云南和山西无偿献血人群HCV部分基因的核苷酸序列测定及基因分型

目的了解云南和山西2地无偿献血人群丙型肝炎病毒(HCV)的基因型分布及其差异。方法采用荧光定量PCR(Q-PCR),对所收集的203份ELISA检测抗-HCV阳性的无偿献血者标本(云南102份,山西101份)做核酸检测,对核酸阳性的标本做E1基因扩增和测序;E1基因阴性者,进一步做NS5B基因扩增;采用DNASTAR、Bi-oedit和Mega4等软件对E1、NS5B基因进行分析及分子进化研究。结果203份ELISA检测抗-HCV阳性的无偿献血者标本中,云南102份标本经Q-PCR检测出核酸阳性55份,从中扩增出E1基因43份,补做NS5B基因扩增获得阳性结果8份;山西省101份标本经Q-PCR检测出阳性46份,从中扩增出E1基因33份,补做NS5B基因扩增获得阳性结果6份。云南省献血者HCV基因型(亚型)可分为7种:1b[7.84%(4/51)]、2a[13.73%(7/51)]、3a[17.65%(9/51)]、3b[41.18%(21/51)]、6a[7.84%(4/51)]、6n[9.80%(5/51)]和6v[1.96%(1/51)];山西省献血者HCV基因型(亚型)较简单,可分为3种:1b[89.74%(35/39)]、2a[7.69%(3/39)]和3b[2.56%(1/39)]。结论我国云南和山西2地无偿献血人群中的HCV基因型(亚型)的分布存在明显的差异。

广州献血人群抗-HCV ELISA检测S/CO值与确证试验结果的相关性

目的研究广州献血人群抗-HCV ELISA检测试验S/CO值与确证试验(NAT和RIBA)结果的相关性。方法采用进口(Abbot或Ortho)和国产(科华)抗-HCV ELISA试剂对2009年2月～2012年4月广州血液中心采集的无偿献血者血浆标本作抗-HCV检测,从中随机收集664份双试剂呈反应性的血浆标本进一步作确证试验;使用ROC曲线分析3种ELISA试剂的S/CO值与确证试验结果的相关性。结果 ROC曲线分析显示3种ELISA试剂检测的S/CO值与确证试验结果具有相关性:以Youden指数最大时的S/CO值为最佳阈值,Abbot、Ortho及科华试剂分别为3.234、4.460和6.976,均可预测>95%的确证试验阳性结果。结论不同试剂具有各自的最佳S/CO阈值,可以通过S/CO值预测HCV感染确证试验的阳性结果。

DAPK1基因开放读码序列的克隆、序列分析及诱导Raji细胞凋亡

目的 :探讨死亡相关蛋白激酶 (DAPK1)在肿瘤的形成、转移中所起作用 ,克隆DAPK1基因的开放读码序列 (ORF)。方法 :根据GenBank提供的核苷酸序列 ,自行设计引物 ,用RT -PCR从K562细胞中扩增DAPK1基因的ORF ;用质脂体将pcDNA3 1(+ ) -DAPK1转染到Raji细胞 ,Hoechst 3 3 2 58染色观察细胞凋亡 ,MTT法观察DAPK1基因对细胞生存的影响。结果 :DAPK1基因的ORF克隆到质粒pMD18-T ,测序鉴定 ;分析结果显示 ,从K562细胞成功扩增 43 0 0bp的DAPK1基因ORF有 7处突变 ,其中 6处是同义突变 ,1处是基因的单链核苷酸多态性 ;DAPK1基因的ORF克隆到真核表达载体pcDNA3 1(+ ) ,转化到Raji细胞 ;转染 48h后 ,可以检测到DAPK1的表达 ,并可以观察到细胞发生凋亡。结论 :大片段的基因可以采用RT -PCR法直接克隆 ,采用常规的转染技术可以将大片段基因转染到宿主细胞 ;成功克隆具有活性功能DAPK1基因ORF 。

