国内口腔扁平苔藓治疗的循证医学分析

目的 :对国内有关OLP治疗的临床报道进行循证医学分析 ,为正确治疗OLP提供临床指导。方法 :检索2 0 0 1年 1 0月以前发表在国内中文期刊上的所有相关文献并进行评估。结果 :无A级文献 ;B级 7篇 ,结果均表明对OLP治疗有效 ;C级 1 1 0篇为非随机对照或无对照临床试验 ,结论的可靠性较差。结论 :从循证医学角度来看 ,目前国内报道的理化治疗对OLP的疗效并不确切 ;中西医结合可作为现阶段治疗首选。

国内复发性口腔溃疡治疗的循证医学分析

目的分析国内近5年复发性口腔溃疡药物治疗的疗效情况及研究质量.方法检索中国期刊网全文数据库和中国生物医学数据库,收集发表时间在1999～2003年治疗复发性口腔溃疡疗效观察的中文文献,对符合标准的文献进行META分析和循证医学分析.结果共检索到281篇文章,符合纳入标准的有18篇,治疗方法共13种,对其中的3篇进行META分析,证明碱性成纤维细胞生长因子治疗组与口服维生素B、C对照组具有显著差异,其95%的可信区间为0.432～0.656.结论 1999～2003年期间国内治疗复发性口腔溃疡的论著数量较多,但高质量研究较少,本研究显示碱性成纤维细胞生长因子局部喷雾剂在缓解疼痛和促进愈合方面疗效确切,值得临床推广使用.

口腔行为状况对牙周炎合并T2DM患者牙周局部及全身糖代谢的影响

【目的】探讨口腔行为状况对牙周炎合并T2DM（T2DM）患者牙周局部及全身糖代谢的影响。【方法】选择牙周炎合并T2DM患者100例，采用单因素和多因素非条件Logistic回归分析，研究口腔行为状况对牙周炎合并T2DM患者牙周局部及全身糖代谢水平的影响。【结果】单因素分析结果显示，年龄、性别、吸烟、饮酒、受教育程度、刷牙次数、使用牙线为T2DM相关危险因素（P〈0．05）；多因素非条件Logistic回归分析结果显示，年龄、吸烟、饮酒、刷牙次数是影响牙周炎合并T2DM患者牙周局部及全身糖代谢水平的独立危险因素（P〈0．05）。【结论】年龄、不良口腔卫生习惯等因素对牙周炎合并T2DM患者的牙周局部及全身糖代谢水平具有重要影响。应加强牙周炎合并T2DM患者口腔保健干预指导，提高其口腔自我保健能力，控制牙周炎和改善血糖水平。

广泛型侵袭性牙周炎患者龈沟液中白介素-17的检测

目的比较广泛型侵袭性牙周炎患者与健康人龈沟液中白介素-17(IL-17)的表达水平及与临床指标的关系。方法选择广泛型侵袭性牙周炎患者18例和健康人16例,共68颗牙,记录临床牙周检查指标,用滤纸条法收集龈沟液。采用抗体夹心ELISA法测定广泛型侵袭性牙周炎患者治疗前、治疗后3个月及健康对照者龈沟液中IL-17总量和浓度。结果广泛型侵袭性牙周炎患牙治疗前龈沟液中IL-17的总量和浓度高于牙周健康牙,基础治疗3个月后广泛型侵袭性牙周炎患牙龈沟液中IL-17的总量和浓度较治疗前下降。广泛型侵袭性牙周炎患牙龈沟液中IL-17浓度与探诊深度、附着丧失和出血指数呈正相关关系,而IL-17总量仅与探诊深度呈正相关关系。结论龈沟液中IL-17浓度可能与广泛型侵袭性牙周炎牙周破坏及炎症的严重程度相关。

口腔白斑和鳞癌组织中ems1基因扩增的临床意义

目的:探讨em s1基因在口腔白斑和口腔鳞癌组织中扩增的临床意义。方法:采用显微解剖和差示PCR方法在15例正常口腔黏膜组织,30例口腔白斑组织和33例口腔鳞癌组织中检测em s1扩增,Logistic回归分析其与患者临床病理参数之间的相关关系。结果:em s1扩增与口腔鳞癌原发肿瘤大小T分级(P=0.025)、分化程度(P=0.043)、淋巴结状态(P=0.015)、临床分期(P=0.038)有显著相关性。结论:有em s1扩增的口腔鳞癌患者其预后可能较差,提示em s1扩增对OSCC预后有一定的预测价值。

