胶原酶对大鼠脊神经背根神经节损伤的病理学研究

【目的】通过病理学方法研究胶原酶对大鼠脊神经背根神经节的损伤情况。【方法】57只健康的Sprague-Dawley雄性大鼠分为正常对照组;急性胶原酶手术组、亚急性胶原酶手术组和慢性胶原酶手术组;急性生理盐水手术组、亚急性生理盐水手术组和慢性生理盐水手术组。暴露大鼠左侧腰5背根神经节,并在各胶原酶手术组局部滴注胶原酶1mL(300U),各生理盐水手术组局部滴注生理盐水1mL。分别于注药后1h、1周、30d处死动物并取包含背根神经节的一段神经做病理学检测。【结果】光镜下各组背根神经节的细胞数、胞膜、胞浆、胞核形态和细胞间神经纤维、血管相比较均无明显变化和差别。透射电镜下各组背根神经节的细胞数、细胞大体形态、胞膜和节内神经纤维相比较均无明显变化和差别,但胶原酶手术组背根神经节细胞胞内细胞器超微结构与正常对照组和相应生理盐水手术组比较有差别,表现为核仁部分偏向一侧、线粒体大量肿胀,部分嵴断裂和空泡形成。光镜病理和透射电镜均未见节细胞成群细胞坏死、细胞膜早期破裂和凋亡小体形成。【结论】临床应用的胶原酶化学髓核溶解术的胶原酶治疗浓度对大鼠脊神经背根神经节细胞有损伤作用。在临床工作中一定要慎重使用胶原酶的用药剂量和浓度,才能提高胶原酶应用的安全性。

Kikuchi淋巴结炎60例病理形态变化规律及鉴别诊断

目的 探讨Kikuchi淋巴结炎病理形态变化规律及与非霍奇金淋巴瘤 (包括NK T细胞淋巴瘤 )、不典型分枝杆菌结核、猫抓病鉴别的诊断。方法 应用组织病理学、免疫组化、结核杆菌DNA、巢式聚合酶链反应 (N PCR)技术观察 6 0例Kikuchi淋巴结炎活检标本的病理形态学特征。结果 Kikuchi淋巴结炎 95 %的病例同时可见增生(PT)、坏死 (NT)及黄色瘤 (XT) 3型改变 ,其中PT为主占 5 6 % ,NT占 39% ,XT占 5 % ;受损区域可见到组织细胞、巨噬细胞、浆样单核细胞、免疫母细胞、小淋巴细胞 5种类型细胞 ;组织细胞每例可见 ,常共同表达CD6 8、MAC387及髓过氧化物酶 (MPO) 3种抗原 ;PT期抗体Ki 6 7强 (+) ,NT灶内细胞FAS(+) ;PCR检测发现 10 6 0 (16 7% )结核杆菌阳性 ,在 10例阳性中仅有 6例抗BCG(antimycobacteriumbovis) (+)。结论 Kikuchi淋巴结炎病变特征复杂 ,以组织细胞为主体的多细胞组成 ,以凋亡坏死为主 ,存在PT→NT→XT病变发展规律 ;

硬化性上皮样纤维肉瘤临床病理特点及其诊断

目的探讨硬化性上皮样纤维肉瘤(sclerosing epithelioid fibrosarcoma,SEF)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法对1例SEF进行组织学观察和免疫组化标记,同时复习相关文献。结果SEF主要以上皮样细胞伴大量胶原纤维为特征,瘤细胞胞质透亮,似上皮细胞,排列呈条索状,间质中大量胶原纤维发生透明变性,形成硬化性基质。肿瘤细胞vimentin阳性,cytokeratin和actin阴性。结论SEF是一种较为罕见的软组织肿瘤,应注意与一些具有上皮样形态和硬化性间质的肿瘤相鉴别。

VEGF蛋白检测对预测鼻咽癌远处转移风险的价值

背景与目的:血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)是最重要的血管生长促进因子,并与多种肿瘤的恶性度及转移关系密切。本研究旨在通过同时检测鼻咽癌组织及血浆中的VEGF蛋白,评价其对预测鼻咽癌远处转移风险的价值。方法:同时收集59例鼻咽癌患者治疗前鼻咽癌组织及血清标本,用免疫组化LSAB法检测鼻咽癌组织中的VEGF蛋白,用ELISA法检测血清中的VEGF蛋白;并随访了解患者的远处转移情况,分析VEGF蛋白水平与患者远处转移的关系。结果:鼻咽癌组织及血清中的VEGF蛋白水平与远处转移均成正相关(均P<0.05)。鼻咽癌组织中VEGF蛋白表达阴性(-)、弱阳性(+)、阳性(++)和强阳性(+++)组患者的3年无转移生存率分别为100%、95.24%、65.19%、58.93%,各组之间有显著性差异(P=0.0193)。血清VEGF蛋白水平<466.78ng/L和≥466.78ng/L组的3年无转移生存率分别为82.57%,59.11%,两组比较有显著性差异(P=0.0211)。多因素分析发现鼻咽癌组织及血清VEGF蛋白水平对鼻咽癌远处转移都是独立的影响因素。结论:鼻咽癌组织及血清中VEGF蛋白检测均可用于判断鼻咽癌患者远处转移风险,二者联合检测可提高预测患者出现远处转移的能力。