广州地区无偿献血人群HCVE1和NS5B基因的测序和分型

目的了解广州地区无偿献血人群丙型肝炎病毒部分基因的核苷酸序列和基因型分布。方法收集广州地区无偿献血人群中抗-HCV阳性标本201份,采用荧光定量PCR(Q-PCR)的方法对其进行核酸检测,阳性标本同时作HCVE1和NS5B基因扩增;核苷酸序列测定后运用DNASTAR,B ioEd it,M ega4.0等软件作序列分析和基因分型。结果 201份抗-HCV阳性标本的HCV RNA阳性率为54.23%(109/201),其中男性的HCV RNA阳性率为63.19%(91/144)、女性为31.58%(18/57)(P<0.05)。109份HCV RNA阳性的标本全部扩增出E1和NS5B基因,基因分型显示其HCV基因型比例依次为1b(46.79%)、6 a(33.03%)、3 a(10.09%)、2 a(5.50%)、3b(3.67%)、1 a(0.92%)。结论广州地区抗-HCV阳性的无偿献血人群HCV RNA阳性率男性高于女性,HCV毒株以1b和6 a亚型最多见。

DAPK1基因转染对高转移性肺癌细胞PGCl_3的影响

背景与目的:死亡相关蛋白激酶DAPK1失活是影响非小细胞肺癌患者生存的独立因子,过表达的DAPK1可以诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤转移,但抑制转移的机制尚未完全清楚。本文探讨DAPK1基因抑制高转移性肺癌PGCl3细胞生长及转移的可能机制。方法:利用基因重组技术构建含DAPK1基因开放读码框(ORF)的真核表达载体pcDNA3.1-DAPK1,用脂质体LipofectAMINE2000介导转染PGCl3细胞系,检测转染后PGCl3细胞的生长曲线、体外软琼脂克隆形成率、体外侵袭、运动和粘附能力的变化,同时检测了胶原酶活性,p53,bcl-2基因表达的变化。结果:转染DAPK1基因的细胞生长比空白组及pcDNA3.1转染组减缓;体外软琼脂克隆形成率下降P<0.05;pcDNA3.1-DAPK1转染组体外侵袭能力是空白组的68.5%,而pcDNA3.1转染组是空白组的88.0%;pcDNA3.1-DAPK1转染组运动能力是空白组的87.3%,pcDNA3.1转染组是空白组的95.7%;pcDNA3.1-DAPK1转染组粘附能力是空白组的62.7%,pcDNA3.1转染组是空白组的91.2%;各组的胶原酶变化不明显;pcDNA3.1-DAPK1转染组p53基因表达升高,bcl-2基因下调。结论:DAPK1基因的过表达可以在一定程度上逆转PGCl3细胞的恶性表型,使PGCl3细胞生长受抑制,体外侵袭、运动和粘附能力下降,p53基因表达的上调及bcl-2基因表达下调。

转染hEndostatin基因对CNE2细胞株裸鼠移植瘤生长的影响

背景与目的:肿瘤的生长、转移是血管生成依赖性的,血管生成抑制剂有望通过抑制肿瘤血管生成及诱导肿瘤细胞凋亡,有效地抑制肿瘤的生长和转移。本文旨在探讨转染人内皮抑素基因hEndostatin对人鼻咽癌细胞株CNE2裸鼠移植瘤生长的影响。方法:采用脂质体介导法,分别将pBlast-hIL-hEndostatin、pBlast-hEndostatin和pBlast-MCS质粒导入人鼻咽癌细胞株CNE2,MTT法在体外检测转导细胞表达的hEndostatin的活性,并在体内实验中观察转导的CNE2细胞在裸鼠上的致瘤性的差异。结果:转染pBlast-hIL-hEndostatin的CNE2细胞的上清能显著抑制血管内皮细胞ECV304的生长,其在裸鼠体内形成的瘤组织重量和体积均显著低于对照组(P<0.01),生长速度明显慢于对照组细胞。结论:转染hEndostatin基因能有效抑制CNE2细胞在裸鼠体内的生长。

