%(63/73)和31.0%(27/87),P<0.001。结论鼻息肉与肺炎衣原体有一定的相关性。检测 PBMC 中 Cpn-Ag 可为更好的治疗鼻息肉提供实验依据。

铜蓝蛋白在糖尿病及糖尿病肾病中的研究进展

铜蓝蛋白（Ｃｐ）是血浆中的一种糖蛋白。综述多位学者测定糖尿病病人血浆中铜蓝蛋白含量的变化，结果发现糖尿病患者血浆Ｃｐ比正常人群高，从而提出Ｃｐ在糖尿病病理机制中可能参与一定的致病作用。更重要的是，铜蓝蛋白在尿中的排泄率有希望成为糖尿病肾病的早期诊断指标之一。因为横断面的研究发现，糖尿病肾病患者铜蓝蛋白排泄率的异常，出现于微量白蛋白尿之前。

脑卒中与肺炎衣原体感染的相关性

目的探索肺炎衣原体(Cpn)慢性感染与脑卒中之间的关系。方法2002年3月-2006年1月来复旦大学附属金山医院就诊的25岁至72岁脑卒中患者60例为病例组,选择60名性别、年龄和种族等与病例组相匹配的无脑卒中者为对照组,用微量免疫荧光法检测血清中Cpn抗体(IgA、IgG),并比较血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)水平的差异。结果在脑卒中组和对照组血清中,Cpn IgA的阳性检出率分别为75.0%(45/60)和38.3%(23/60),P<0.001;Cpn IgG的阳性检出率分别为58.3%(35/60)和43.3%(26/60),P>0.05。脑卒中组TC(5.75±0.74 mmol/L)高于对照组(4.62±0.76mmol/L),具有统计学意义(P<0.05),TG水平差别无统计学意义。结论肺炎衣原体慢性感染的血清学证据与脑卒中危险有关,IgA滴度比IgG可能是更好的危险标记物。这一发现表明,脑卒中与Cpn之间有着临床的紧密关联,有关病因学的关系,有待进一步研究。

维拉帕米对Lewis肺癌的抑制作用以及对MMP-9表达的影响

目的研究维拉帕米对Lewis肺癌的抑制作用以及对其基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法建立Lewis肺癌模型,将其分为4组:A组为空白对照组,B、C、D组分别为维拉帕米0.15、0.20和0.25mg·d-1剂量组。采用ELISA方法检测各组小鼠血清中MMP-9的浓度,采用免疫组化DakoEnVison二步法证实瘤组织中MMP-9的存在,并计数肺表面转移结节数,瘤块称重。结果MMP-9浓度与肺表面转移结节数、瘤重存在一定的相关性,且当维拉帕米剂量为0.25或0.20mg·d-1时,维拉帕米能明显降低小鼠血清中MMP-9的浓度(P<0.05),同时肿瘤生长和转移作用也受到明显的抑制。但0.25mg·d-1的剂量有可能引起一定的不良反应。结论维拉帕米对Lewis肺癌有一定的抑制作用,且可能通过抑制MMP-9而抑制了肿瘤的生长和转移。

连接酶链反应技术在衣原体诊断中的应用

核酸扩增技术在感染常规诊断中的作用已被确认,技术不仅包括多聚酶链反应(PCR),而且也包括连接酶链反应(LCR)、自我特续序列复制(3SR)、扩增探针和Qβ复制酶。本文综述了LCR在衣原体检测中的应用,并与其他方法进行了比较,以助于了解LCR技术在衣原体诊断中的应用优势。

肺炎衣原体的体外培养及动物感染模型的建立

肺炎衣原体是继沙眼衣原体,鹦鹉热衣原体发现的第三类衣原体。最早发现的株型是TW-183和AR-39,故又简称为TWAR。迄今为止,已发现十多株。TWAR与多种疾病有关,如呼吸道感染。

用PCR方法检测脆弱类杆菌

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测５株脆弱类杆菌（Ｂｆ）。结果显示，标准菌株２５２８５Ｂｆ出现有２条明显的特异性条带，而多型类杆菌标本在相应位置未出现。表明ＰＣＲ检测特异性强，敏感性高，操作简便、快速，且无放射性之虞，可在临床疾病的检测诊断中推广。

氨对培养胚鼠大脑神经元形态的影响

为研究氨对培养神经元的影响，并探讨神经元形态改变在肝性脑病发生中的作用。通过对胚胎大鼠大脑神经元的分散培养，结合光镜，透射电镜及免疫组织化学法，观察了氨对分散培养胚鼠大脑神经细胞的影响，发现氨可引起神经元胞体肿胀，尼氏小体溶解，胞质内出现颗粒及空泡变性，甚至突起崩解，核固缩，细胞坏死脱落；电镜下示细胞内内质网，线粒体扩张及囊性变，粗面内质网脱颗粒，大量致密小体出现，突起肿胀，微丝减少；神经微丝蛋白及突触体素的表达减少。实验结果表明，氨对培养神经元具有一定毒性作用，神经元的病变可能影响了其正常功能，促使肝性脑病的发生。