骨髓间质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞的实验研究

目的:体外培养并诱导大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)分化为心肌细胞。方法:采用密度梯度离心法和贴壁培养法分离、纯化大鼠骨髓MSCs,在第3代细胞以5-氮杂胞苷进行诱导,用免疫细胞化学和RT-PCR方法对诱导细胞进行鉴定。结果:诱导后细胞体积较诱导前增大,而且更加细长,呈长梭形。14d后细胞之间出现连接,排列方向渐趋一致。免疫细胞化学染色显示诱导后部分细胞结蛋白(desmin)、横纹肌肌动蛋白(α-sarcomericactin)和心肌特异性肌钙蛋白(troponinI)呈阳性反应。RT-PCR结果表明诱导细胞有心肌β肌球蛋白重链表达。结论:5-氮杂胞苷能在体外诱导MSCs向心肌细胞分化。

广东地区汉族正常人群HLAE基因多态性研究

为了检测广东地区汉族正常人群HLA E基因的多态性 ,并分析HLA E与典型HLA I类 (Ia)位点之间的连锁关系 ,采用PCR SSP方法检测广东地区 15 0个无血缘相关的正常人的HLA E基因型 ,同时用NIH标准微量淋巴细胞毒方法检测其中 10 6人HLA A , B基因型 ,对HLA E与HLA A , B位点之间作连锁分析。结果发现 ,在广东地区汉族正常人群中共检出 3个HLA E等位基因 :HLA E 0 10 1,HLA E 0 10 3 1,HLA E 0 10 3 2 ,其基因频率分别为 4 5 .3 3 % ,3 2 .3 3 % ,2 2 .3 3 %。未检出E 0 10 2和E 0 10 4。HLA E与HLA A , B位点之间B15 / E0 10 3 2及A2 /E 0 10 3 2存在连锁不平衡 ,除此之外其他任何两位点之间不存在连锁不平衡。结论 :HLA E高度保守的多态性提示其生物学特性可能有别于HLA Ia分子。

C57BL/6哮喘小鼠细胞内镁含量与肺组织β_2受体mRNA表达的相关性研究

目的:探讨细胞内镁含量对C57BL/6哮喘小鼠肺组织β2受体mRNA表达的影响。方法:健康4-6周龄清洁级雌性C57BL/6小鼠96只,体重(12±2)g,随机数字表法分为A、B、C、D4组,每组各24只。应用鸡卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型。A、B组予低镁饲料喂食,C、D组予正常镁饲料喂食。B、D组腹腔内注射沙丁胺醇诱导β2受体低调节,A、C组腹腔内注射生理盐水作对照。第1d、21d、34d各组分别随机抽取8只检测血浆Mg2+、红细胞内Mg2+、肺组织β2受体mRNA及蛋白表达。结果:1d血浆Mg2+、红细胞内Mg2+、肺组织β2ARmR-NA及蛋白表达各组间差异无显著(均P>0.05)。21d、34dC组血浆Mg2+、红细胞内Mg2+、肺组织β2ARmRNA及蛋白表达均显著高于A组[21d:(0.84±0.09)mmol/Lvs(0.57±0.10)mmol/L、(2.39±0.14)mmol/Lvs(2.11±0.08)mmol/L、(0.75±0.09)mmol/Lvs(0.59±0.06)pmol/g、(88.50±8.50)pmol/gvs(60.10±7.70)pmol/g,均P<0.05;34d:(0.67±0.10)mmol/Lvs(0.51±0.09)mmol/L、(2.17±0.08)mmol/Lvs(2.05±0.09)mmol/L、(0.61±0.05)pmol/gvs(0.53±0.06)pmol/g、(76.60±7.10)pmol/gvs(58.00±7.60)pmol/g,均P<0.05];21d、34dD组血浆Mg2+、红细胞内Mg2+、肺组织β2ARmRNA及蛋白表达亦显著高于B组[21d:(0.95±0.33)mmol/Lvs(0.46±0.09)mmol/L、(2.32±0.18)mmol/Lvs(1.87±0.14)mmol/L、(0.73±0.10)pmol/gvs(0.43±0.07)pmol/g、(96.90±8.00)pmol/gvs(47.90±4.90)pmol/g,均P<0.05;34d:(0.71±0.10)mmol/Lvs(0.31±0.08)mmol/L、(1.66±0.13)mmol/Lvs(1.45±0.16)mmol/L、(0.40±0.07)pmol/gvs(0.33±0.05)pmol/g、(61.50±3.20)pmol/gvs(35.30±7.10)pmol/g,均P<0.05]。结论:细胞内镁缺乏的C57BL/6哮喘小鼠肺组织β2受体表达减少,在激动剂作用下更易发生β2受体低调节。