长期体外反搏对高胆固醇血症猪血管内皮细胞的保护作用及机制

目的:探讨体外反搏对高胆固醇血症猪血管内皮细胞的保护作用及机制。方法:选雄性乳猪12头用高脂喂养建立动脉粥样硬化模型,对模型猪进行32h体外反搏治疗。用cDNA基因芯片对猪的动脉血管内皮细胞基因表达谱进行量化分析。结果:腹主动脉苏丹Ⅲ染色图像定量分析,高脂组:7.84%±2.37%;高脂加反搏组:1.26%±0.36%。两组差异有显著性意义(P<0.05)。冠状动脉左旋支内膜1:500扫描电镜显示:高脂+反搏组内膜的血管内皮细胞排列有序,细胞呈梭型排列与血流方向一致,表面光滑;高脂组血管内膜细胞排列紊乱,表面不光滑,有大量脱落细胞。显著改变的基因:芯片1(反搏组Cy3/高脂组Cy5):锌指蛋白0.33、MAP4K30.13、长链脂肪酸合成酶0.35、神经介素B受体0.19、GPX-13.26、整合素β10.06、CTGF0.28、eNOS3.1、VCAM-10.50;芯片2(高脂组Cy3/正常组Cy5):锌指蛋白23.06、MAP4K36.75、长链脂肪酸合成酶2.71、神经介素B受体6.68、GPX-10.63、整合素β16.29、CTGF2.45。结论:长期体外反搏可以改善内皮形态与功能,增加内皮细胞抗氧化作用,下调内皮细胞机械性刺激感应蛋白基因的表达,降低血管內皮细胞对LDL的摄取,及下调炎症因子相关基因的表达,起到抗动脉粥样硬化的作用。

SARS患者合并肺炎支原体感染的临床研究

目的探讨在本院由SARS(severeacuterespiratorysyndrome)冠状病毒引起的99例SARS患者合并肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae,MP)感染的临床情况变化。方法运用肺炎支原体抗体凝集实验,检测受SARS病毒感染的99例患者发病后的肺炎支原体抗体和滴度。结果99例SARS患者部分出现MP合并感染,阳性患者数为47例,总的阳性率为47.5%。在SARS发病前阶段,合并MP感染阳性率为69.3%(39/56),占整个阳性率的83.0%,并以高滴度分布较多;发病后阶段,合并MP感染阳性率为18.6%(8/43),占整个阳性率的17.0%,滴度较第一阶段偏低,两者有显著性差异(P<0.01)。结论SARS患者合并肺炎支原体感染,其感染率有阶段性差异,表明在前期感染SARS冠状病毒的患者毒性较强,对患者肌体影响较大,易出现肺炎支原体合并感染,而在后期的SARS冠状病毒感染者中,可能因毒性减弱,合并肺炎支原体感染率降低。

Rel mRNA和NF-κB2 mRNA在人肝细胞癌中的表达及其临床意义

【目的】探讨Rel及NF-κB2的mRNA在人肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。【方法】用逆转录聚合酶链反应检测55例HCC患者癌组织及癌旁肝组织中RelmRNA和NF-κB2mRNA的表达情况。【结果】RelmRNA及NF-κB2mRNA在肝癌组织中的表达水平均明显低于其癌旁组织(分别为0.315±0.142对0.505±0.225;0.273±0.141对0.491±0.242,均P<0.05)。这两种因子在肝癌组织中的表达水平与临床分期及肝外转移明显有关,而与门静脉癌栓、术后复发、肿瘤数目、肿瘤直径及血清AFP水平等无明显关系。【结论】提示Rel、NF-κB2可能与肝癌的发生、发展有关。

传染性非典型肺炎患者肺炎支原体抗体检测意义

目的 探讨由SARS(severe acute respiratory syndrome)病毒引起的传染性非典型性肺炎(infectious atypicalpneumonia,IAP)患者合并肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)感染情况,以及治疗前后肺炎支原体抗体变化,为治疗和防范非典型肺炎提供指导意义。方法 受SARS病毒感染的99例患者发病后,运用肺炎支原体抗体凝集实验,检测其肺炎支原体抗体和滴度;AP患者经口服四环素、达菲、拜复乐,结合静脉注射生脉、鱼腥草、吉粒芬等综合性治疗后,观察比较了81例治疗后,其肺炎支原体抗体结果,及治疗前后滴度变化。结果 传染性非典型性肺炎患者部分出现MP合并感染,占所检测患者47.5％,滴度高低与病情有一定相关性;经治疗后,MP抗体阳性率为23.5％ 抗体滴度出现下降,两者与治疗前差异有显著性(P<0.01)。结论 非典型性肺炎患者肺炎支原体抗体检测,可以反映其合并感染情况,其滴度变化可以监测患病后病情的发展变化及治疗效果观察,为临床诊断预后等提供辅助指导意义。