不同牙周状态下龈下菌斑中人类巨细胞病毒的检测

目的 :研究人类巨细胞病毒 (HCMV)与慢性牙周炎及其活动性的相关性。方法 :采集 62例慢性牙周炎患者 (男性 2 7例 ,女性 3 5例 )的牙周炎活动部位 ,牙周炎静止部位 ,以及轻度龈炎部位的龈下菌斑 ,使用SeekVi ralDNAkit试剂盒提取DNA ,采用巢式PCR法检测HCMV ,比较同一患者不同牙周状态的检出率并加以分析。结果 :慢性牙周炎患者牙周炎活动部位、牙周炎静止部位、轻度龈炎部位的HCMV检出率为分别为 3 8.7%、14 .5 %、12 .9% ;HCMV在牙周炎活动部位的检出率高于牙周炎静止期部位 (P <0 .0 5 ) ,以及轻度龈炎部位 (P <0 .0 5 ) ;牙周炎静止部位与轻度龈炎部位的HCMV检出率的差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :提示HCMV感染与慢性牙周炎及其活动性的有一定的相关性。

口腔肿瘤患者外周血单核细胞CD_(69)的表达及意义

目的:测定外周血单核细胞CD69分子的表达,探索口腔肿瘤患者的T细胞的活化功能。方法:实验对象10位健康人作为对照组;8位口腔良性肿瘤患者为实验组Ⅰ;10位口腔鳞状细胞癌的患者为实验组Ⅱ。每位实验对象在实验的当天,抽取10 mL的静脉血。用F icoll-Paque剃度离心法分离PBMC。将PBMC悬浮液分别与TCM,Con A和PHA培养4 h和20 h,分别收获细胞,用双色和单色单克隆荧光抗体CD4-FITC/CD8-PE和CD69-PE标记,CD69的表达用流式细胞仪和相应的分析软件SYSTEMTM II SOFTWARE分析。结果:在PBMC经Con A刺激4 h后,口腔鳞状细胞癌患者的CD69表达的增长率(44.5%)明显低于对照组(67.8%)和实验组Ⅰ(70.8%),P<0.05。同样,经PHA刺激后4 h,口腔鳞状细胞癌患者的CD69表达的增长率也低与其他两组(P<0.05),而且,PB-MC的CD69表达率也低与其他两组(P<0.05)。结论:本研究提示这种免疫反应力的下降可能是由于淋巴细胞的活化或增殖功能低下的原因。由PHA诱导的PBMC的CD69表达可能成为口腔癌患者免疫监视系统的指标之一。

牙周炎犬种植体周围炎动物模型建立

目的利用牙周炎beagle犬建立一种近似人类临床种植体周围炎的动物模型。方法在6只年龄1周岁,全身健康的Beagle犬牙颈部龈缘水平结扎丝线3个月,形成牙周炎动物模型后,植入种植体并分别于第1天、第3天、第7天、第14天、1月末、2月末和3月末检查实验动物的种植体周围状况。结果所有动物实验侧种植体周围均形成近似人类临床种植体周围炎的实验性种植体周围炎,但严重程度不一。结论在牙周炎Beagle犬可成功建立与临床实际近似的种植体周围炎模型,成功率高,可为临床研究提供帮助。