不同类型淋巴瘤中survivin和bcl-2的表达及意义

目的 探讨检测抗凋亡基因survivin和bcl- 2在不同类型淋巴瘤的表达及对淋巴瘤诊断和分型的意义。方法 石蜡标本制作组织芯片,应用免疫组化S P法检测219例淋巴瘤及13例反应性增生淋巴结石蜡标本中survivin和bcl 2表达;同时应用RT PCR技术检测18例淋巴瘤、2例淋巴结反应性增生survivin和bcl- 2mRNA表达,并进行半定量分析。结果 survivin在弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuselargeBcelllymphoma,DLBL) (88. 6%, 70 /79)、淋巴母细胞淋巴瘤(lymphoblasticlymphoma,LBL) (92 3%, 12 /13)、伯基特淋巴瘤(Burkitt slymphoma,BL) (2 /2)有较高的表达;而在滤泡性淋巴瘤(follicularlymphoma,FL)、黏膜相关淋巴组织边缘区B细胞淋巴瘤(extranodalmarginalzoneB celllymphomaofmucosa associatedlymphoidtissuelymphoma,MALTL)和淋巴结边缘区B细胞淋巴瘤(marginalzonelymphoma,MZL)中表达较低,且多为弱阳性。高表达组与低表达组之间差异有统计学意义(P<0. 01 )。bcl- 2在小淋巴细胞淋巴瘤(smalllymphocyticlymphoma,SLL)、套细胞淋巴瘤(mantlecelllymphoma,MCL)、外周T细胞淋巴瘤(peripheralTcelllymphoma,PTL)、间变性淋巴瘤(anaplasticlargecelllympho ma,ALCL)、DLBL和FL有较高的表达。

四逆汤对大鼠肠缺血再灌注后肠粘膜细胞凋亡的影响及神经酰胺机制

目的 研究四逆汤(SND)对大鼠肠缺血再灌注 (II/R后肠粘膜细胞凋亡的影响,并从神经酰胺信使通路探讨其抗凋亡机制。方法 24只SD大鼠随机分为 3组(n=8):对照组(仅分离不阻断肠系膜上动脉)、模型组 (阻断肠系膜上动脉 1h后再灌注 3h)、SND组(每天 3g·kg-1 SND灌胃,连续 3天后手术)。取回肠末端组织行电镜检查;检测肠粘膜组织SOD活性、MDA及神经酰胺含量的变化,TUNEL法检测肠粘膜上皮细胞的凋亡指数,RT PCR法分析肠粘膜组织鞘磷脂酶(SMase)基因表达的变化。结果 模型组电镜下可发现许多典型凋亡的上皮细胞,凋亡指数达 30 82%6 34%,SND预处理后凋亡指数为 14 91%±5 40%,明显低于模型组(P<0 01);模型组SOD活性明显低于对照组 (<0 01),MDA与神经酰胺含量以及SMase的基因表达明显高于对照组(P<0 01),且神经酰胺含量与凋亡指数具有良好的正相关 (r=0 852,P<0 01),与SOD活性具有负相关(r= -0 775,P<0 01 )。SND预处理能明显增强SOD活性,降低肠粘膜组织MDA及神经酰胺含量,减少肠粘膜组织SMase的基因表达(P<0 01)。SND组凋亡指数与神经酰胺的含量亦呈显著的正相关 (r=0 832,P<0 01 )。结论 SND具有抗II/R后肠粘膜细胞凋亡的作用,其作用与它清楚氧自由基、抑制SMase的基因表达、减少神经酰胺的生成有关。

CK19和甲状腺过氧化物酶表达在甲状腺疾病诊断中的作用

目的探讨CK19和甲状腺过氧化物酶(TPO)在甲状腺癌和良性甲状腺病变中的表达情况,以提高甲状腺癌的诊断和鉴别诊断水平。方法应用SP免疫组织化学法检测了62例甲状腺癌(30例典型乳头状癌、22例滤泡型乳头状癌和10例滤泡型癌)和44例良性甲状腺病变(22例结节性甲状腺肿、14例甲状腺腺瘤和8例桥本氏甲状腺炎)中CK19和TPO的表达。结果CK19在甲状腺癌中表达率为96.8%,在良性甲状腺病变中极少表达或小灶性弱表达,表达率为4.5%,两者有显著性差异(P<0.01);TPO在良性甲状腺病变中的表达率为100%,在甲状腺癌中极少表达或小灶性表达,表达率为3.2%,两者有显著性差异(P<0.01)。结论CK19和TPO在甲状腺癌的病理诊断和鉴别诊断中具有重要意义和临床实用价值。

