目的:观察银杏叶提取物(GBE)对糖尿病肾病大鼠核转录因子κB(NFκB)活性、肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素6(IL 6)水平的影响,探讨其对糖尿病肾病的防治作用及其机制。方法:22只W istar大鼠分为正常对照组(A组),糖尿病无干预组(B组),...目的:观察银杏叶提取物(GBE)对糖尿病肾病大鼠核转录因子κB(NFκB)活性、肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素6(IL 6)水平的影响,探讨其对糖尿病肾病的防治作用及其机制。方法:22只W istar大鼠分为正常对照组(A组),糖尿病无干预组(B组),GBE干预组(C组)。以一次性腹腔注射链脲佐菌素60 m g/kg制备糖尿病大鼠模型。12周后取肾组织进行病理学观察,以电泳迁移率变动分析法检测肾组织NFκB活性,放射免疫法测定血清TNFα和IL 6水平。结果:B、C组大鼠饲养过程中各死亡2只,存活大鼠空腹血糖>13.9 mm o l/L,模型制作成功。B组肾小球基底膜厚度、肾小球内细胞数和单个核细胞数显著多于A组,C组显著少于B组而多于A组(P均<0.05)。与A组比较,B组肾组织NFκB活性、TNFα和IL 6水平均显著升高,C组也有升高但明显低于B组(P均<0.05)。TNFα、IL 6水平与NFκB活性呈正相关(r1=0.83,r2=0.78;P均<0.05)。结论:银杏叶提取物可以通过抑制肾组织中NFκB的活化、减轻过度的炎症反应而延缓糖尿病肾病的发生、发展。展开更多
目的探讨以包涵体形式表达的抗鼻咽癌单克隆抗体(mAb)BAC5的单链抗体(BAC5-scFv)的纯化、复性方法,并对其活性进行检测。方法扩增pET-22b-scFv质粒转化的大肠杆菌BL21(DE3)菌株,培养、破菌后,分离和变性包涵体,用Ni-NTA His Bind层析柱...目的探讨以包涵体形式表达的抗鼻咽癌单克隆抗体(mAb)BAC5的单链抗体(BAC5-scFv)的纯化、复性方法,并对其活性进行检测。方法扩增pET-22b-scFv质粒转化的大肠杆菌BL21(DE3)菌株,培养、破菌后,分离和变性包涵体,用Ni-NTA His Bind层析柱纯化变性的scFv。经稀释、透析及尿素梯度凝胶层析柱3种方法进行复性。用细胞免疫组化染色和蛋白印迹法(Western blot),鉴定复性后的BAC5-scFv的免疫活性。结果Ni-NTA His Bind亲和层析柱能有效纯化变性的scFv。以尿素梯度凝胶层析柱复性的蛋白回收率最高。免疫细胞化学染色法检测及Western blot分析证实,复性后的BAC5-scFv可与CNE2细胞上的抗原特异性结合。结论以包涵体形式表达的BAC5-scFv经变性、纯化及复性后,获得良好的免疫活性,为大量制备具有活性的BAC5-scFv,并用于鼻咽癌的放射免疫显像和治疗研究奠定了基础。展开更多
文摘目的:观察银杏叶提取物(GBE)对糖尿病肾病大鼠核转录因子κB(NFκB)活性、肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素6(IL 6)水平的影响,探讨其对糖尿病肾病的防治作用及其机制。方法:22只W istar大鼠分为正常对照组(A组),糖尿病无干预组(B组),GBE干预组(C组)。以一次性腹腔注射链脲佐菌素60 m g/kg制备糖尿病大鼠模型。12周后取肾组织进行病理学观察,以电泳迁移率变动分析法检测肾组织NFκB活性,放射免疫法测定血清TNFα和IL 6水平。结果:B、C组大鼠饲养过程中各死亡2只,存活大鼠空腹血糖>13.9 mm o l/L,模型制作成功。B组肾小球基底膜厚度、肾小球内细胞数和单个核细胞数显著多于A组,C组显著少于B组而多于A组(P均<0.05)。与A组比较,B组肾组织NFκB活性、TNFα和IL 6水平均显著升高,C组也有升高但明显低于B组(P均<0.05)。TNFα、IL 6水平与NFκB活性呈正相关(r1=0.83,r2=0.78;P均<0.05)。结论:银杏叶提取物可以通过抑制肾组织中NFκB的活化、减轻过度的炎症反应而延缓糖尿病肾病的发生、发展。
文摘目的探讨以包涵体形式表达的抗鼻咽癌单克隆抗体(mAb)BAC5的单链抗体(BAC5-scFv)的纯化、复性方法,并对其活性进行检测。方法扩增pET-22b-scFv质粒转化的大肠杆菌BL21(DE3)菌株,培养、破菌后,分离和变性包涵体,用Ni-NTA His Bind层析柱纯化变性的scFv。经稀释、透析及尿素梯度凝胶层析柱3种方法进行复性。用细胞免疫组化染色和蛋白印迹法(Western blot),鉴定复性后的BAC5-scFv的免疫活性。结果Ni-NTA His Bind亲和层析柱能有效纯化变性的scFv。以尿素梯度凝胶层析柱复性的蛋白回收率最高。免疫细胞化学染色法检测及Western blot分析证实,复性后的BAC5-scFv可与CNE2细胞上的抗原特异性结合。结论以包涵体形式表达的BAC5-scFv经变性、纯化及复性后,获得良好的免疫活性,为大量制备具有活性的BAC5-scFv,并用于鼻咽癌的放射免疫显像和治疗研究奠定了基础。