慢性牙周炎病人外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞的检测和免疫抑制功能分析

目的:探讨慢性牙周炎病人外周血中CD4+CD25+调节性T细胞与牙周炎病变程度的相关性,并进一步分析CD4+CD25+调节性T细胞的免疫抑制功能。方法:应用流式细胞仪检测牙龈炎、慢性牙周炎病人和健康对照者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例;以体外淋巴细胞混合培养法检测CD4+CD25+调节性T细胞对同源CD4+CD25-T细胞增殖的抑制效应,ELISA法检测培养体系中转化生长因子-β、白细胞介素-10的分泌水平。结果:轻度和中度慢性牙周炎组外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例分别为(19.33±7.04)%和(18.56±5.79)%,显著高于健康对照组和牙龈炎组(P<0.05);重度慢性牙周炎组为(9.31±3.04)%,显著低于健康对照组、牙龈炎组、轻度和中度慢性牙周炎组(P<0.05)。当与CD4+CD25-T细胞1∶1混合培养时,重度慢性牙周炎者CD4+CD25+调节性T细胞的抑制率较健康对照组、牙龈炎组、轻度和中度慢性牙周炎组降低(P<0.05),各培养组之间转化生长因子-β、白细胞介素-10的分泌水平无显著差异。结论:轻度和中度慢性牙周炎病人外周血CD4+CD25+调节性T细胞的表达上调,而重度慢性牙周炎病人则显著下降;重度慢性牙周炎病人CD4+CD25+调节性T细胞的抑制功能存在异常,可能与其接触抑制途径缺陷有关。

不同浓度的含氟牙膏再矿化根面龋的体外实验

目的:比较氟浓度分别为1.1g/L、1.45g/L和5g/L的含氟牙膏促进根面龋再矿化的效果。方法:取第三磨牙靠近冠方的根部制备成牙根组织块,开窗后,置37℃脱矿液中96h,随机分为1.1g/L、1.45g/L、5g/L含氟牙膏组和不含氟牙膏组,每组8个样本,置于处理液、酸性缓冲液和中性缓冲液中,进行再矿化循环。每天6次,循环8天。应用电阻抗仪测量开窗区再矿化前后的电阻值,偏光显微镜观察各组样本再矿化后的形态学变化,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)分析样本再矿化后矿物质含量的变化。采用SPSS13.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果:再矿化后含氟牙膏组样本的电阻值变化、CLSM总荧光量和平均荧光量变化均高于不含氟牙膏组,且5g/L含氟牙膏组的变化高于1.1g/L和1.45g/L组(P<0.05)。偏光显微镜观察发现,含氟牙膏组样本再矿化后可见不同程度的矿物质沉积,5g/L含氟牙膏组的矿物质沉积带宽于1.1g/L和1.45g/L组。结论:含氟牙膏能有效再矿化人工根面龋,氟浓度为5g/L的牙膏再矿化效果优于氟浓度为1.1g/L和1.45g/L的牙膏。

健脾护齿方对伴放线放线杆菌超声提取物作用下CD4^+CD25^+调节性T细胞免疫抑制功能的影响

目的:探讨健脾护齿方对伴放线放线杆菌(actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)超声提取物作用下CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory Tcells,Tregs)免疫抑制功能的影响。方法:免疫磁珠法分离正常BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+Tregs并进行体外培养,将300μg/mlAα超声提取物和不同剂量健脾护齿方药液加入培养液中,72h后收集细胞及上清液,Real-Time PCR法测定培养细胞Foxp3 mRNA的表达,ELISA法分别测定细胞上清液中IL-10,TGF-β水平。结果:Aa超声提取物能够显著上调CD4+CD25+Tregs Foxp3 mRNA的表达,增强其免疫抑制作用,但不影响CD4+CD25+Tregs分泌IL-10和TGF-β;健脾护齿方抑制Aa超声提取物上调CD4+CD25+Tregs Foxp3mRNA表达的作用,并且Foxp3 mRNA表达的抑制作用与健脾护齿方剂量之间呈剂量—效应关系。结论:健脾护齿方有抑制Aa超声提取物上调CD4+CD25+Tregs免疫抑制功能的作用,这种抑制效应可能与Foxp3基因表达的下调有关,并且不具有抑制性细胞因子依赖性。

PcDNA3/sIL-1RⅠ重组载体体外表达产物生物学活性的检测

目的:检测构建的PcDNA3/sIL-1RⅠ真核表达载体在体外的表达产物是否具有生物学活性。方法:脂质体介导PcDNA3/sIL-1RⅠ体外转染CHO细胞,MTT法检测重组质粒转染的CHO细胞上清液能否阻断IL-1β生物学活性。结果:重组质粒转染的CHO细胞上清液中表达的sIL-1RⅠ能阻断不同浓度IL-1β抑制A375细胞生长的作用。结论:PcDNA3/sIL-1RⅠ重组质粒在体外导入哺乳动物细胞后能够表达具有相应生物学活性的目的产物。

