目的比较骨肉瘤患者和健康人血清蛋白质组学的差异,为筛选骨肉瘤血清分子标志物提供依据。方法采集8例血清蛋白样本(骨肉瘤患者4例及正常人性别、年龄匹配的志愿者4名),用不同的CyDye染料交叉标记后,依次进行双向胶内差异凝胶电泳...目的比较骨肉瘤患者和健康人血清蛋白质组学的差异,为筛选骨肉瘤血清分子标志物提供依据。方法采集8例血清蛋白样本(骨肉瘤患者4例及正常人性别、年龄匹配的志愿者4名),用不同的CyDye染料交叉标记后,依次进行双向胶内差异凝胶电泳(two dimensional—difference in gel electrophoresis,2-D DIGE)、图像分析及基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF—MS)鉴定。对差异非常明显的血清淀粉蛋白(SAA)用Western印迹和ELISA方法进一步验证。结果建立了健康人和骨肉瘤患者血清样品的2-D DIGE图谱,质谱成功鉴定并检索Swiss—Prot等数据库证实43个差异蛋白,其中上调18个蛋白质点,下调25个蛋白质点。Western印迹和ELISA证实SAA在骨肉瘤患者和健康人血清中的差异表达。SAA在骨肉瘤患者不同治疗阶段的血清含量有变化(初诊未经任何治疗时(331.9±39.6)ng/ml,新辅助化疗后手术前(201.3±20.99)ng/ml,术后(55.6±7.33)ng/ml,复发患者(355.7±18.11)ng/ml。结论43种血清差异蛋白质为筛选骨肉瘤的血清分子标志物提供了实验基础。初次发现SAA和骨肉瘤的相关性,并可能成为骨肉瘤的一个新的血清学诊断标志物。展开更多
文摘目的比较骨肉瘤患者和健康人血清蛋白质组学的差异,为筛选骨肉瘤血清分子标志物提供依据。方法采集8例血清蛋白样本(骨肉瘤患者4例及正常人性别、年龄匹配的志愿者4名),用不同的CyDye染料交叉标记后,依次进行双向胶内差异凝胶电泳(two dimensional—difference in gel electrophoresis,2-D DIGE)、图像分析及基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF—MS)鉴定。对差异非常明显的血清淀粉蛋白(SAA)用Western印迹和ELISA方法进一步验证。结果建立了健康人和骨肉瘤患者血清样品的2-D DIGE图谱,质谱成功鉴定并检索Swiss—Prot等数据库证实43个差异蛋白,其中上调18个蛋白质点,下调25个蛋白质点。Western印迹和ELISA证实SAA在骨肉瘤患者和健康人血清中的差异表达。SAA在骨肉瘤患者不同治疗阶段的血清含量有变化(初诊未经任何治疗时(331.9±39.6)ng/ml,新辅助化疗后手术前(201.3±20.99)ng/ml,术后(55.6±7.33)ng/ml,复发患者(355.7±18.11)ng/ml。结论43种血清差异蛋白质为筛选骨肉瘤的血清分子标志物提供了实验基础。初次发现SAA和骨肉瘤的相关性,并可能成为骨肉瘤的一个新的血清学诊断标志物。