自噬在早期糖尿病大鼠视网膜神经病变中的作用

目的探索自噬在糖尿病大鼠视网膜损伤中的表达变化及其与视网膜神经节细胞(RGC)损伤的相关性。方法共有60只Wistar大鼠经链脲佐菌素腹腔注射制作糖尿病大鼠模型。造模成功后,分别在糖尿病0、4、12周检测RGC数量、视网膜电图(ERG)、视网膜血管形态学变化,Western blot法检测自噬标记物LC3b-Ⅱ与Beclin-1的蛋白表达,免疫组化法检测LC3b-Ⅱ在视网膜上的表达部位。结果糖尿病造模成功后,视网膜RGC数在第12周时减少至0周时的(88.6±2.2)%,差异有统计学意义(P<0.05)。并且ERG的b波以及总振幅在第4周时就出现降低,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot检测显示,糖尿病4周和12周大鼠视网膜中的LC3b-Ⅱ和Beclin-1表达均逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化方法显示LC3b-Ⅱ在各时期糖尿病大鼠视网膜中的视网膜神经节细胞层表达阳性。结论糖尿病视网膜病变中自噬参与了RGC的损伤。

EndophilinA2维持血压稳态作用及机制

目的观察EndophilinA2对小鼠血压的影响并探讨其分子机制.方法：采用植入式遥测技术测定小鼠血压.血管环实验测定小鼠胸主动脉血管收缩和舒张反应.WesternBlot和PCR检测蛋白和mRNA表达,激光共聚焦显微镜和免疫共沉淀检测蛋白-蛋白相互作用,ELISA方法测定内皮细胞总硝基化合物及cGMP的含量.结果EndophilinA2基因敲除小鼠基础血压明显升高,胸主动脉血管内皮依赖性舒张反应减弱,而收缩反应无明显变化.EndophilinA2转基因小鼠则抑制血管紧张素II引起的血压升高,并改善内皮舒张功能障碍.EndophilinA2缺失促进Itch介导的eNOS泛素化降解;相反,过表达EndophilinA2则抑制eNOS降解.进一步研究显示EndophilinA2、eNOS以及Itch三者间存在相互作用,且EndophilinA2和Itch竞争性结合于eNOS645-850位氨基酸区域.结论EndophilinA2是抑制Itch介导eNOS蛋白降解的关键分子,提示EndophilinA2是维持血管内皮舒张功能和血压稳定的新干预靶点.