1998～2002年灌阳县食品卫生状况分析

目的 了解灌阳县食品卫生状况的动态变化,为制定卫生监督政策提供科学依据。方法 对1998～2002年灌阳县防疫站的食品卫生监督资料进行统计分析。结果 2000年食品合格率最高,2002年食品合格率最低。大多数食品单位卫生制度不健全,消毒合格率偏低。结论 提高食品从业人员的卫生知识水平,加强卫生宣教和监督力度。

环境低砷暴露地区2型糖尿病人群尿砷水平与外周血单个核细胞相对端粒长度的关系研究

目的:探讨环境低砷暴露地区2型糖尿病人群尿砷浓度与外周血单个核细胞(PBMC)相对端粒长度的关系。方法:选取华南某地574名2型糖尿病患者作为研究对象,进行基本情况调查与生化指标检测,利用电感耦合等离子质谱仪(ICP-MS)检测尿砷浓度,实时荧光定量PCR法(qPCR)检测PBMC相对端粒长度。根据尿砷浓度将研究对象分为3组,比较各组间生化指标与PBMC相对端粒长度的差异;采用单因素与多因素有序Logistic回归分析研究2型糖尿病人群PBMC相对端粒长度的影响因素;采用SPSS Process 2.0分析糖化血红蛋白在尿砷与相对端粒长度之间的中介效应。结果:2型糖尿病患者尿砷中位数为29.80μg/L,四分位数间距为39.81μg/L。PBMC相对端粒长度为0.82±0.60,低砷组、中砷组与高砷组PBMC相对端粒长度分别为1.04±0.92,0.77±0.29与0.63±0.28,差异具有统计学意义(P<0.05)。多因素有序Logistic回归分析发现,尿砷是影响相对端粒长度的危险因素;中砷组与低砷组相比,OR(95%CI)为2.149(1.451,3.182);高砷组与低砷组相比,OR(95%CI)为4.077(2.687,6.185),差异均具有统计学意义(P<0.01)。中介效应分析结果显示,尿砷对相对端粒长度的直接效应值为-0.287(-0.369,-0.204),糖化血红蛋白是尿砷与相对端粒长度之间的一个中介变量,中介效应值为-0.072(-0.106,-0.045),中介比例为19.99%。结论:环境低砷暴露条件下,尿砷是影响2型糖尿病患者PBMC相对端粒长度的危险因素,尿砷浓度越高,相对端粒长度越短。2型糖尿病患者PBMC相对端粒长度可能是砷暴露的潜在生物标志。

中国汉族、布依族和壮族群体中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1基因多态性

【目的】探讨人类聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)5个外显子核苷酸多态性。【方法】采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和银染技术检测3个民族(汉族、布依族和壮族)634名正常人PARP-1基因多态性。【结果】在3个民族634名正常人血标本的5个外显子扩增产物SSCP电泳条带中,219名汉族人PARP-1基因5个外显子均未检出多态性条带;203名布依族和212名壮族人PARP-1基因的5个外显子扩增产物中分别有2例的外显子20检出1条多态性条带,其余4个外显子扩增产物未见多态性条带。【结论】PARP-1基因第20外显子上可能存在多态性。

萌动激活赤灵芝孢子粉致畸、致突变和抗突变的实验研究

目的与方法 采用大鼠致畸胎、小鼠骨髓细胞染色体畸变 (CA)分析检测萌动激活赤灵芝孢子粉的致畸胎、致突变和抗突变性。结果 :①灵芝孢子粉小鼠骨髓细胞CA率与阴性对照组比较差别无显著性 (P >0 0 5 )。②灵芝孢子粉对孕鼠体重、胚胎早期发育、胚胎生长发育、以及胎鼠的骨骼发育和内脏器官发育均无不良影响。③灵芝孢子粉各剂量对 4 0mg/kg、5 0mg/kg环磷酰胺 (CP)诱发的小鼠骨髓细胞染色体畸变率有明显的抑制作用 (P <0 .0 5 ,P <0 0 1) ,抑制率分别为 5 6 2 %、34 1%、39 8%和 6 7 8%、5 9 9%、5 2 0 % ,对 5 0mg/kgCP诱发的CA抑制率在 5 2 .0 %以上 ,并有剂量反应关系。结论 :萌动激活赤灵芝孢子粉未见致畸胎和细胞染色体损伤作用 ,对化学物引起的染色体损伤具有一定的拮抗或保护作用。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1多态性的检测

