基于蛋白质组学研究红花黄色素抗阿尔茨海默病的作用机制

目的研究发现红花黄色素(Safflower yellow,SY)对多种AD模型具有神经保护作用,但红花黄色素治疗AD的有效靶点和潜在分子机制尚不清楚。因此,通过建立Aβ1-42诱导的AD模型大鼠并给予SY治疗,探究SY抗AD的作用机制。方法Morris水迷宫实验观察SY对AD模型大鼠学习记忆缺失的改善作用;Golgi染色明确SY对AD模型大鼠脑组织海马区树突棘形态的影响;定量蛋白质组方法用于鉴定和量化各组大鼠海马中的蛋白质并通过生物信息学分析差异表达蛋白。结果SY能显著提高AD模型大鼠的学习记忆能力,改善树突棘的形态学损伤。蛋白质组学分析结果显示,Mvd、Map6d1和Rpl34作为两个比较组的3种重要的差异蛋白,与AD的发病机制密切相关,Western Blot的结果与蛋白质组学分析结果一致。结论(1)“核糖体”和“补体和凝血级联反应”可能参与了Aβ1-42诱导的神经损伤;(2)Rpl34,Mvd和Map6d1可能是SY抗AD的的关键分子靶标;(3)SY可能通过影响“ECM-受体相互作用”而发挥神经保护作用。

银杏黄酮抑制Aβ_(1-42)聚集和纤维形成的分子机制

目的:探讨EGb761中银杏黄酮、银杏内酯抑制Aβ聚集和纤维形成药物作用的分子机制。方法:用园二色谱(CD)和傅里叶变换红外光谱法(FT-IR)曲线拟合定量分析和特征频谱分析Aβ老化后和银杏黄酮、银杏内酯分别干预后二级结构的变化。结果:通过1700～1600cm-1之间的酰胺Ⅰ带和曲线拟合分析,Aβ1-42单独孵育30min到72h,β-折叠片增加了18.50,与银杏黄酮、银杏内酯孵育72h,β-折叠片的含量下降了50.95,36.09,β-转角的含量升高56.56,46.56。呈现出明显的β折叠片向β-转角的转化。基团特征峰谱位显示,酮类和烷烃类的-CH2和-CH参与了Aβ1-42的分子变构。结论:EGb761中银杏黄酮可能是通过抑制Aβ1-42β-折叠形成,Aβ1-42肽侧链基团发生了化学修饰达到抑制Aβ聚集和纤维形成作用。

FT-IR光谱法研究TA9902抑制Aβ_(1-42)聚集的分子机制

目的:研究TA9902引起Aβ1-42二级结构变化,了解其抑制Aβ聚集和纤维形成的机制。方法:用傅里叶变换红外光谱法(FT-IR)曲线拟合定量分析和特征频谱分析Aβ老化后及TA9902干预后二级结构的变化。结果:1700-1600cm-1之间的酰胺I带分析,Aβ1-42单独孵育30min时,β-折叠片为46.53%;Aβ1-42老化72h,β-折叠片为65.13%,β-折叠片增加了19.4%。TA9902与Aβ1-42作用β-折叠片为29.04%;与Aβ1-42老化72h相比,TA9902的存在明显减少β折叠片的含量(下降了36.09%),β-转角的含量明显升高(升高57.56%),α-螺旋也略有升高(2.93%)。呈现出明显的β折叠片向β-转角的转化。其它基团特征峰位显示,TA9902中有酮类尤其是饱和链状酮或α-二酮和烷烃类的-CH2和-CH参与了Aβ1-42的分子变构。结论:TA9902明显抑制Aβ1-42β-折叠的形成,同时也使Aβ1-42肽的侧链基团发生了化学修饰,提示Aβ的聚集和纤维形成与其分子β-折叠的形成和侧链基团发生了化学修饰有关。

银杏叶中单体活性成分抑制Aβ_(1-42)聚集和纤维的形成

目的:研究银杏叶提取物中单体活性成分银杏黄酮及银杏内酯对Aβ聚集和纤维形成的影响。方法:运用硫磺素-T荧光分析和透射电镜,通过体外孵育方式观察银杏黄酮、银杏内酯干预Aβ1-42聚集和纤维形成作用。结果:银杏黄酮能明显抑制Aβ1-42的聚集和纤维形成;对老化Aβ纤维亦有明显抑制作用。在电镜下银杏黄酮可使Aβ1-42聚集少,无明显Aβ纤维形成。结论:提示银杏黄酮比银杏内酯具有更强抑制Aβ的聚集和纤维形成的作用,可能是银杏叶提取物中抑制Aβ的聚集的主要活性成分。