苦瓜对实验性大鼠肝纤维化的干预作用及可能机制

目的:探讨苦瓜(BM)对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的干预作用及相关机制。方法:随机将32只雄性健康Wistar大鼠分为4组:对照组(C组);模型组(CCl4,M组);BM低剂量组(BM100g/kg饲料+CCl4,BM-L组)、BM高剂量组(BM200g/kg饲料+CCl4,BM-H组)。饲养中除C组外的各组大鼠均皮下注射50%CCl4-橄榄油溶液2mL/kg,2次/周,共8周,诱导肝纤维化动物模型。8周后处死大鼠,留取大鼠肝脏和血清。计算肝体指数;测定血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;测定肝匀浆总蛋白(TP)和白蛋白(Alb)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、羟脯氨酸(HYP)含量和单胺氧化酶(MAO)活性;胶原纤维染色观察大鼠肝组织变性与胶原沉积病理改变。结果:与M组比较,摄入BM后的各剂量组大鼠肝体指数显著降低(P<0.01);血清MDA含量及肝匀浆HYP含量和MAO活性均明显降低(P<0.01),而血清SOD活性、肝组织TP和Alb含量、GSH-Px活性明显增强(P<0.01)。与正常大鼠相比,模型大鼠肝脏有明显胶原沉积与肝纤维化,伴有不同程度的肝细胞炎性损伤坏死;BM组明显减轻模型大鼠肝组织损伤坏死与胶原沉积等病理变化,以高剂量组更明显。结论:BM具有抗CCl4诱导大鼠肝纤维化作用,其机制可能与其抗脂质过氧化、降低肝HYP含量及MAO活性的作用有关。

离心机训练对大鼠不同组织mRNA表达的影响

目的分析 5个与离心机训练有关的基因在大鼠各组织的表达水平及其与训练时间的关系。方法分别提取离心机训练不同时间组大鼠心、脑、肾、肺和肠 5种组织的mRNA并进行量化 ,采用狭线杂交方法 ,用Dig 1 1 dUTP标记 5个用抑制性消减杂交筛选离心机训练大鼠获得的基因片段作探针 ,杂交结果通过光密度扫描半定量后 ,进行统计学处理。结果未知基因CH1 5 7的表达水平在训练 6d时大鼠心脏和脑组织明显下降 (P <0 .0 5 ) ,训练 1 2d时有所回升 ;未知基因CH2 4 4的表达水平在大鼠心、脑、肠组织在训练 6d、1 2d时均下调 ,但其表达量个体差异表现突出 ,不呈现明显的统计学意义 ;神经元一氧化氮合酶抑制剂 (PIN)基因 ,随着离心机训练时间的延长 ,在大鼠心脏和肾脏组织中的表达水平明显上调(P <0 .0 5 ) ;细胞色素b (Cytb)基因在大鼠心脏、脑组织中表达水平随着训练时间增长而明显上调 (P<0 .0 1 ) ,在肾、肺和肠组织中的表达在训练 6d时明显升高 (P <0 .0 5 ) ,训练 1 2d时有所恢复 ;延长因子 1 α(EF1 α)基因在大鼠脑组织中表达水平随着训练时间增长而明显上调 ,在肠组织中的表达在训练 6d时明显升高 (P <0 .0 5 ) ,训练 1 2d时恢复到训练前水平。结论 5个基因在离心机训练大鼠不同组织中的表达水平存在差异 ,?

