大鼠急性心肌缺血后心肌NF-kB的检测及其法医学意义

目的检测大鼠急性心肌缺血后核因子-kB(NF-kB)在心肌组织内的变化,探讨其在心肌早期缺血死后诊断中的法医学意义。方法30只大鼠随机分为正常对照,缺血0.5h,1h,2h,4h,8h共6组,每组5只建立大鼠急性心肌缺血模型,用免疫组化染色技术(S-P法),观察不同时间缺血心肌中NF-kB阳性着色,并应用图像分析系统进行定量分析。结果大鼠心肌缺血30m in,心肌细胞核出现散在NF-kB阳性染色;缺血60m in,心肌阳性染色细胞核增多;4h达高峰;8h组开始下降;免疫组化染色定量检则的阳性单位:缺血2h、4h、8h分别为20.042±1.084、22.028±3.452和20.524±1.595;正常对照组未见核阳性反应。结论大鼠心肌缺血8h内,心肌细胞核NF-kB阳性染色呈现一定规律性变化,对早期急性心肌缺血的死后诊断具有法医学意义。

谈远程病理教学及其技术应用

远程病理教学是利用计算机技术、远程通讯技术进行病理会诊、病理学教育及学术交流等的远程医学活动。远程病理教学的对象是基层单位，也适合高层次的业务交流。所需的素材有文字资料、图像、图形、视频、音频等。数据传输包括同步传输和异步传输。分章分析了远程病理教学的这些技术要素及应用特点，并就远程病理会诊的医学责任和应用前景提出了自己的见解。

子宫内膜增生的病理学诊断研究进展

多年来，由于对子宫内膜增生的分类及命名不统一。给临床工作带来很大的困扰。病理诊断直接影响治疗方案的选择，这不仅要求病理医生提供准确、重复性高的诊断，而且临床医生和病理医生对所用的概念要达成共识，以利于进一步治疗。

远程病理会诊的传输技术

远程病理是一项通讯医疗服务,集文字、图像、声音于一体,迅速地将病人资料传送至远方,利用远方的技术力量帮助自己完成诊疗过程.对病理数据的同步传输及非同步传输技术的特点进行了详细的分析.

四逆汤对阿霉素性心衰大鼠心肌线粒体功能的影响

目的探讨四逆汤对阿霉素(ADR)诱导的心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体的保护机制。方法SD大鼠随机分为对照组,心衰组和四逆汤组,心衰组和四逆汤组尾静脉注射ADR复制心衰模型,四逆汤组给予四逆汤煎剂灌胃(3.75g生药/kg/d),3周后测定大鼠心功能,线粒体丙二醛(MDA)含量,MnSOD活性,肿胀程度及Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶活力,RTPCR法检测MnSODmRNA表达。结果四逆汤组可以显著改善心衰大鼠心功能,提高MnSOD的活性及其mRNA表达,减少心肌细胞线粒体MDA的含量及肿胀程度,提高ATP酶活力。结论阿霉素性心力衰竭心肌细胞线粒体存在明显的氧化应激反应,四逆汤可以通过减轻氧化损伤,改善线粒体功能,保护心肌组织。

瘢痕性喉狭窄瘢痕组织中弹性纤维和胶原纤维分析

【目的】了解喉狭窄瘢痕组织中弹性纤维,Ⅰ型/Ⅲ型胶原纤维的含量和形态特征。【方法】喉部分切除术后瘢痕性喉狭窄13例患者的喉瘢痕组织为实验组及15例正常声带组织为对照组,分别进行苏木精鄄伊红染色,胶原纤维、弹性纤维复合染色,及Ⅰ、Ⅲ型胶原苦味酸鄄鄄天狼猩红染色,全自动图像分析系统下观察和计算。【结果】喉狭窄瘢痕组织中,细胞外基质排列紊乱,胶原纤维增多,弹性纤维含量(0.178±0.066)较正常声带中弹性纤维含量(0.374±0.055)明显减少(P<0.001);喉狭窄瘢痕组织Ⅰ型胶原的含量(0.382±0.199)较正常声带中Ⅰ型胶原含量(0.147±0.073)增加明显(P<0.05);喉狭窄瘢痕组织Ⅰ型/Ⅲ型比值(3.98±0.88)较正常声带组织(1.01±0.37)大(P<0.001)。【结论】弹性纤维及Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维形态特征和含量改变可能是导致喉部分切除术后瘢痕性喉狭窄的病理基础。

