粪便短链脂肪酸的测定方法优化及联合补充纳豆红曲对短链脂肪酸水平的影响

目的建立液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法测定粪便短链脂肪酸(SCFAs),并检测经纳豆红曲干预后小鼠粪便中SCFAs的水平。方法利用2-硝基苯肼盐酸盐(2-NPH·HCl)对粪便样本进行衍生,上清液萃取吹干后初始流动相复溶上机。将41只7周龄~8周龄ApoE-/-雄性小鼠随机分成4组:低脂饲料组(LFD)、高脂高胆固醇饲料组(HFD)、低脂饲料+0.3 g/kg纳豆红曲组(LFD+NR)和高脂高胆固醇饲料+0.3 g/kg纳豆红曲组(HFD+NR)。干预12周后检测粪便SCFAs水平和空腹血糖水平。结果目标待测物在LC-MS/MS下分离良好。所有待测物线性相关系数在0.997以上,回收率均在80.95%~119.45%,精密度均在0.2%~5.4%,满足方法学要求。联合补充纳豆红曲12周增加LFD饲养的ApoE-/-小鼠粪便丙酸和异丁酸水平。粪便中乙酸与空腹血糖水平成负相关,辛酸与空腹血糖水平成正相关。结论通过LC-MS/MS测定粪便SCFAs水平的方法准确度、灵敏度高,定量准确。粪便SCFAs含量与空腹血糖水平具有相关性,提示纳豆红曲可能通过影响粪便SCFAs含量影响血糖水平,需进一步探索机制。