人类CD8^+记忆T细胞体外扩增方法的研究

目的:研究体外扩增人类CD8+记忆T细胞的新方法,为抗病毒与抗肿瘤的过继性免疫治疗提供新的手段。方法:将anti-CD3抗体、anti-CD28抗体、CD70、白细胞介素(IL)-2、IL-7和IL-15进行排列组合,设计出63种刺激方式,对体外分离得到的正常人外周血CD8+T细胞进行体外扩增;培养14 d后进行细胞计数,并检测CD8+T细胞的纯度以及CD8+中枢记忆T细胞(TCM)和CD8+效应记忆T细胞(TEM)所占的比例,进而计算出CD8+T细胞、CD8+TCM和CD8+TEM的体外扩增倍数,从而确定理想的刺激方法。结果:体外扩增CD8+T细胞、CD8+TCM和CD8+TEM的理想刺激方式均为anti-CD3抗体、IL-2和IL-7三者的组合;该刺激方式使3种细胞在培养14 d后分别扩增了13.19、13.28和15.27倍。结论:Anti-CD3抗体、IL-2和IL-7三者的组合,是刺激人类CD8+记忆T细胞体外扩增的相对理想方法。

维生素C对CD4＋效应记忆性T细胞体外扩增的影响

目的:探讨小分子药物维生素C(VC)对CD4+效应记忆性T细胞(TEM)体外扩增的影响从而改善过继免疫治疗的效果。方法:体外分离正常人的外周血CD4+T淋巴细胞,将细胞分为2组(实验组和对照组)进行细胞培养。实验组加入VC后,通过细胞计数仪和流式细胞仪对2组细胞中TEM的扩增情况进行检测。结果:(1)在CD4+T细胞体外扩增实验中,VC对CD4+T细胞的总数无显著影响。(2)VC使TEM在CD4+T细胞中的比例显著升高,100 mg/L为扩增的最佳浓度。(3)在CD4+T细胞扩增的第10天检测其中TEM的细胞数量,对照组TEM的数量为(1.22±0.15)×106,实验组TEM的数量为(3.56±0.35)×106,两者的差异有统计学意义(P<0.01)。结论:VC可有效地促进CD4+TEM的体外扩增,为过继免疫治疗提供简单、安全及有效的体外扩增方法。