存活素siRNA表达质粒的构建及其对MCF-7细胞细胞周期和增殖的调控(英文)

背景与目的存活素特异地在肿瘤组织中过表达,许多报道表明抑制它的功能对肿瘤治疗有利。RNA干扰被证明是一项能有效而特异地抑制基因表达的新技术。本研究的目的在于构建存活素基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒,并检测该质粒在乳腺癌细胞中的生物学功能。方法应用含有U6启动子的mU6pro载体构建存活素siRNA质粒,RT-PCR和Westernblot法检测该质粒转染MCF-7细胞后存活素表达的变化,流式细胞仪和MTT法分别检测其对细胞周期和对细胞增殖的影响。结果存活素siRNA质粒明显下调MCF-7细胞中存活素的表达,阻断细胞周期在G1期,显著抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。结论通过RNA干扰,存活素的表达在mRNA和蛋白质水平上被下调。

乳腺癌患者血清蛋白质芯片检测

背景与目的:乳腺癌的早期诊断是取得满意治疗效果的关键,目前临床常用的乳腺癌检查方法有近红外线乳腺扫描,乳腺X线钼靶及数字化摄片、针吸细胞学检查、乳腺穿刺活检、外科手术活检或冰冻切片检查等,但这些方法的检测出来的多数已非早期肿瘤。本研究就是应用蛋白质芯片技术,分析乳腺癌患者与乳腺非癌患者和正常妇女、Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期乳腺癌之间血清蛋白质表达的差异。方法:我们选择IMAC3和WCX2两种芯片,对64例乳腺癌、52例乳腺非癌患者及12名正常妇女血清进行研究。统计学分析采用CiphergenProteinChip3.0和BiomarkWizard软件分析乳腺癌、乳腺非癌患者和正常人血清的蛋白质谱差异。结果:在WCX-2蛋白芯片,分子量为9116Da、8905Da、8749Da、9470Da和9692Da的5个位点,在乳腺癌患者与乳腺非癌患者及正常妇女血清之间WCX-2蛋白峰表达有差异,乳腺癌患者蛋白质峰的表达较乳腺非癌和正常妇女表达高,敏感性为54.7%～92.2%;特异性为53.1%～81.3%;分子量为9405Da和6424Da的2个位点,Ⅰ期乳腺癌与Ⅲ期乳腺癌患者血清蛋白峰表达有差异,敏感性为73.7%～78.9%,特异性为61.9%～71.4%。在IMAC3蛋白芯片,分子量分别为5236Da、7823Da、7464Da、5213Da、5334Da、5063Da、5374Da、7756Da和7623Da有9个位点位置。

MTA1基因在鼻咽癌中表达与肿瘤转移和EB病毒感染的关系

[目的]探讨EB病毒感染对MTA1在鼻咽癌中表达的影响以及MTA1表达对鼻Ⅱ因癌转移的可能作用。[方法]检 测60例不同临床分期鼻咽癌患者血VcA-IgA和DNA酶以及鼻咽癌标本MTA1表达水平。[结果]鼻咽癌患者血中VcA-IgA、 DNA酶的水平高低与MTA1基因表达无相关,其相关系数分别为0.105和0.096。不同性别和T2-T4各级中,MTA1基因表 达无明显差异(P>0.05)。而在不同N分级中,MTA1基因在第Ⅰ期和第Ⅱ期与第Ⅲ和第Ⅳ期之间有明显差异(P<0.05)。 [结论]EB病毒在鼻咽癌中的感染不会诱发或导致MTA1基因表达。MTA1基因表达在鼻咽癌的侵袭中未起作用,其也不是诱 发鼻咽癌转移的原因,但可能在鼻咽癌转移的后期起了一定的协同作用。

乳腺癌血清蛋白质芯片检测在预测乳腺癌预后中的应用

目的通过乳腺癌血清蛋白质芯片检测来分析乳腺癌的预后差异,寻找新的判断预后的指标,以期为临床治疗方案的选择提供有价值的依据。方法采用美国Ciphergen公司生产的蛋白质芯片阅读机,选择IMAC-3和WCX-2两种芯片,对64例乳腺癌患者血清进行研究。64例乳腺癌患者全部随访5年,死亡13例。采用Ciphergen proteinchip3.0软件分析乳腺癌患者血清的蛋白质谱。将13例死亡患者的蛋白质图谱与其余患者的进行比对,差异比较采用t检验,P<0.05为有统计学意义。结果在WCX-2蛋白芯片,有2个位点,相对分子质量(Mr)分别为9405和6424的位置,死亡与生存乳腺癌患者的血清蛋白峰表达有差异,在Mr9405的位置,生存乳腺癌患者低表达;在Mr6424的位置,生存乳腺癌患者高表达,敏感性为76.9%～84.6%,特异性为76.4%～80.3%。在IMAC-3蛋白芯片,发现有2个位点,Mr分别为4643和5910的位置,死亡与生存的乳腺癌患者血清蛋白峰表达有差异,生存乳腺癌患者高表达,敏感性为61.5%～76.9%,特异性为68.6%～74.5%。结论死亡与生存乳腺癌患者血清蛋白峰表达存在差异,有可能成为新的判断乳腺癌预后的指标。