目的探讨P2X7受体阻断剂亮蓝G(BBG)对碘酸钠(NaIO3)诱导的年龄相关性黄斑变性(AMD)小鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)通路的影响。方法C57BL/6SPF级雄性小鼠随机分为对照组、模型组...目的探讨P2X7受体阻断剂亮蓝G(BBG)对碘酸钠(NaIO3)诱导的年龄相关性黄斑变性(AMD)小鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)通路的影响。方法C57BL/6SPF级雄性小鼠随机分为对照组、模型组、BBG(低、中、高)剂量组,每组12只,除对照组外其余各组25μg/g尾静脉注射NaIO3诱导建立AMD模型。BBG(低、中、高)剂量组分别腹腔注射25、50、100μg/(g·d)BBG溶液;对照组、模型组腹腔注射等体积生理盐水,连续注射7 d。苏木精-伊红染色(HE)染色视网膜组织,光学相关断层扫描(OCT)检测小鼠眼底情况,以距视神经450 mm处的视网膜厚度进行定量分析;记录视网膜电图,并用LabView7编译程序分析a波、b波;实时荧光定量PCR检测小鼠视网膜中P2X7R m RNA水平;蛋白免疫印迹法检测小鼠视网膜组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1、白介素-1β(IL-1β)蛋白水平。结果与对照组比较,模型组视网膜厚度变薄、a波和b波降低,差异有统计学意义(P<0.05);模型组组织中P2X7R m RNA、NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,BBG(低、中、高)剂量组视网膜厚度增加、a波和b波升高,差异有统计学意义(P<0.05);BBG低剂量组组织中P2X7R mRNA、NLRP3、caspase-1,BBG(中、高)剂量组组织中P2X7R mRNA、NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。随着BBG剂量增加,视网膜厚度逐渐增加、a波和b波逐渐升高;组织中NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β蛋白水平逐渐降低,呈剂量依赖性。结论P2X7R阻断可抑制视网膜组织中NLRP3/caspase-1通路,促进视网膜结构恢复。展开更多
文摘目的探讨P2X7受体阻断剂亮蓝G(BBG)对碘酸钠(NaIO3)诱导的年龄相关性黄斑变性(AMD)小鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)通路的影响。方法C57BL/6SPF级雄性小鼠随机分为对照组、模型组、BBG(低、中、高)剂量组,每组12只,除对照组外其余各组25μg/g尾静脉注射NaIO3诱导建立AMD模型。BBG(低、中、高)剂量组分别腹腔注射25、50、100μg/(g·d)BBG溶液;对照组、模型组腹腔注射等体积生理盐水,连续注射7 d。苏木精-伊红染色(HE)染色视网膜组织,光学相关断层扫描(OCT)检测小鼠眼底情况,以距视神经450 mm处的视网膜厚度进行定量分析;记录视网膜电图,并用LabView7编译程序分析a波、b波;实时荧光定量PCR检测小鼠视网膜中P2X7R m RNA水平;蛋白免疫印迹法检测小鼠视网膜组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1、白介素-1β(IL-1β)蛋白水平。结果与对照组比较,模型组视网膜厚度变薄、a波和b波降低,差异有统计学意义(P<0.05);模型组组织中P2X7R m RNA、NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,BBG(低、中、高)剂量组视网膜厚度增加、a波和b波升高,差异有统计学意义(P<0.05);BBG低剂量组组织中P2X7R mRNA、NLRP3、caspase-1,BBG(中、高)剂量组组织中P2X7R mRNA、NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。随着BBG剂量增加,视网膜厚度逐渐增加、a波和b波逐渐升高;组织中NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β蛋白水平逐渐降低,呈剂量依赖性。结论P2X7R阻断可抑制视网膜组织中NLRP3/caspase-1通路,促进视网膜结构恢复。
