线粒体分裂抑制剂对心肺复苏后脑功能及神经元凋亡的影响

目的探讨线粒体分裂抑制剂1（mdivi-1）在复苏后大鼠脑损伤中的作用及其机制。方法将50只健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（Sham组，n=8）、心搏骤停模型组（CA组，n=14）、二甲基亚砜对照组（DMSO组，n=14）和mdivi-1组（n=14）。以窒息法诱导大鼠CA后进行心肺复苏（CPR）；自主循环恢复（ROSC）后，mdivi-1组静脉注射1．2mg／kgmdivi-1进行干预，DMSO组注射等体积0．1％DMSO。复苏后24、48和72h，对各组大鼠进行神经功能缺损评分（NDS）；复苏后72h留取各组大鼠脑组织，苏木素-伊红（HE）染色，观察海马组织病理学改变，并计数正常神经元；采用原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测海马组织神经元凋亡；采用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测线粒体和胞质中细胞色素c（Cyt—C）蛋白表达。结果各实验组复苏后NDS评分逐渐升高；CA组复苏24、48、72hNDS评分较Sham组明显降低（分：51．5±3．7比80．0±0．0，59.3±3．6比80．0±0．0，66．7±2．6比80．0±0．0，均P〈0．05）；海马CA1区正常椎体神经元明显减少（个／HP：4．4±1．1比23．1±4．0，P〈0．05），神经元凋亡指数明显增加[（86．9±6．9）％比（3．4±0．8）％，P〈0．05]，线粒体Cyt—C表达明显减少（A值：0．46±0．18比1．00±0．00，P〈0．05），胞质Cyt—C表达明显增加（A值：6．65±0．21比1．00±0．00，P〈0．05）。Mdivi-1组复苏后24h和48hNDS评分较CA组有所提高（分：55．2±3．3比51．5±3．7，64．7±2．4比59．3±3．6，但均P〉0．05），72h时NDS评分明显提高（分：74．5±2.3比66．7±2．6，P〈0．05）；海马CA1区正常椎体神经元明显增加（个／HP：16．2±2．4比4．4±1．1，P〈0．05），神经元凋亡指数明显降低[（42．3±3．9）％比（86．9±6．9）％，P〈0．05]，线粒体Cyt—C表达明显增加（A值：0．83±0．22比0．46±0．18，P〈0．05），胞质Cyt—C表达明显减少（4值：3．84±0．47比6．65±0．21，P〈0．05）。DMSO组与CA组各指标比较差异均无统计学意义。结论mdivi-1可能通过抑制CA—CPR大鼠线粒体途径的Cyt—C释放，以减少神经元凋亡，促进CPR后脑功能恢复。