结核性胸水中PPD特异性多功能效应型记忆T细胞表型和功能研究

目的:探讨结核性胸水中是否存在纯化蛋白衍生物(PPD)特异性T细胞,并对这群PPD特异性T细胞的表型特征和功能进行研究。方法:体外用PPD刺激结核性胸水细胞(PFCs),结合表面分子和细胞内因子染色方法,分析结核性胸水细胞中PPD特异性的T细胞的表型特征和功能。结果:在不刺激的条件下,结核性胸水细胞几乎不产生细胞因子。PPD刺激结核性胸水细胞后,主要使CD4+T细胞产生Th1细胞因子。进一步分析Th1细胞因子产生之间相互关系,结果表明PPD特异性CD4+T细胞大多同时分泌两种细胞因子。表型分析表明,结核性胸水细胞中分泌Th1细胞因子的主要是CD45RA-CD62L-CD27-CCR7-CD4+T细胞,即效应型记忆CD4+T细胞。结论:结核性胸水中存在PPD特异性CD4+T细胞,这群细胞是多功能效应型记忆CD4+T细胞,而且可能对结核菌的控制和清除有重要作用。

弓形虫感染对宿主神经系统影响的研究进展

弓形虫在世界范围内广泛分布,为一种机会性致病寄生虫,其感染除引起先天性弓形虫病和获得性弓形虫病外,也会引起宿主精神和行为方面的改变,究其根本是由于弓形虫感染对神经系统造成了相应的影响。本文围绕弓形虫感染对宿主神经系统的作用及其机制进行综述。

白纹伊蚊Rh类糖蛋白基因的克隆与生物信息学分析

目的应用简并引物RT-PCR和RACE方法获取白纹伊蚊Rh类糖蛋白(Aedes albopictus rhesus-like glycoprotein,AaRh)基因的全长cDNA。方法根据冈比亚按蚊、埃及伊蚊等亲缘关系较近物种的Rh类糖蛋白同源性分析结果,在氨基酸高度保守区域184/343和219/337氨基酸位点设计2对简并引物,以白纹伊蚊雌蚊总RNA为模板,应用巢式RT-PCR扩增AaRh的基因片段。根据获得的AaRh基因部分序列,设计2对特异性引物AaRh GSP1、GSP2和AaRh GSP3、GSP4,应用5’RACE和3’RACE分别扩增AaRh基因的5’端和3’端cDNA片段,然后拼接出全长cDNA序列。通过在线生物信息学分析(NCBI和Expasy),对目的基因序列进行生物信息学分析。结果应用2对简并引物进行巢式RT-PCR,获得379 bp AaRh基因片段。应用5’RACE和3’RACE方法,分别获得AaRh基因5’端1008 bp、3’端822 bp cDNA序列,根据两个片段的首/尾共同序列拼接为1717 bp的基因片段。该核苷酸序列经BLASTn分析显示,与埃及伊蚊Rh蛋白的一致性高达95%,鉴定其为白纹伊蚊Rh类糖蛋白基因。AaRh基因具有完整的开放阅读框,其ORF从第128位到1516位含1389bp,编码462个氨基酸。Expasy在线生物信息学程序分析显示,白纹伊蚊Rh类糖蛋白是一个整合膜蛋白,跨膜11次,58aa-446aa具有铵离子通道的结构功能域;理论等电点(pI)5.37,分子量49775.10 Mr,1aa-26aa可能为分泌信号肽序列;含有4个潜在的天冬酰胺糖基化位点和17个线性抗原决定簇,翻译后可能进行糖基化修饰,提示其为糖蛋白。结论成功获取AaRh基因的全长cDNA,生物信息学分析结果为AaRh蛋白的生物学特性和功能研究奠定了基础。