APPSWE转基因鼠的繁育及子代鉴定的研究

目的 :探讨老年性痴呆 (AD)转基因模型鼠 (TgAPPSWE2 576杂合子鼠 ,Tg2 576)的优化繁育方法 ,鉴定APPSWE基因阳性的子代鼠 ,为下一步AD研究奠定基础。方法 :(1)用 3种不同的交配方式观察子代鼠的存活率及APPSWE基因阳性的比率 ;(2 )从子鼠鼠尾中提取基因组DNA ,用PCR方法扩增APPSWE基因片段 ,电泳后观察结果 ;(3 )PCR产物装入pGEM -Teasy载体中 ,测序证实其基因序列。结果 :雄性和雌性Tg2 576互交 ,所产 4窝子鼠 ,2d内全部死亡。雄性Tg2 576和雌性C57BL交配所产子鼠存活率 81% ,APPSWE基因的阳性率为 43 3 %。雌性Tg2 576和雄性C57BL交配存活率 82 4% ,APPSWE基因的阳性率 2 1 9%。经秩和检验两种繁育方式所产子鼠的存活率无显著差异 (P >0 0 5) ,APPSWE基因的阳性率有显著差异 (P <0 0 5)。琼脂糖电泳显示PCR产物分子量为 42 8bp ,与目的基因片段相对分子质量大小一致 ;DNA序列测定证实PCR产物基因序列和APP片段基因序列一致 ,并存在APPSWE(K670N ,M671L)突变。结论 :雄性Tg2 576和雌性C57BL品系小鼠交配是繁育APPSWE基因阳性子鼠的较好方法 ;本实验所用PCR方法能够精确鉴定APPSWE基因阳性子鼠 。