细胞因子诱导的杀伤细胞的生物学特性研究

目的 :探讨细胞因子诱导的杀伤细胞 (CIK)的生物学特性。方法 :健康人非贴壁单个核细胞用含IFN-γ、IL - 1β、IL - 2、CD3单抗诱导CIK细胞。以LAK细胞作为对照。流式细胞仪和免疫细胞化学染色检测细胞表型特征 ;乳酸脱氢酶释放法分析细胞毒活性。结果 :诱导 2周后 ,CIK细胞的增殖率达到高峰 ,CD3+ 细胞占 95 %以上 ;第 3周细胞生长进入平台期。诱导 15d时 ,CD3+ CD5 6 + NKT亚群占 16 .5 % ,比例在 2 - 4周区间内无明显变化。LAK细胞增殖缓慢 ,显著低于同期CIK细胞增殖率 (P <0 .0 1)。不同效 :靶比例CIK细胞对肝癌细胞BeL - 74 0 2的特异性溶解率显著高于LAK细胞 (P <0 .0 1)。免疫细胞化学染色结果显示 ,CIK细胞高度表达HLA -DR和CD5 4抗原 ,NKT细胞体积较CD3+ CD5 6 -细胞略大 ,细胞表面有大量伪足。结论 :CIK细胞具有高度增殖能力 ,其体外杀瘤活性明显优于LAK细胞。诱导 14 - 2 1d ,CIK细胞增殖率和CD3+ CD5 6 + 阳性细胞率均达到高峰 。

复发性自然流产患者外周血淋巴细胞Fas表达及其与NK细胞毒性的相关性研究

目的:探讨复发性自然流产(RSA)患者的外周血淋巴细胞Fas表达并分析NK细胞毒性与其Fas表达的相关性。方法:应用流式细胞仪技术检测25例RSA患者外周血淋巴细胞Fas表达及NK细胞毒性,对NK细胞Fas表达与其毒性进行相关性分析。结果:正常组表达Fas的CD4+T淋巴细胞为21.06%±4.36%,RSA组为18.27%±4.81%,两组比较无统计学差异(P>0.05)。RSA组表达Fas的CD8+T淋巴细胞为12.32%±2.78%,较正常组(7.78%±2.17%)高,差异有统计学意义(P<0.01)。RSA组表达Fas的NK细胞为14.23%±3.67%,较正常组(8.87%±2.95%)高,差异有统计学意义(P<0.01)。表达Fas的NK细胞含量与NK细胞毒性呈显著正相关。效应细胞:靶细胞为25:1时,相关系数r=0.693,(P<0.01)。效应细胞:靶细胞为50:1时,r=0.672(P<0.01)。结论:RSA患者存在CD8+T淋巴细胞和NK细胞的异常激活,外周血NK细胞毒性增高与表达Fas的NK细胞增多有关。

沉默孕激素膜受体1基因抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa增殖的研究

目的通过siRNA抑制子宫内膜癌细胞株Ishikawa孕激素膜受体1(progesterone receptor membrane component-1,PGRMC1)表达,探讨抑制子宫内膜癌细胞增殖的作用。方法应用Ambion公司siRNA设计工具设计以PGRMC1为靶标的siRNA并用该公司试剂盒化学合成。MTT法检测转染siRNA后细胞增殖抑制率,RT-PCR检测转染siRNA后PGRMC1基因mRNA水平变化,Western blot检测蛋白表达变化。流式细胞仪检测转染组与对照组细胞周期变化;Annexin V阳性细胞百分比,对比细胞凋亡率;双氢二氯荧光黄染色阳性率判定细胞内ROS水平。结果 si-PGRMC1可显著抑制该基因mRNA及蛋白的表达,使细胞增殖受抑,G2期细胞比例明显增加,凋亡细胞比率明显增加,细胞内ROS水平也随之升高。结论 PGRMC1参与了调控子宫内膜癌细胞增殖。