人釉原蛋白重组质粒PcDNA3-AMG在COS-1细胞系中的表达

目的研究人釉原蛋白(AMG)重组质粒PcDNA3-AMG在COS-1细胞系中的表达。方法采用脂质体载体法将釉原蛋白重组质粒PcDNA3-AMG导入COS-1细胞系,用Zeoin筛选得到稳定转染克隆,并经ELISA检测细胞内和细胞培养液中重组釉原蛋白AMG的表达。结果在未经转染的对照组细胞内和细胞培养液中均未检测到AMG的表达,而经转染的实验组不论细胞内或细胞培养液中均检测到AMG的较高表达,重组质粒PcDNA3-AMG转染组细胞内AMG浓度达0.253μg/ml。结论PcDNA3-AMG具有较强的在真核细胞系中表达和分泌AMG的能力,适宜基因工程体外制备重组釉原蛋白。

环境因素对口腔链球菌产生过氧化氢速率的影响

目的观察口腔环境多种因素对口腔链球菌(Streptococcus oralis,S.oralis)H2O2产生速率的影响。方法采用微量板法测定S.oralis在不同浓度的葡萄糖、蔗糖、Ca2+、F-、HFPO3-及不同pH值条件下产生H2O2的速率。结果S.oralis在无外源性糖的条件下H2O2产生速率为每分钟7.48μmol/L;加入0.01～10mmol/L葡萄糖和蔗糖后,H2O2产生速率显著增高(P<0.05);不同浓度的葡萄糖、蔗糖间,S.oralisH2O2产生速率差异无统计学意义(P>0.05);pH<6.0时S.oralis的H2O2产生速率显著降低(P<0.05);Ca2+、F-和FHPO3-对S.oralisH2O2产生速率的50%抑制浓度分别为1820.71、1.90和12.65mmol/L。结论环境因素对S.oralisH2O2产生速率有一定影响。

巢式PCR检测龈下菌斑中HCMV、EBV、HSV-1与慢性牙周炎活动性的关系

目的 建立临床检测龈下菌斑标本中人巨细胞病毒 (HCMV)、Epstein Barr病毒 (EBV)、单纯疱疹病毒 1型 (HSV 1 )巢式PCR方法 ,研究这 3种病毒与慢性牙周炎活动性的关系。方法 收集6 2例慢性牙周炎患者 (男性 2 7例、女性 35例 ,平均年龄 5 3岁 )的牙周炎活动部位、牙周炎静止部位的龈下菌斑 ,提取DNA后使用巢式PCR检测HCMV、EBV、HSV 1 ,比较分析其在同一病人不同部位的检出率。结果 牙周炎活动部位的HCMV检出率为 38.7%,EBV的检出率为 5 8%,HSV 1的检出率为30 .6 %,两种以上病毒合并感染的检出率为 4 0 .3%;牙周炎静止部位的HCMV检出率为 1 4 .5 %,EBV为 2 2 .6 %,HSV 1为 1 1 .3%,两种以上病毒合并感染的检出率为 1 1 .3%。这 3种病毒及其合并感染在牙周炎活动部位的检出率均高于牙周炎静止部位 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 提示HC MV、EBV、HSV 1与慢性牙周炎的活动性相关。

慢性牙周炎患者不同牙周状态部位EB病毒的检测分析

目的 研究Epstein Barr病毒 (EBV)在慢性牙周炎患者不同牙周状态部位的检出率 ,分析EBV与慢性牙周炎及其活动性的相关性。方法 收集 6 2例慢性牙周炎患者的牙周炎活动部位、静止部位及轻度龈炎部位的龈下菌斑 ,提取DNA后使用巢式PCR检测EBV ,并对其检出率加以分析。结果 慢性牙周炎患者牙周炎活动部位EBV的检出率为 5 8% ,牙周炎静止部位EBV为2 2 6 % ,轻度龈炎部位的EBV为 19 4 %。EBV在牙周炎活动部位的检出率高于静止及轻度龈炎部位的检出率 (P <0 0 1)。