根据mRNA稳定性推断死亡时间的研究

目的检测大鼠肺、胸肌β肌动蛋白(β-actin)mRNA在死后不同时间的表达,为死亡时间的推断寻找新的指标。方法大鼠断颈处死后于21℃温度控制系统模拟死后改变,在不同时间点抽提相应组织总RNA,利用RT-PCR技术检测β-actinmRNA的表达水平变化并对扩增产物进行半定量分析。结果大鼠肺β-actinmRNA于死后12d仍可检出,胸肌在死后8d的检测呈阴性。β-actinmRNA在肺脏和胸肌的稳定性呈现器官差异性和时间差异性。结论观察死后肺、胸肌β-actinmRNA的变化,可为死亡时间推断提供客观依据。

四逆汤有效部位抗心肌缺血-再灌注损伤作用

目的 考察四逆汤有效部位抗心肌缺血-再灌注损伤的作用。方法 实验动物随机分为正常组、模型组、四逆汤组、四逆汤有效部位组。大鼠心脏进行Langendorff灌流，通过控制灌流液流量建立心肌缺血-再灌注损伤模型，用药组在灌流液中加入相应药液，测定再灌注后50rain的冠脉流量、心肌收缩力和再灌注1min内心律失常发生率。小鼠ig给药3d后ip垂体后叶素（20U／kg）造模，记录0～8min的心电图，并取心肌测SOD活性、MDA及LA水平。结果 四逆汤和四逆汤有效部位均可不同程度地提高大鼠心肌缺血再灌注损伤心肌收缩力恢复率、降低再灌注1min心律失常发生率，四逆汤有效部位对心肌收缩力的恢复作用较好，四逆汤对心律失常发生的抑制较好；四逆汤和四逆汤有效部位均可明显地降低小鼠心肌缺血-再灌注损伤过程中的心电图J点抬高，明显提高心肌组织SOD活性，降低MDA和LA水平，四逆汤和四逆汤有效部位作用无明显差异。结论 四逆汤有效部位可以显著地改善心肌缺血-再灌注损伤过程中的氧化损伤和抑制无氧酵解，改善心肌收缩功能和心律失常。

邓氏通冠胶囊改善缺血心肌供血的时效量效关系及NO机制研究

【目的】观察邓氏通冠胶囊改善心肌缺血的时效、量效关系及其NO机制。【方法】时效实验中,昆明种小鼠随机分为6组,即正常对照组、模型组、4个通冠胶囊组(中药组,分别用药1、3、5、7 d,剂量为0.5 g/kg);量效实验中,小鼠随机分为正常对照组、模型组、4个通冠胶囊组(中药组,剂量分别为0.25、0.5、1、2 g/kg);除正常对照组外,其他组均采用腹腔注射垂体后叶素(Pit,30 U/kg)复制心肌缺血模型,测量60 min内心电图T波变化,采用酶法测定小鼠血浆NO含量以确定最佳有效剂量和用药时间;采用免疫组化法测定小鼠心肌一氧化氮合酶(eNOS)活性,采用逆转录聚合酶链反应检测小鼠心肌eNOS基因表达。【结果】在用药3 d后即达到改善心肌缺血的最佳疗效,有效剂量为0.5 g/kg。通冠胶囊能显著性升高心肌缺血小鼠的血浆NO含量与心肌细胞内的eNOS活性,提高缺血心肌eNOS mRNA的表达(均P<0.05)。【结论】邓氏通冠胶囊可能是通过提高eNOS基因的表达,增强eNOS的活性,从而升高NO水平而达到改善缺血心肌供血作用的。