儿童急性淋巴细胞白血病分型及其不同治疗方案与预后的临床研究

目的:研究儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的细胞形态学、免疫表型分型及不同方案治疗与预后的相关性。方法:采用骨髓涂片染色进行细胞形态学检查,采用单克隆抗体(McAb)和流式细胞仪(FCM)进行免疫表型检测。结果:103例儿童ALL患者中,67例(65.05％)为L_1型,33例(32.04％)为L_2型,无L_3型,3例(4.91％)为其他。行免疫分型的87例中,58例(66.67％)为B系表达,12例(13.79％)为T系表达,10例(11.49％)为B系、髓系混合表达,3例(3.45％)为T系、B系混合表达,1例(1.15％)为T系、髓系混合表达,1例(1.15％)为B系、T系、髓系混合表达,2例(2.30％)为髓系表达。采用XH-88方案治疗25例,缓解率92％,复发率52.17％,死亡率43.48％;协作组方案治疗41例,缓解率92.68％,复发率36.84％,死亡率55.26％;SUM-99’方案治疗29例,缓解率93.10％,复发率18.52％,死亡率14.81％。结论:结合免疫分型与细胞形态学分型,将儿童ALL患者分为标危(SR)、中危(IR)和高危(HR)三组,按型采用不同的治疗方案对提高儿童ALL缓解率和降低其复发率有重要意义。

肝细胞生长因子诱导小鼠胚胎干细胞分化的实验研究

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)诱导小鼠胚胎干细胞(ESC)体外定向分化为肝细胞的能力.方法对ESC体外悬浮培养5～7天形成的拟胚体,观察ESC自主分化、HGF诱导分化的情况.观察和检测经诱导4周的细胞的HE染色,糖原染色,尿素氮及甘油三酯合成,心肌MHC、白蛋白、AFP、CK18的表达,以及吲哚氰绿(ICG)染色情况.结果 ESC自主分化难以控制.HGF可促进ESC向内胚层进一步分化,但更可能诱导其向心肌分化.表达白蛋白、AFP、CK18、ICG和FDA染色阳性.结论 HGF可诱导ESC分化出肝细胞,但HGF的单一作用能力有限,提示肝细胞的诱导分化可能需要多种因素共同作用.

MAT1-siRNA体外转染抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭能力的研究

目的:观察siRNA沉默MAT1基因对胰腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响,探讨MAT1基因作为胰腺癌基因治疗标靶的可行性。方法:在脂质体介导下将MAT1基因序列特异性siRNA体外转染人胰腺癌BxPC-3细胞,采用RT-PCR和W estern印迹法分析MAT1基因的表达,锥虫蓝染色计数法和Boyden小室模型分别测定细胞的增殖和体外侵袭能力变化。结果:与对照各组相比,实验组BxPC-3细胞MAT1 mRNA和蛋白在一定时间内均表达下调,其中mRNA表达在24 h和48 h分别下调达55.2%和64.3%(P<0.01);细胞体外增殖和侵袭能力均明显受抑,差异具统计学显著性(P<0.01)。结论:针对MAT1基因的siRNA可抑制胰腺癌细胞的增殖和侵袭能力,MAT1可能是胰腺癌基因治疗的靶点。

脐血来源DCs对CIK、NK细胞杀伤活性影响的实验研究

【目的】探索同一来源脐血树突状细胞(DCs)以不同刺激方式作用于细胞因子诱导杀伤(CIK)、自然杀伤(NK)细胞后对其杀伤活性的影响。【方法】通过细胞因子组合诱导、扩增脐血来源的 DCs、CIK 和 NK 细胞,分别将 DCs 以不同的刺激方式(提前共孵育或直接加入)作用于同一来源的脐血 CIK、NK 细胞,了解其对不同效靶比下 CIK、NK 细胞杀伤 K562、HL-60细胞株细胞毒活性的影响。【结果】随着效靶比的升高,脐血 CIK、NK 细胞对肿瘸细胞株的杀伤力增加,将脐血 DCs 与 CIK、NK细胞共孵育或杀伤时直接加入,均可显著提高 CIK、NK 细胞的细胞毒活性,以杀伤时直接加入 DCs 的促进作用更强。【结论】直接加入 DCs 对促进 CIK、NK 细胞对肿瘤细胞的杀伤作用更为有效。