两种治疗仪在牙周基础治疗中的临床疗效和患者疼痛感受的比较

目的比较牙周炎患者对两种超声治疗仪在牙周基础治疗中的临床疗效及患者疼痛感受的差异，以期为临床提供参与。方法选择38例轻、中度牙周炎患者，对患者口内一、四象限用奇数、偶数随机法选择A（Vector治疗仪，德国DURR齿科公司）或B（Suprasson P5 Newtron超声多功能牙科治疗仪，法国赛特力公司）超声治疗仪进行治疗，第2天对二、三象限使用另一系统进行治疗。治疗结束后即刻用视觉模拟评分法（visualanaloguescale，VAS）对患者行疼痛评估。治疗前及治疗后1个月检测菌斑指数（plaqueindex，PLI）、探诊出血（bleedingonprobing，BOP）和探诊深度（probingdepth，PD）等各项临床指标。结果用两种超声系统行牙周基础治疗后，患者PLI、BOP和PD均较术前明显改善（P〈0．01）；两者BOP和PD的改变差异无统计学意义（P〉0．05），与B治疗仪相比，A治疗仪治疗区域的PLI明显改善（P〈0．05）。A、B治疗仪在牙周基础治疗中患者主观感受疼痛VAS值分别为（22．5±7．5）mm和（37．2±11．3）mm，前者约为后者疼痛值的60％，两者差异有统计学意义（P〈0．01）。结论在轻、中度牙周炎牙周基础治疗过程中，A、B两种超声治疗仪均疗效确切，A治疗仪能明显减轻患者在牙周治疗过程中的疼痛感。

侵袭性牙周炎患者外周血CD4＋CD-25＋调节性T细胞的检测及功能分析

目的探讨侵袭性牙周炎患者外周血中CD4＋CD-25＋调节性T细胞比例及其免疫抑制功能的变化，以期加深对侵袭性牙周炎免疫调节机制的认识。方法应用流式细胞仪计数牙周健康者17例、慢性牙周炎患者17例和广泛型侵袭性牙周炎患者16例外周血中CD4＋CD-25＋调节性T细胞的比例；免疫磁珠法分离受试者外周血中CD4＋CD-25＋调节性T细胞和CD4＋CD-25＋T细胞，体外淋巴细胞混合培养法检测CD4＋CD-25＋调节性T细胞对同源CD4＋CD-25-T细胞增殖的抑制效应。结果侵袭性牙周炎患者外周血中CD4＋CD-25＋调节性T细胞占CD-4＋T细胞的比例为（9．71±4．01）％，显著低于牙周健康者[（14．72±3．51）％]和慢性牙周炎患者[（17．01±5．16）％]，差异有统计学意义（P〈0．05）；当CD4＋CD-25＋调节性T细胞与CD4＋CD-25-T细胞的比例为2：1、1：1、1：2时，侵袭性牙周炎患者CD4＋CD-25＋调节性T细胞的抑制率[分别为（31．37±5．12）％、（24．47±5．53）％及（19．36±3．58）％]较慢性牙周炎患者[分别为（54．14±8．23）％、（41．72±6．35）％及（28．21±5．31）％]和牙周健康者[分别为（58．02±9．62）％、（45．25±8．11）％及（29．56±4．23）％]显著降低（P〈0．05）。结论侵袭性牙周炎患者外周血CD-4＋CD-25＋调节性T细胞在数量上存在异常，并可能伴有抑制功能缺陷。

肿瘤坏死因子和脂多糖影响牙周膜细胞表达骨保护因子的研究

目的 研究脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS)和肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor α,TNF α)对牙周膜细胞增殖及分泌骨保护因子 (osteoprotegerin ,OPG)的影响。 方法 培养牙周膜细胞并形成单细胞克隆 ,培养基中加入LPS和TNF α ,MTT法检测牙周膜细胞增殖水平 ,SandwitchELISA法测定培养上清液中OPG含量。结果 TNF α浓度在 1 0 μg/L以上时可增加细胞对OPG的表达量 (P <0 0 5) ,但由于TNF α同时抑制牙周膜细胞增殖 (P <0 0 5 ) ,因此培养上清中OPG总量无明显变化 (P >0 0 5) ;LPS对牙周膜细胞增殖和OPG表达均无明显影响 ,与TNF α也没有交互作用 (P >0 0 5)。结论 TNF α能刺激牙周膜细胞OPG表达水平的提高 ;