胃热证动物模型的建立

目的用SD大鼠建立模拟人胃热证临床症状的实验动物模型,为进一步揭示胃热证内在的生理病理机制研究服务。方法先建立一个较为客观的评定指标,在相对恒定的实验室条件下,用干姜水煎剂作为造模工具药给大鼠灌胃造模,2周后观察其症状体征的变化,组织学检查及生化指标检测,并用“胃热清胶囊”作以药测证的实验研究。结果2周后造模大鼠可见口渴喜饮、舌红等胃热证主要症状体征,胃粘膜弥漫性充血,胃粘膜TXB2、6-keto-PGI2显著上升,符合胃热证动物模型的评定标准;造模大鼠灌服胃热清胶囊后,其胃热证的体征、组织学检查等均有显著效益。结论在符合要求的实验室条件下,对大鼠灌服干姜水煎剂能较成功地建立模拟人胃热证临床症状的大鼠模型。

蛋白质降解与死亡时间推断的初步研究

目的观察大鼠肝脏肌动蛋白、微管蛋白在死后不同时间的降解情况,为死亡时间的推断寻找客观依据。方法大鼠麻醉致死后置于21℃温度控制系统模拟死后18d的改变,在不同时间点剪取肝脏组织抽提蛋白质,利用westernblot技术检测肌动蛋白、微管蛋白的降解变化并对产物进行半定量分析。结果大鼠肝脏肌动蛋白在死后8d尚可检测,死亡10d后检测不到;在死后2d,α微管蛋白已检测不到,但可检测到β微管蛋白,死亡4d后,β微管蛋白也检测不到。结论肌动蛋白、微管蛋白的死后降解存在差异,其在肝脏组织保存时间的不同可作为死亡时间推断的参数。

血清IgE在药物过敏性休克死亡鉴定中的价值

目的 探讨血清IgE在药物过敏性休克死亡鉴定中的应用价值。方法 采用MEIA法，对17例明确鉴定为药物过敏性休克死亡者(休克组)和16例交通事故死亡者(对照组)的心血进行IgE检测，并对2组IgE检测结果进行统计学分析。结果 休克组IgE水平为(622.49±594.67)U／ml，对照组为(45.04±43.62)U／ml；经t检验，2组显著差异(P＜0.01)。结论 血清IgE水平升高，可作为鉴定药物过敏性休克死亡的依据之一。

建立豚鼠哮喘模型的一种新方法

目的建立豚鼠哮喘模型。方法白色雄性豚鼠24只,随机分作2组(正常组、模型组),每组12只。本研究应用卵清白蛋白(OVA)致敏豚鼠,再用低浓度OVA雾化少量多次连续吸入激发哮喘模型。观测哮喘模型的常规指标。结果模型组的指征基本与临床症状相符;肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞直接计数明显升高;豚鼠肺组织病理结果:模型组动物的多个支气管旁可见嗜酸性粒细胞片状浸润,所有模型无死亡。结论本实验建立的豚鼠哮喘模型是成功的、稳定的。

冠心病患者体外反搏治疗时肾素血管紧张素系统与指脉的关系

【目的】观察冠心病患者在体外反搏(ECP)治疗前后循环血液中肾素血管紧张素系统与指脉的变化,分析它们之间的关系,探讨ECP防治冠心病的机制。【方法】对20例1个月内发生心肌梗死或心绞痛的患者进行了ECP治疗,同时监测指脉波参数。分别于第1次反搏前、3个疗程结束时采血,用放免及紫外分光光度法检测血液中肾素活性、血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,ANGⅡ)质量浓度及血管紧张素转换酶(angiotensin-convertingenzyme,ACE)活性。【结果】指脉波呈上升趋势,但组间无统计学意义。1个疗程后,肾素活性与ANGⅡ浓度高于反搏前;2个疗程后,ANGⅡ降至反搏前水平,ACE低于反搏前;3个疗程后,肾素活性降至反搏前水平,ANGⅡ与ACE低于反搏前。血浆ANGⅡ水平与指脉波成负相关关系。【结论】体外反搏对血流动力学的改善作用可能是其抑制肾素血管紧张素系统的机制之一。

