水稻细胞质铜锌超氧化物歧化酶基因的序列和表达分析

以水稻(Oryza sativa)品种Cpslo17幼穗为材料,通过RT-PCR克隆了长度为698bp的编码水稻细胞质铜锌超氧化物歧化酶基因(OsCu/Zn-SOD)。序列分析表明其覆盖基因完整编码框,编码由152个氨基酸组成的蛋白,它与玉米(Zea maize)Cu/Zn-SOD基因序列的相似率为88%。TargetP和ChloroP预测编码蛋白N端无信号肽序列,且此编码区段有8个外显子和7个内含子。利用Swiss-Model站点预测OsCu/Zn-SOD三维结构,并分析其铜锌离子结合位点的结构。RT-PCR结果表明OsCu/Zn-SOD在水稻不同品种均有表达,但表达量存在差异,OsCu/Zn-SOD在Cpslo17的分裂旺盛的幼嫩组织如幼穗、开花期花序和未成熟种子中表达量较高,而在叶片中表达量相对较低,在愈伤组织中表达微弱。

小油桐生物活性成分与药用价值研究进展

综述小油桐的生物活性成分及其在抗菌、抗病毒、杀虫、抗肿瘤等方面药用价值的研究进展,为综合开发利用能源植物小油桐资源提供参考。

水稻第6染色体S5区重叠群构建、基因注释与OS-APH的克隆分析

以通过图位克隆所获得的Cosm id克隆R2 I19序列信息为基础,构建了一个长为586 kb的粳稻第6染色体S5座位的BAC重叠群(JS5-BC)。通过生物信息学方法,对JS5-BC进行了基因注释,确定该区域含有46个基因位点。经功能预测,JS5-BC重叠群中存在3个主要的基因家族,分别是木葡聚糖岩藻糖基转移酶、脂酶和黄素氧化还原酶。JS5-BC中注释基因的一个显著特点是功能相关基因密集存在,如与植物细胞壁的合成代谢相关的3个基因、与呼吸链能量代谢的黄素氧化还原酶的4个基因等都是如此。为了验证基因注释的可靠性,克隆了广亲和品种Cp17品种的OSAPH基因的cDNA,并检测了该基因的表达模式,为注释基因提供了分子证据。

一步法RT-PCR克隆水稻线粒体磷转运蛋白基因及其序列特征分析

以水稻广亲和品种Cpslo17幼穗为材料,用一步法RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)克隆了一个长度为1118bp的编码线粒体磷转运蛋白的OsMPT基因。序列分析表明其包含了基因完整的编码序列,编码由368个氨基酸组成的线粒体磷转运蛋白,它与玉米、大豆、Lotusjaponicus、Betulapendula、拟南芥的线粒体磷转运蛋白氨基酸序列相似率分别为93.5%,85.6%,83.8%,83.7%,81.1%。氨基酸疏水谱分析显示它有线粒体磷转运蛋白家族高度保守的6个跨膜结构域。水稻线粒体磷转运蛋白N端富含精氨酸(Arginine)、丙氨酸(Alanine)和丝氨酸(Serine)。iPSORT预测其蛋白N端具有定位于线粒体的信号肽序列,进一步分析表明此编码区段有6个外显子和5个内含子。RT-PCR结果表明,OsMPT基因在水稻两个亚种粳稻和籼稻的叶片中均有表达,在Cpslo17营养器官和生殖器官中都有高水平表达。水稻线粒体磷转运蛋白的克隆和表达分析将为研究其结构和生物学功能奠定基础。

海带多糖的提取工艺及降血脂活性研究

目的:研究海带多糖的工业提取工艺及其降血脂活性。方法:使用正交设计L9(34)方法探讨用碱量、时间、温度等因素对提取海带多糖的影响,从而得出最佳的提取工艺;紫外分光光度法测定多糖的含量并计算产率;连续15 d给予不同剂量的多糖粗提取物以及纯品海带多糖,观察多糖对高血脂小鼠甘油三酯和总胆固醇水平的影响。结果:最佳的提取工艺为5%Na2CO3溶液在80℃提取3 h,得到产率为2.13%;不同剂量和纯度的海带多糖对高血脂小鼠的甘油三酯和总胆固醇水平有不同程度的降低作用。结论:海带多糖有明显的降血脂作用。

小油桐种子的^60Co-γ射线辐射敏感性及半致死剂量的研究

目的研究3个不同产地小油桐种子对60Co-γ射线辐射的敏感性,确定其辐射处理的半致死剂量。方法以种子50%发芽率为基准,通过直线回归方程计算3个不同种源的小油桐种子60Co-γ射线辐射的半致死剂量。结果和结论3个不同种源的小油桐种子的辐射半致死剂量分别为178Gy(广东)、132Gy(海南)、198Gy(印度)。60Co-γ射线辐射可引起幼苗某些表型发生改变,随着辐射剂量的增加,小油桐叶片形状发生多种变异。研究结果可作为重要药用及能源植物小油桐辐射诱变育种的参考依据。

大蕉冷诱导差减文库的构建与分析

以低温处理的大蕉幼苗cDNA为检测子,未处理的大蕉幼苗cDNA为驱赶子,利用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)构建了大蕉幼苗冷诱导差减cDNA文库,通过点杂交差异筛选cD-NA文库,得到约50个低温下表达增强的候选克隆,对其进行DNA测序和同源性比较,发现获得的ESTs在功能上主要涉及信号传导、表达调控、非生物胁迫防御、蛋白质加工和能量代谢等方面。该SSH文库的构建为克隆大蕉抗寒相关基因奠定了基础。

药用及能源植物小油桐的非试管快繁技术研究

目的建立药用及能源植物小油桐非试管快繁技术。方法以小油桐2～3cm长、携带单腋芽的微茎段作外植体,研究了不同浓度的细胞生长素IBA对其生根再生成完整植株的影响。结果用1mg/LIBA处理1h再生植株效果最佳,其生根率高达96.7%,生根时间为(18.2±2.0)d,新生根的数量为(6.3±1.8)条,平均总根长达(6.8±3.5)cm。结论此项以微茎段作外植体的非试管快繁技术,操作简单,在较短时间内即可获得大量小油桐完整再生植株,适用于工厂化育苗。

马尾松树皮提取物对人角质细胞HaCaT的细胞毒性作用的研究

目的探讨马尾松树皮提取物(PMBE)对人表皮角质细胞株HaCaT的细胞毒性,为PMBE用于皮肤炎症的治疗打下理论基础。方法用倒置显微镜观察PMBE对细胞形态的影响;用CCK-8检测PMBE对细胞生长的抑制率;用流式细胞仪测定细胞周期。结果PMBE对HaCaT细胞株的作用具有剂量和时间的依赖关系。PMBE在12 h前各浓度对细胞形态、活性、细胞周期基本没有影响,而在24 h后表现剂量依赖关系,并呈现随机的非线性关系。结论一定浓度范围内的PMBE对细胞株HaCaT没有细胞毒副作用,可以用于表皮细胞抗炎症模型药物的筛选。