视网膜母细胞瘤SO-RB_(50)瘤细胞NOD-SCID鼠皮下异位移植全身转移瘤模型的建立

目的:建立人视网膜母细胞瘤(RB)的严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficent)小鼠(NOD-SCID鼠)皮下移植模型,并探讨RB转移的发生、分布规律.方法:NOD-SCID小鼠皮下接种人视网膜母细胞SO-RB50细胞,定期观察小鼠的行为及肿瘤的形成、生长、转移.采用HE,免疫组织化学染色方法,对皮下肿瘤原发灶及远处转移灶行病理组织学研究.结果:皮下接种小鼠肿瘤生长的潜伏期为12～19d,成瘤为100%,5只鼠有远处转移灶,发生转移的时间在32d后,时间分布不一,肿瘤转移灶主要分布在腹腔和肾旁,小鼠的异种移植瘤和转移灶组织形态上与人类的RB一致,光镜下细胞胞质少、核深染、可见病理性核分裂,为未分化型.结论:NOD-SCID小鼠的荷瘤人视网膜母细胞瘤模型,成瘤率高,成瘤潜伏期短,较高转移率的特点.

鼻咽癌移植瘤cyclin D1表达与化疗相关性

[目的]通过比较化疗前后裸小鼠CNE-2鼻咽癌移植瘤cyclinD1蛋白表达的变化,评价化疗对cyclinD1蛋白表达的影响。[方法]将荷瘤小鼠随机分成3组:5-Fu组、DDP组和对照组,取肿瘤组织活检后开始化疗。化疗后测体重及肿瘤大小。一周后再次活检。用WesternBlot方法检测活检组织cyclinD1蛋白表达。[结果]两化疗组化疗后肿瘤生长抑制明显,与对照组比较差异显著。随着时间的延长和肿瘤体积的逐渐增大,3组cyclinD1表达均逐渐增强,但两化疗组与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。3组中cyclinD1高、低表达者化疗后肿瘤体积均无显著差异(P>0.05)。[结论]鼻咽癌组织cyclinD1表达高、低不能预测化疗的敏感性;表达程度在化疗前后是稳定的。

癫痫发作过程海马区脑源性神经营养因子及其相关蛋白的变化

目的:探讨脑源性神经营养因子(BDNF)与癫痫发作的关系。方法:将听源性癫痫鼠分成安静期、惊厥前期、惊厥期及惊厥后期4组,用免疫组织化学方法检测在惊厥不同阶段脑内海马区BDNF及相关蛋白,用图像分析仪比较各蛋白的阳性单位(PU)。Wistar大鼠作对照。结果:听源性癫痫鼠安静期BDNF显著低于对照组,受刺激兴奋后的惊厥前期、惊厥期及惊厥后期BDNF增高并略高于对照组;而BDNF受体(trkB)的表达在各阶段均增高,作为trkB激活的标志蛋白磷酸化酪氨酸(PY20)只在受刺激兴奋后的惊厥前期和惊厥期增高;具抑制性作用的神经肽(NPY)在惊厥前均处于低水平。结论:内源性BDNF可能分别通过调控NPY和激活受体trkB两个途径影响听源性癫痫鼠的神经兴奋性。

大鼠脂肪干细胞向肠神经样干细胞转分化的初步实验研究

目的初步探讨应用小分子SB431542、noggin和LDN1931897将大鼠脂肪干细胞(ADSCs)转分化成肠神经样干细胞的可行性,为先天性巨结肠的细胞治疗提供一种新的种子细胞。方法取SD大鼠腹股沟脂肪组织分离培养ADSCs。当ADSCs传代至第3代时,加入小分子SB431542、noggin、LDN1931897以及肠神经培养基进行转分化实验。通过光学显微镜观察细胞形态学变化和应用免疫荧光染色检测其肠神经干细胞特异性标记物表达情况。结果ADSCs在含有3种小分子的肠神经细胞培养基中转分化培养7天后形成神经球样的细胞团。免疫荧光染色法检测发现神经干细胞特异性标记物Nestin呈阳性表达,肠神经干细胞标记物Sox2呈阳性表达。结论小分子SB431542、noggin和LDN1931897可在肠神经培养基中将ADSCs转分化为肠神经样干细胞。ADSCs有可能作为先天性巨结肠干细胞移植的种子细胞来源。

基孔肯雅病毒全基因组的多序列比对及遗传进化分析

目的 了解基孔肯雅病毒（Chikungunya virus,CHIKV）毒株的时间、地区及基因型的分布情况,不同时间和地区分离毒株的相似性,核苷酸位点的变异情况以及病毒的遗传进化趋势,为基孔肯雅热的预防和控制奠定基础。方法 对美国国立生物技术信息中心（NCBI）中收录的CHIKV毒株全基因组序列共133条用DNAStar7.1软件进行核苷酸和氨基酸相似性比较及变异分析,用Mega6.06进行遗传进化分析。结果 CHIKV组内核苷酸序列相似性在97.7%～100.0%之间,CHIKV组内氨基酸序列相似性在80.3%～100.0%之间,组内相似性较高,变异率较低;CHIKV碱基间的转换较为常见占碱基突变的81.02%;分离时间、地区相近的毒株遗传距离较近,不同谱系的东/中/南非型毒株已蔓延至欧亚各地区。结论 CHIKV毒株存在一定的变异,但具有较高的遗传稳定性。

寨卡病毒全基因组多序列比对及遗传进化分析

目的分析寨卡病毒不同毒株分离的时间、地区以及基因型分布,基因序列的相似性,核苷酸的变异及遗传进化趋势,为寨卡的防控提供生物信息学方面的依据。方法应用Bio Edit Sequence Alignmemt Editor软件,DNAStar 7.1及Mega 7.0软件对NCBI-Nucleotide中收录的85条寨卡病毒全基因组核苷酸序列及遗传进化进行分析,探索寨卡的起源及传播过程。结果寨卡病毒组内核苷酸序列最低相似性为94.5%,最高相似性为100%;65株全基因序列中,共有765处碱基发生变异,组内变异率在0.00%~24.44%;在所有的碱基突变中,碱基转换占84.32%,而碱基颠换占15.68%;分离时间、地区相近的菌株,其遗传距离较近。结论寨卡病毒存在较高变异,这些变异可能在寨卡病毒本身的毒力、致病性及传播方式的改变中发挥重要作用。