转染survivin对HLF细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨survivin基因表达对人肺纤维母细胞(humanlungfibroblast,HLF)增殖、凋亡的影响。方法构建survivin基因真核表达质粒pcDNA3.1/SVN;利用脂质体转染法将其转入不表达survivinmRNA的HLF细胞系。连续培养10周,筛选出稳定表达的阳性克隆(HLF/SVN)及转空质粒对照(HLF/K)。用RT-PCR、免疫组化、Westernblot检测细胞中survivin、bcl-2和caspase3mRNA表达;通过观察细胞生长曲线、细胞凋亡指数,探讨转染survivin基因对HLF细胞生长、凋亡的影响。结果转染pcDNA3.1/SVN后,在4、6、8和10周HLF/SVN细胞查见survivinmRNA表达;免疫组化和Westernblot见HLF/SVN细胞survivin阳性表达;转染后caspase3mRNA受到抑制,表达减弱或消失。HLF/SVN细胞凋亡指数(0.3%、1.0%、1.5%)皆低于HLF(0.9%、4.3%、2.1%)及HLF/K(0.8%、1.4%、2.8%)。细胞生长曲线示HLF/SVN细胞生长快于HLF和HLF/K,差异有统计学意义(Р﹤0.05)。结论survivin基因能促进HLF细胞生长,可能通过抑制凋亡和促进细胞分裂而发挥作用。

在不同应激状态下MDM2基因对Jurkat细胞的作用

【目的】探讨MDM2基因在不同应激状态下对T细胞性白血病细胞株Jurkat增殖、凋亡和基因表达的影响。【方法】采用RNA干扰下调白血病细胞株JurkatMDM2基因表达后,用Westernblot、流式细胞术等方法检测Jurkat细胞在不同应激状态下的变化。【结果】无应激状态下,MDM2基因表达下降后,Jurkat细胞增殖减慢,细胞周期表现一定程度的G1-S阻滞;E2F1表达明显降低超过78%,p65表达下调超过58%;细胞损伤后,MDM2表达下调可导致细胞损伤修复减慢,增强紫外线和甲氨喋呤诱导凋亡作用,导致甲氨喋呤作用下Rb和Bax基因的表达相对增加。【结论】在不同应激状态下,MDM2基因表达下降广泛影响Jurkat细胞的增殖、凋亡和基因表达等生物学特性,提示MDM2基因有可能作为T细胞性白血病治疗的潜在新靶点。

PRL-2基因转染对肝细胞基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响

目的:研究PRL-2基因增强肿瘤细胞侵袭及转移能力的机制。方法:采用脂质体转染的方法将PRL-2基因表达质粒转染至正常永生化肝细胞系CL1中,G418筛选阳性克隆。应用明胶酶谱法检测转染肝细胞分泌MMPs酶谱变化,W estern b lotting及RT-PCR检测转染肝细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的变化。以PRL-2磷酸酯酶特异性抑制剂处理转染细胞,观察抑制PRL-2活性对上述指标的影响。结果:经过8周G418筛选及RT-PCR和W estern b lotting鉴定,获得稳定表达PRL-2的细胞亚系PRL-2-CL1。转染后的CL1细胞分泌MMP-9、活性型MMP-9和MMP-2,均显著高于转染前CL1细胞的MMPs分泌(P<0.01);使用特异性抑制剂后,MMP-9、活性型MMP-9和MMP-2活性显著降低(P<0.01)。W estern b lotting及RT-PCR检测显示PRL-2-CL1细胞MMP2、MMP9蛋白及mRNA含量均较转染前显著升高(P<0.05),TIMP-2则显著降低(P<0.05);使用抑制剂后,可以逆转上述变化。结论:PRL-2在永生化肝细胞中获得稳定、高效表达,PRL-2基因增强肝细胞侵袭及转移能力与其提高细胞MMP2、MMP9表达,降低TIMP-2有关。