交叉酶切联合MALDI-TOF/MS分析重组蛋白二硫键分布的方法建立

以Kringle环为分子模型,应用MALDI-TOF/MS联合特异性蛋白酶酶切技术,探讨建立蛋白质二硫键分布和定位分析的研究方法。采用pET22b(+)原核表达体系诱导表达重组人纤溶酶原K5蛋白(rhK5),经Ni2+-NTA resin亲和层析纯化,并通过SDS-PAGE和Western-blot进行初步鉴定;采用MTT法分析rhK5对微血管内皮细胞的抑制活性;联合应用交叉酶切(Trypsin Gold单切或Trypsin Gold及Endoproteinase ASP-N双酶切)和基质辅助激光解析-飞行时间质谱(MALDI-TOF/MS)分析rhK5的二硫键分布;并应用生物信息学方法和圆二色谱法进一步验证rhK5二级结构。应用原核体系高效表达具有生物活性的rhK5蛋白,经交叉酶切联合MAL-DI-TOF/MS证实rhK5中的6个半胱氨酸正确配对形成了3对二硫键(Cys462:541,Cys483:524和Cys512:536),圆二色谱法测定发现rhK5为典型的β折叠型结构。上述研究结果为分析基因工程重组蛋白质中半胱氨酸配对及二硫键分布提供了方法学基础。

建立SP-A检测法测定体外循环前后猪SP-A含量变化

目的 建立肺表面活性蛋白A(SP -A)的整套检测方法 ,并以之测定体外循环前后幼猪的支气管肺泡灌洗液 (BALF)中SP -A含量。方法 灌洗新鲜猪肺取得BALF ,经过抽提、透析、离心、亲和柱层析 ,获得SP -A。以之免疫大白兔 ,得到兔抗猪SP -A抗体。使用该抗体 ,以蛋白免疫印迹反应法检测 9头幼猪在体外循环 (CPB)前、CPB 1 2 0min、CPB后 1 80min采集的BALF中SP -A含量。结果 制备出猪SP -A和兔抗猪SP -A抗体。成功测定幼猪体外循环前后BALF中SP -A含量。结论 蛋白免疫印迹反应法测定SP -A方法的建立 。

人糖基磷脂酰肌醇(GPI)-B7-1真核表达载体的构建及表达

目的在仓鼠卵巢细胞CHO细胞中高效表达糖基磷脂酰肌醇GPI-B7-1(B7-1即CD80)融合蛋白,获得大量融合蛋白以研究GPI-B7-1在肿瘤治疗中的应用潜力。方法构建真核表达载体pc31/GPI-B7-1,利用脂质体lipofectamine2000将其转染CHO细胞,G418加压筛选抗性克隆,流式细胞仪检测细胞膜上GPI-B7-1融合蛋白的表达情况,SDS-PAGE、Westernblot分析鉴定其免疫活性。结果真核表达载体转染CHO细胞经G418筛选后,流式细胞分析证实为GPI锚定蛋白,SDS-PAGE在60kD左右蛋白表达量明显高于对照组,在Westernblot在60kD左右有一条强的棕色条带,说明GPI-B7-1在CHO中得到表达。结论在CHO细胞中高效表达GPI-B7-1融合蛋白,可获得大量融合蛋白,对进一步研究GPI-B7-1在肿瘤治疗中的应用打下基础。

高脂血症患者脂蛋白脂酶基因外显子4区域变异的研究

为了探讨广东地区高脂血症患者脂蛋白脂酸（lipoprotein lipase,LPL）基因的分子变异,从258例高脂血症患者外周血白细胞中提取基因组DNA,用PCR-SSCP方法分析外显子4及其附近区域,对SSCP带型异常样品进行克隆和序列测定。在2名高脂血症患者LPL基因内含子3的3’端-6bP处发现C→T转换突变,252例正常对照中未发现该突变。IVS-3的C→T突变可能与高脂血症有关。

银杏内酯B对谷氨酸诱导大鼠大脑皮质神经元氧化损伤的影响

【目的】探讨银杏内酯B(ginkgolide B)对谷氨酸(glutamate)引起原代培养的脑皮质神经元氧化损伤的保护作用。【方法】采用改良的方法原代培养胎鼠脑皮质神经元,用噻唑蓝(MTT)及乳酸脱氢酶法分别检测神经元的存活率和损伤情况;用硫代巴比妥酸法测定细胞脂质过氧化的程度;并同时检测了细胞内抗氧化酶的活性。【结果】银杏内酯B(10～100μmol/L)能剂量依赖性地抑制谷氨酸(0.8 mmol/L)引起的细胞存活率下降和细胞损伤,同时提高细胞内抗氧化酶活性和减轻细胞脂质过氧化。【结论】银杏内酯B可拮抗谷氨酸所致的神经细胞毒性作用,这可能与其能提高神经细胞内抗氧化酶活性和清除氧自由基有关。