目的 检测人类聚腺苷二磷酸核糖聚合酶 -1(PARP -1) 5个外显子核苷酸多态性。方法 采用聚合酶链式反应 (PCR) -单链构象多态性 (SSCP)和银染技术检测 3个民族 63 4名正常人PARP -1基因多态性。结果 在3个民族 63 4名正常人血标本的 5个外显子扩增产物SSCP电泳条带中 ,2 19名汉族人PARP -1基因 5个外显子均未检出多态性条带 ;2 0 3名布依族和 2 12名壮族人PARP -1基因的 5个外显子扩增产物中分别有 2例的外显子 2 0的SSCP电泳条带检出 1条多态性条带 ,其余 4个外显子扩增产物SSCP电泳未见多态性条带。结论 PARP -1基因第2 0外显子上可能存在多态性。PCR -SSCP银染技术具有简便、高效、快速、重现性好等优点 ,是对大样本进行PARP-1基因突变筛检的一种有效的方法 。

多重PCR-SSCP法检测妇科肿瘤患者hMSH2基因突变

目的 :建立经济快捷地筛查基因突变的技术 ,研究妇科肿瘤患者hMSH2基因突变情况 ,寻找与妇科肿瘤发生相关的分子标记物。方法 :通过PCR优化策略 ,建立多重PCR SSCP法 ;收集 42名妇科肿瘤病人的基础资料及血液标本 ,抽提血液DNA ,用多重PCR法扩增hMSH2基因第六、第七外显子 ,并进行单链构象多态性分析(SSCP)及DNA序列分析。结果 :检测出 2位妇科肿瘤病人在hMSH2基因第七外显子有杂合性突变 ,且为Leu→Phe的错义突变。未发现hMSH2基因第六外显子上存在突变。结论 :多重PCR SSCP是筛查基因突变的一种快速有效的方法 ,hMSH2基因第七外显子上的突变可能是与妇科肿瘤发生相关的一种分子标记物。

hMTH1缺陷细胞株建立及生物学特性研究

目的 建立hMTH1缺陷细胞株 ,观察该缺陷所引起的生物学效应。方法 用hMTH1基因反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体 (pEGFP C1 T)转染人胚肺成纤维细胞 (HLF) ,半定量RT PCR鉴定其对hMTH1基因mRNA表达的抑制效果。同时观察转染细胞生长形态 ,绘制生长曲线 ,用流式细胞术观察细胞周期 ,软琼脂培养法鉴定恶性程度。结果 pEGFP C1 T载体在转染细胞内可较稳定表达 ,缺陷细胞株hMTH1mRNA表达水平比HLF细胞下降了 47%。hMTH1缺陷细胞生长形态无明显变化 ,细胞倍增时间为 0 89d ,与HLF细胞 0 93d接近 ,细胞周期各时相未受影响 ,软琼脂培养未见细胞集落。结论 hMTH1缺陷细胞株成功建立 ,该缺陷不足以单独引起可观察的生物学效应。

聚合酶链反应-增强化学发光检测结核分枝杆菌

目的 探讨微孔板杂交技术结合增强化学发光 (ECL)检测结核分枝杆菌 (MTB)。方法 同时应用聚合酶链反应 (PCR) ECL、PCR 比色法与PCR电泳检测 6 0例活动性肺结核和 5 4例健康对照痰标本 ,比较结果。结果 PCR ECL、PCR 比色法与PCR电泳总阳性率分别为 76 .7%、6 3.3%、5 0 .0 % ,其中PCR ECL阳性率显著高于PCR电泳 (P <0 .0 5 ) ;对涂片阳性标本 ,阳性率分别为 85 .7%、85 .7%、71.4% ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;对涂片阴性标本 ,阳性率分别为 73.9%、5 6 .5 %、43.5 % ,PCR ECL阳性率高于PCR电泳 (P <0 .0 5 )。另外PCR ECL、PCR 比色法与PCR电泳特异性分别为 92 .6 %、96 .3%、96 .3% ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 PCR ECL灵敏度高 ,能提高临床标本MTB检出率 ,尤其是对涂片阴性痰标本 ,并且该方法操作简单 ,结果客观。