不同类型淋巴瘤Survivin的表达及其意义

背景与目的:淋巴瘤的诊断与分型是临床病理诊断的难点。本研究检测抗凋亡基因survivin在不同类型淋巴瘤中的表达,并探讨其对淋巴瘤分型的意义。方法:用免疫组化法检测83例淋巴瘤、5例淋巴结反应性增生石蜡标本中survivin蛋白的表达;同时用RT-PCR检测K562、HL-60、Raji、Jurkat细胞系和以上病例中18例淋巴瘤及2例淋巴结反应性增生新鲜标本中survivinmRNA的表达;对不同类型的淋巴瘤survivin蛋白及mRNA表达进行半定量分析。结果:Survivin蛋白在非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkinslymphoma,NHL)的DLBL(diffuselargeBcelllymphoma)、BL(Burkittlymphoma)、LBL(lymphoblasticlymphoma)中有较高的表达,分别为87.2%(34/39)、100%(2/2)、85.7%(6/7),而在FL(follicularlymphoma)、MALT(extranodalmarginalzoneB-celllymphomaofmucosa-associatedlymphoidtissue)和MZL(marginalzonelymphoma)中表达较低,分别为22.2%、33.3%和40.0%,且多为弱阳性。高表达组(DLBL、BL、LBL)与低表达组(FL、MZL、MALT)之间差异有统计学意义(P<0.01)。并且DLBL中survivin阳性者中位年龄为57岁,明显高于阴性者41岁。霍奇金淋巴瘤(Hodgkinslymphoma,HL)中大部分R-S(Reed-Sternberg)细胞表达survivin蛋白。

非霍奇金淋巴瘤中survivin、bcl-2、bax、p53表达及其与细胞增殖和凋亡的关系

目的研究非霍奇金淋巴瘤(non-Hndgkin’s lymphoma,NHL)中survivin、bcl-2、bax和p53指标表达的情况,比较它们在B-NHL和T-NHL中的差异,探讨它们在临床病理实践中的应用价值。方法应用免疫组化、原位凋亡检测及组织芯片技术对190例NHL进行检测。结果①survivin、bcl-2、bax、p53在75例B-NHL中表达的总阳性率分别为70·67%、57·33%、46·67%和36·00%,在115例T-NHL中表达的总阳性率分别为81·74%、44·35%、46·09%和40·00%,其中bcl-2表达在B-NHL和T-NHL之间差异有显著性(P=0·045);②随着B-NHL生物侵袭性的增强,survivin表达率和表达强度升高(P=0·001),bcl-2表达率和表达强度下降(P=0·018);③在低中度侵袭组中,随着NHL生物侵袭性的增强,突变型p53表达率升高;在高侵袭组中p53的表达率反而降低;④随着NHL生物侵袭性的增强,Ki-67表达升高(P=0·014和P=0·002)。结论①survivin是判断NHL恶性及侵袭性有意义的指标,联合检测survivin和bcl-2蛋白的表达情况对判断B-NHL的侵袭性可能有互补作用;②p53表达可用于评价低中度侵袭性NHL的生物学行为;③Ki-67蛋白表达强度是评估NHL肿瘤细胞增殖的良好指标,它对NHL侵袭性的分级具有较为重要的参考价值。

原发与继发性胶质母细胞瘤中survivin表达及其意义

目的探讨survivin蛋白在原发与继发性胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中的表达及其临床病理学意义。方法分别应用免疫组化和TUNEL方法,检测56例GBM(30例原发和26例继发)中survivin的表达和细胞凋亡情况,比较survivin在原发与继发性GBM中的表达差异;分析survivin表达与GBM临床病理学参数之间的相关性。结果56例GBM中,原发GBM中83%(25/30例)呈survivin阳性,继发性GBM中仅46%(12/26例)呈阳性,二者差异有显著性(P<0.01)。在15例配对的继发性GBM与其初发的低级别胶质瘤中,survivin的表达基本一致,7例survivin阳性表达的继发性GBM,其对应的7例低级别胶质瘤中,有6例同时出现survivin阳性;而且多数(4/5例)由间变性胶质瘤(III级)发展而成的继发性GBM出现了survivin的阳性表达,其阳性率明显高于由Ⅱ级胶质瘤演变而成的继发性GBM(3/10例)。另外,大多数(80%)瘤体直径>5cm的GBM呈survivin阳性,并多表现为低的细胞凋亡指数。结论Survivin的阳性表达可能通过其抗凋亡效应,在绝大多数原发性GBM的发生、发展中起了十分重要的作用,但可能只涉及部分继发性GBM的恶性演变;在继发性GBM发生、发展中,survivin阳性表达可能与其初发胶质瘤的病理级别有关。

