溶瘤病毒CNHK300-mIFN-γ表达mIFN-γ及体外胃肠道肿瘤杀伤实验

目的研究携带鼠干扰素-γ(mIFN-γ)基因的溶瘤病毒CNHK300-mIFN-γ(简称CNHK300-Mγ)对胃肠道肿瘤细胞的体外杀伤作用和mIFN-γ的表达情况。方法采用CNHK300-Mγ、CNHK300、ONYX-015和AdEasy-mIFN-γ(简称AdEasy-Mγ)感染胃癌细胞株SGC-7901、大肠癌细胞株HT-29和正常成纤维细胞株MRC-5,通过TCID50法、CPE和四唑盐比色试验(MTT)检测CNHK300-Mγ、CNHK300和ONYX-015在上述肿瘤细胞和正常细胞中的增殖能力和杀伤作用,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CNHK300-Mγ和AdEasy-Mγ在上述肿瘤细胞和正常细胞中不同时相的mIFN-γ表达量。结果 CNHK300-Mγ具有类似于CNHK300的肿瘤细胞选择增殖性特性,能在胃肠道肿瘤细胞中大量增殖并杀灭肿瘤细胞,均强于ONYX-015,而在正常细胞中增殖和杀伤作用均较弱,类似于ONYX-015。CNHK300-Mγ感染胃肠道肿瘤细胞后有大量的mIFN-γ表达,并随着感染时间延长表达量也相应上升,而AdEasy-Mγ感染后只有少量mIFN-γ的表达,而且感染的时间延长表达量变化也不大。结论 CNHK300-Mγ能选择性增殖、杀灭肿瘤细胞,同时大量表达具有抗肿瘤作用的治疗基因,发挥多重抗瘤作用,有良好的临床应用前景。

携带mIFN-γ的溶瘤病毒CNHK300-mIFN-γ对肿瘤细胞的体外杀伤作用

目的:研究携带小鼠干扰素γ(mIFN-γ)基因的溶瘤病毒CNHK300-mIFN-γ(CNHK300-Mγ)对恶性肿瘤细胞的体外杀伤作用。方法:CNHK300-Mγ、CNHK300、ONYX-015和AdEasy-mIFN-γ(AdEasy-Mγ)感染肺癌细胞株A549、肝癌细胞株SMMC-7721、胰腺癌细胞株PANC-1和正常成纤维细胞株BJ,通过病毒增殖实验、细胞病理效应和细胞杀伤实验观察CNHK300-Mγ、CNHK300和ONYX-015在上述肿瘤细胞和正常细胞中的增殖能力和对这些细胞的杀伤作用,通过双抗体夹心ELISA检测CNHK300-Mγ和AdEasy-Mγ在上述肿瘤细胞和正常细胞中不同时相的mIFN-γ表达量。结果:CNHK300-Mγ具有类似于CNHK300的肿瘤细胞选择增殖性,能在恶性肿瘤细胞中大量增殖并杀灭肿瘤细胞,均强于ONYX-015(P<0.01),而在正常细胞中增殖和杀伤作用均较弱,弱于ONYX-015(P<0.05)。CNHK300-Mγ感染恶性肿瘤细胞后有大量的mIFN-γ表达,并随着感染时间延长表达量也相应上升,而AdEasy-Mγ感染后只有少量mIFN-γ的表达,而且感染的时间延长表达量变化也不大(P<0.01)。结论:CNHK300-Mγ能选择性地在肿瘤细胞中增殖,并杀灭肿瘤细胞,同时大量表达具有抗肿瘤作用的蛋白,发挥多重抗瘤作用,有良好的临床应用前景。

携带γ-干扰素的溶瘤病毒CNHK300-mlFN-γ治疗肝癌

目的观察鼠源γ-干扰素（mlFN-γ）基因插入溶瘤腺病毒CNHK300后，该病毒对不同的肝癌细胞株及其裸鼠移植瘤的增殖力及特异性杀伤作用。方法用噻唑蓝（MTT）法观察CNHK300-mlFN-γ（简称CNHK300-Mγ）对人正常肝细胞WRL-68、人肝癌细胞SMMC-7721、HepGII的特异性杀伤作用。裸鼠肝癌SMMC-7721模型观察CNHK300-Mγ、CNHK300和ONYX-015的抗肿瘤疗效，并用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中mlFN-1的表达量。结果CNHK300-Mγ能选择性地杀伤肝癌细胞，存肿瘤细胞中半数抑制浓度（IC50）〈1，而在正常肝细胞中为370。肝癌模型中，CNHK300-Mγ治疗组能表达mIFN-1，治疗结束后第3天和第7天血清中的mlFN-γ分别为（23l±101）ng/L和（1733±191）ng／L。CNHK300-Mγ具有明显的肿瘤生长抑制作用，与CNHK300、ONYX2015和对照组的差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论mIFN-1的插入使病毒对肿瘤细胞的杀伤能力提高，CNHK300-M5,具有明显的肿瘤生长抑制作用。