火把花根片在小鼠骨髓移植模型中减轻急性移植物抗宿主病的实验研究

目的探讨火把花根片在小鼠骨髓移植模型中减轻急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)的效果及可能的作用机制。方法建立小鼠异基因骨髓移植GVHD模型,预处理为放疗8．0Gy,分为：对照组(n=10)异基因骨髓细胞(2×10~6)加脾T淋巴细胞(2×10~6)移植组；火把花根片组(n=20)异基因骨髓细胞(2×10~6)加脾T淋巴细胞(2×10~6)移植加火把花根片预防组。比较受鼠生存时间和GVHD发生情况,受鼠外周血象中白细胞、血球压积等恢复情况和骨髓细胞中嵌合体H-2D^b阳性细胞百分比以评价造血重建。在移植后不同时间点分别采用流式细胞仪检测受鼠的脾细胞中CD4^+和CD8^+以及CD25和CD69的表达。结果移植后对照组受鼠均于25天内死于GVHD,火把花根片组GVHD的发生率为20%(4/20),与对照组小鼠相比,存活率和时间明显增高和延长(P＜0．01)；存活的火把花根片组小鼠(n=4)40天时骨髓细胞中的H-2D^b阳性细胞百分比达(93．38±4．32)%。移植后10天开始,火把花根片组小鼠CD4^+和CD8^+T细胞比例明显低于对照组(P＜0．05),CD4^+CD25^+T细胞、CD4^+CD69^+T细胞、CD8^+CD25^+T细胞和CD8^+CD69^+细胞比例明显低于对照组(P＜0．05)。结论火把花根片能明显减轻骨髓移植模型中aGVHD的发生率,其作用机制可能在于抑制aGVHD发生过程中T细胞的免疫反应。

失血性休克大鼠早期肠黏膜缺血/再灌注损伤的形态学研究

目的:观察动物缺血/再灌注损伤(I/R)早期肠黏膜屏障的形态学变化。方法:在建立大鼠失血性休克模型的基础上,通过放血和输入生理盐水的方法,输注所放出血液2倍以上的生理盐水供动物休克后复苏,复苏后0h、1h、3h、6h1、2h、24h观察其肠黏膜标本在显微镜下病理改变及肠黏膜上皮损伤指数等指标。结果:①I/R过程可造成肠黏膜屏障损伤,表现在复苏0h可见回肠绒毛水肿,片状坏死、脱落及黏膜萎缩,黏膜损伤以1h和3h明显,其损伤指数分别为2.8和2.6,损伤的黏膜6h后开始重建,24h重建基本完成;②结肠黏膜上皮水肿、脱落,伴有中性粒细胞浸润及杯状细胞脱颗粒,但其损伤指数明显小于回肠。结论:失血性休克早期的肠I/R后可造成肠黏膜屏障损害,但肠黏膜具有强大的重建潜能;早期的重建只是肠黏膜上皮细胞间连续性建立,其黏膜仍进行性萎缩;结肠较回肠更耐受I/R打击。

热休克蛋白对树突状细胞成熟的影响研究

目的 :探讨热休克蛋白 (HSP)对树突状细胞 (DCs)成熟的影响 ,同时对其形态学动态变化进行研究。方法 :从肝癌组织中提取HSP(gp96 )抗原肽复合物 ;肝癌细胞进行热休克处理诱导其表面表达HSP ,再用DiI荧光标记 ;将两种HSP与DCs混合培养 ,动态观察DCs捕获抗原和成熟过程中的形态学变化。流式细胞仪检测不同情况下热休克蛋白对DCs成熟表型的影响。结果 :使用DiI标记的方法良好地显示了DCs摄取抗原的形态学变化 ;DCs通过直接接触、包绕、形成囊泡和伸出伪足且末端形成囊泡 4种方式摄取抗原 ;热休克蛋白可促进DCs成熟表型的表达。结论 :DiI是适合DCs形态学研究的良好的荧光标记物 ;DCs捕获抗原有 4种不同方式 ;不同热休克蛋白均可促进DCs成熟 。