DSB修复基因hKu70反义RNA真核表达载体构建

目的 构建人DNA双链断裂 (DSB)修复基因hKu70反义RNA真核表达载体pEGFP C1 K ,为以后的hKu70基因功能和毒理学研究提供实验材料。方法 提取人胚肺成纤维细胞 (HLF)总RNA ,逆转录酶 多聚酶链式反应 (RT PCR)扩增hKu70基因cDNA保守序列 ,经与pGEM T载体连接、筛选、克隆、抽提质粒和双酶切后 ,将纯化的hKu70基因cDNA保守序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGFP C1中 ,筛选、克隆、抽提质粒 ,从而构建hKu70基因反义RNA真核表达载体pEGFP C1 K。结果 经RT PCR获得 467bp含限制性内切酶位点的DNA片段 ,T载体克隆后经双酶切、测序 ,确定该片段为hKu70基因cDNA ,进而构建反义RNA真核表达载体pEGFP C1 K ,并双酶切 ,测序确证。结论 成功构建hKu70基因反义RNA真核表达载体pEGFP C1 K ,为建立该基因低表达细胞株。

hPARP-1基因cDNA翻译起始区域的T载体克隆

目的 克隆及构建含限制性内切酶位点BamHⅠ、SacⅠ的人聚腺苷二磷酸核糖聚合酶 1(hPARP 1)基因cDNA翻译起始区域的pGEM T S载体 ,为以后的亚克隆和毒理学研究提供实验材料。方法 采用RT PCR方法 ,用正常人胚肺成纤维细胞 (HLF)抽提的总RNA逆转录成cDNA ,再以cDNA为模板 ,扩增hPARP 1基因片段 ,并直接与T载体连接后转化大肠埃希菌DH5α ,用蓝 (白 )斑试验筛选出阳性克隆 ,抽提重组质粒并进行PCR及酶切鉴定 ,再行序列分析。结果 经RT PCR获得 5 0 7bp含限制性内切酶位点的阳性产物 ,T载体克隆、PCR及酶切鉴定和序列分析后证实 ,克隆片段与Genbank中该基因的序列同源性为 99 9%。结论 该实验成功地构建了含hPARP 1基因cDNA翻译起始区域的T载体克隆 。

高浓度锌对雄性大鼠生殖系统的影响

目的:探讨高浓度锌对雄性大鼠生殖系统的影响.方法:分别以12、120、240mg/kg三个剂量的硫酸锌,给大鼠灌胃染毒60天,观察大鼠生殖系统的变化.结果:各剂量组锌对雄性大鼠的生殖系统产生不同程度的影响,低、中、高各剂量组大鼠精子数目和活动度分别为(93.35±23.62)×109/L、(61.92±10.01)%;(75.20±20.26)×109/L、(56.62±11.46)%和(46.45±18.84)×109/L、(42.85±10.49)%,与阴性对照组(72.60±22.72)×109/L、(58.85±8.85)%比较,低剂量组精子活动数目和活动度显著提高,高剂量组显著降低,且有统计学意义(P＜0.05).高剂量组大鼠睾丸有较明显的病理学损伤.结论:高浓度锌对雄性大鼠生殖有损伤作用.

精安胶囊对大鼠精子质量的影响

目的 :探讨精安胶囊对大鼠精子质量的影响 ,为临床安全使用提供依据。 方法 :80只SD雄性大鼠 ,随机分为低剂量组 ( 5 5 7 1mg/kg) ,中剂量组 ( 5 5 71mg/kg) ,高剂量组 ( 114 2 0mg/kg)和阴性对照组 ( 2 0g/L淀粉 )共 4组 ,每组 2 0只 ,连续给药 6 0d后处死 ,取一侧附睾分析精子计数、活率和形态 ,实验数据运用方差、χ2 检验、Kruskal Wal lis检验进行统计学分析。 结果 :各剂量组精安胶囊对大鼠的精子密度、活率和形态有不同程度的影响。低剂量组精子密度显著增加 (P <0 .0 1) ,高剂量组精子密度和活率降低 ,且与阴性对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。低剂量组精子形态异常率降低 ,中、高剂量组升高 ,但无统计学意义 (P >0 .0 5 )。 结论 :低剂量精安胶囊可改善精子质量 。

DNA错配修复酶hMSH2缺陷细胞株生物学特性

目的 通过对hMSH2酶缺陷的基因工程细胞的生物学特性研究 ,探讨错配修复酶hMSH2缺陷与肿瘤易感性的关系。方法 分别用普通光镜法、电镜法、细胞计数法、流式细胞术观察hMSH2酶缺陷细胞生长形态、超微结构、生长曲线及细胞周期 ,并通过软琼脂培养法鉴定hMSH2酶缺陷细胞恶性程度。结果 hMSH2酶缺陷细胞体积增大 ,有异型性改变 ;细胞表面突起增多 ,核浆比例增大 ;细胞生长速度加快 ;细胞内DNA含量增加 ,出现G1期阻滞 ;不能在软琼脂中生长。结论 hMSH2酶缺陷细胞恶性程度增加 ,肿瘤易感性增高 ,但不属于恶性细胞 。