RNA干扰致基因表达沉默细胞模型的建立

目的探讨siRNA和shRNA在基因功能研究中的应用。方法用化学方法合成siRNA,以及用常规的分子克隆方法构建shRNA表达载体。以人类K562细胞为实验对象,采用lipofectamine将MDM2基因的siRNA和shRAN表达载体导入细胞后,用多重RT鄄PCR和Westernblot检测目标基因MDM2的表达水平。结果K562细胞瞬时转染MDM2siRNA48h后,MDM2蛋白质表达下降超过60%;稳定转染shRNA表达载体后,MDM2基因在mRNA和蛋白质表达水平下降超过70%。实验结果表明成功地建立了MDM2表达下调的实验细胞模型。结论siRNA和shRNA都能有效地导致目标基因表达沉默,在基因功能研究中瞬时转染和稳定转染需要配合使用以获得更理想的实验结果。

STAT3在鼻咽癌中的表达特征及其与bcl-2和LMP1表达的关系

目的:探讨鼻咽癌中信号传导和转录激活子3(STAT3)的表达特征及其与bcl-2和EB病毒潜在膜蛋白1(LMP1)表达的关系.方法:采用原位杂交和免疫组化法分别检测62例鼻咽癌组织中EB病毒EBER1的表达和STAT3、bcl-2和LMP1蛋白的表达.结果:鼻咽癌中EBER1阳性率为100.0%(62/62);LMP1阳性率为61.3%(38/62);STAT3和bcl-2阳性癌细胞占癌细胞总数的百分率跨度分别为5.0%～95.0%和0～100.0%.STAT3与bcl-2表达呈正相关,rs=0.444,P=0.000.STAT3与LMP1表达无显著相关性.结论:鼻咽癌细胞中STAT3呈持续表达状态(即异常激活状态).STAT3的异常激活可能通过上调bcl-2这一抗凋亡基因的表达,从而延长了鼻咽癌细胞的生存时间.

热休克蛋白与肿瘤免疫

热休克蛋白作为免疫佐剂和抗原肽载体参与机体抗肿瘤免疫 ,热休克蛋白 肽复合物可以通过多条抗原递呈途径激活特异性CD8+ CTL ,这一过程同时还伴有其他免疫细胞或分子的协同参与 ,从而通过多种机制共同发挥抗肿瘤免疫作用。热休克蛋白 肽复合物抗肿瘤疫苗已证实具有良好的应用前景。

鼻咽癌中LMP1与E—钙粘素／β—链接素表达的关系

目的：比较鼻咽癌原发瘤与转移瘤中（LMP1和E－钙粘素／β－链接素的表达，探讨LMP1的表达与E－钙粘素／β－链接素表达之间的关系。方法：收集22例鼻咽癌原发瘤及颈部淋巴结转移瘤的配对活检组织标本，采用免疫组化LSAB法检测LMP1、E－钙粘素、β－链接素的表达。结果：22例转移瘤LMP1的表达率（86．36％）高于原发瘤（68．18％），P＜0．05。而转移瘤中E－钙粘素和β－链接素的平均表达百分率（分别为50．11％±22．53％和66．36±21．05％）低于原发瘤（分别为71．52％±24．34±和79．40±±15．05％），P＜0．05。无论是在原发瘤或转移瘤中，E－钙粘素和β－链接素的表达率之间均呈正相关。结论：鼻咽癌转移瘤细胞较原发瘤更易表达LMP1，而转移瘤细胞E－钙粘素／β－链接素的平均表达率却较原发瘤为低。因此，LMP1可能具有下调E－钙粘素／β－链接素表达的功能，从而增强鼻咽癌细胞的侵袭性。

运用先进自动化设备打造形态学组织制片新领域

运用自动化的仪器设备制作组织切片标本,能体现“高起点、高水平、高速度”的三高要求。而且还突破了传统人工操作制片的局限性;减轻了劳动力,提高了制片的质量和效率,为形态学实验教学改革奠定坚实基础。

羊膜带综合征并发肢体-体腔壁综合畸形尸检及文献复习

目的探讨羊膜带综合征(amnioticbandsyndrome,ABS)的发病机制、临床病理特点与诊断。方法对1例在孕26周经超声检查被诊断为ABS的胎儿病例进行尸检,结合文献讨论其发病机制、临床病理特点及诊断方法。结果本例主要表现为唇裂、腭裂、腹裂、肢体缺陷、脑积水、室间隔肌部缺损、脐带过短等畸形。结论ABS的发病机制存在争议,临床特点呈多样性,肢体-体腔壁综合畸形是其中的严重类型。产科超声检查是诊断胎儿ABS的有效方法。