JNK抑制剂SP600125对低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的保护作用

[目的]研究特异性c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125对低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的保护作用。[方法]把体外培养的小脑颗粒神经元从含去极化浓度钾离子(KCl 25mmol/L)的培养基中转移至低钾培养基(KCl 5mmol/L)中诱导神经元凋亡。以Western blot法检测JNK和c-Jun的磷酸化水平。[结果]低钾(KCl 5 mmol/L)磷酸化并激活JNK,诱导c-Jun磷酸化和小脑颗粒神经元凋亡。SP600125通过抑制c-Jun磷酸化而浓度依赖性地促进低钾环境中培养的小脑颗粒神经元的存活。其保护作用的半数有效量(ED_(50))为1.01μmol/L。[结论]SP600125通过特异性地抑制JNK活性而对低钾培养的小脑颗粒神经元具有保护作用;提示JNK是介导低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的关键激酶,它可能可以作为干扰神经元凋亡的药物的作用靶点。

肝细胞癌中Survivin mRNA和Survivin-ΔEx 3mRNA的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制基因Survivin异构体Survivin-ΔEx3在肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)中的表达及其与临床病理之间的关系。方法采用RT-PCR方法对26例肝细胞癌、24例癌旁组织Survivin及Survivin-ΔEx3的mRNA进行检测。分析Survivin-ΔEx3 mRNA表达与临床各项指标(性别、癌组织大小、临床病理分期、TNM分期等)之间的关系,分析Survivin-ΔEx3与野生型肝细胞癌之间的相关性。结果在26例HCC标本中,Survivin-ΔEx3 mRNA阳性表达15例,占58%,阴性表达11例,占42%。HCC组织的Survivin-ΔEx3 mRNA表达与患者性别、HBsAg、肝硬化、病灶单发或多发瘤、肿瘤的大小、包膜、癌栓及淋巴结转移无显著相关性(P﹥0.05),而与病理学分级和TNM分期有显著相关性(P﹤0.05)。癌旁组织中未见Survivin mRNA表达。Survivin-ΔEx3的表达与Survivin之间无相关性(P﹥0.05)。结论 Survivin-ΔEx3与HCC的侵袭性和预后明显相关,且Survivin-ΔEx3的表达与Survivin之间无明显关系,可以作为判断HCC侵袭性和进展的一个潜在预测指标。

阿帕替尼对人涎腺腺样囊性癌生长抑制作用的体内外研究

目的观察阿帕替尼对人唾液腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)细胞的体内外抑制作用,并初步探讨相关机制。方法(1)应用不同浓度的阿帕替尼作用于SACC83,在不同时间点检测细胞活力;(2)构建人裸小鼠SACC83细胞皮下移植瘤模型,每天瘤内注射400μg/mL阿帕替尼0.1 mL,连续注射14 d后,安乐死动物并测量肿瘤的大小、体积和质量;(3)实时荧光定量PCR方法检测400μmol/L阿帕替尼处理4 d后的SACC83细胞中血管生成相关基因VEGFR2、HGF、EGF和Angiogenin的mRNA表达水平。结果(1)400μmol/L阿帕替尼作用于SACC83细胞4 d,能显著抑制SACC83细胞的增殖,抑制率为61.3%(P<0.01);(2)阿帕替尼能显著抑制裸小鼠SACC细胞皮下移植瘤的生长。阿帕替尼组肿瘤质量(382.33±125.29)mg比对照组减少约4倍(P<0.01),阿帕替尼组肿瘤体积(189.75±98.94)mm 3比对照组减小8倍(P<0.01);(3)400μmol/L阿帕替尼可下调SACC83细胞中血管生成相关基因VEGFR2、HGF、EGF和Angiogenin的mRNA表达水平。结论阿帕替尼可抑制人涎腺腺样囊性癌SACC83细胞的增殖,下调SACC83细胞VEGFR2、HGF、EGF和Angiogenin的mRNA表达。