联合使用干细胞因子、FLT3配基与白介素2,7,15体外扩增人脐血来源CIK/NK细胞

通过干细胞因子 (SCF)、FLT3配基 (FL)联合白介素 (IL) 2 ,7,15等的不同组合体系体外扩增人脐血来源的CIK NK细胞 (CB CIK NK) ,探讨不同培养方式对CB CIK NK细胞诱导、扩增产率的影响。按诱导扩增体系的不同分 3组 :A组 (SCF +IL2 +IL7+IL15 ) ,B组 (SCF +FL +IL2 +IL7+IL15 )和C组 (IL2 +IL7+IL15 ,对照组 ) ,培养 2 1天 ,检测CD3+ CD5 6 + CIK细胞、CD3- CD5 6 + NK细胞比例和扩增倍数。结果表明 :经 2 1天培养 ,A ,B及C组CIK细胞比例分别为 (19.84± 2 .93) %、(2 6 .2 0± 4 .0 5 ) %及 (2 4 .0 3± 4 .99) % ;而NK细胞的比例A、B及C组比例分别为 (4 9.6 0± 1.4 0 ) %、(5 1.16± 6 .4 5 ) %及 (30 .85± 8.12 ) %。含SCF +FL的B组扩增效率最高 ,其中CIK细胞的扩增倍数由对照组 (C组 )的 (5 75 81± 2 2 1.72 )倍增加至 (796 .0 9± 2 78.4 7)倍 (最高为 1313倍 ) ;NK细胞由对照组 (C组 )的 (30 .39± 14 .4 7)倍增加至 (6 5 .85± 30 .83)倍 (最高为 12 1.0 6倍 )。结论 :通过合适的细胞因子组合可以同时扩增CB来源的CIK NK细胞 ;联合诱导、扩增CB CIK NK细胞以采用含SCF +FL +IL2 +IL7+IL15的培养体系为佳。

糖皮质激素吸入对哮喘患儿外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞水平的影响

目的:探讨糖皮质激素吸入对哮喘患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)水平的影响。方法:采用糖皮质激素吸入治疗70例发作期哮喘患儿,应用流式细胞术检测患儿外周血的Tr细胞数。结果:糖皮质激素规则治疗后患儿外周血CD4+CD25+Tr水平(7.05%±1.61%)明显高于治疗前(5.62%±1.29%),P<0.01。完全控制组患儿外周血CD4+CD25+Tr水平最高(7.56%±1.88%),部分控制组患儿次之(7.09%±1.23%),控制不佳组患儿最低(6.11%±1.96%),差异均显著,P<0.05。经激素规则治疗的患儿外周血Tr水平(7.05%±1.61%)明显高于不规则治疗组患儿(5.91%±1.76%),P<0.01。结论:规则使用糖皮质激素吸入疗法可明显提高哮喘患儿外周血Tr水平,Tr水平与哮喘的激素治疗效果有关。

血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大后缝隙连接蛋白Cx43表达的变化

【目的】研究血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大后连接蛋白43(Cx43)表达的变化及与细胞周期分布的关系。【方法】分离培养大鼠心肌细胞,用血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大,72h后用RT-PCR和免疫荧光方法观察心肌细胞Cx43基因和蛋白表达,用流式细胞仪测定法观察心肌细胞周期分布变化以及Cx43表达量的关系。【结果】血管紧张素Ⅱ处理后的心肌细胞表现细胞肥大且细胞活力增强,S期、G2-M期细胞百分比增加,细胞内G2-M(二倍体)DNA含量降低,Cx43蛋白表达低于对照组,Cx43mRNA表达水平也较对照组明显下调,Cx43蛋白表达下调与细胞周期分布的改变相关。【结论】血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大后Cx43基因表达明显下调,导致Cx43蛋白表达亦出现下调,这一改变可能与心肌肥大过程中的细胞周期变化有关,提示血管紧张素Ⅱ可能通过调控Cx43基因的表达而参与缝隙连接重构过程,而Cx43表达的变化可能与心肌肥大的机制有关。

阳离子脂质体Lipofectamine2000对人胰腺癌Capan-2细胞的毒性作用

目的探讨阳离子脂质体Lipofectamine2000(Lipo)在一定浓度下对细胞毒性的作用机制。方法应用一定毒性浓度的Lipo作用于胰腺癌Capan-2细胞,利用细胞直接记数法和流式细胞术检测其对Capan-2细胞生长、细胞凋亡和周期的影响。结果Lipo与siRNA的浓度均影响转染率的高低。在2ml转染体积中,Lipo在5μl的浓度下,使Capan-2细胞生长明显减慢,以第3天后更加明显(P<0.001)。随着转染细胞按常规培养的时间延长,早期凋亡细胞明显增多(P<0.05),活性细胞明显减少(P<0.01),而损伤细胞和死亡细胞明显增多(P<0.001),以48h后更明显;G0～G1期细胞明显增多(P<0.05),G2-M期细胞明显减少(P<0.01),S期细胞明显减少(P<0.01),晚期凋亡细胞减少(P<0.05)。结论在一定浓度下,Lipo可影响细胞的生长、早期凋亡和细胞周期分布,因此,利用Lipo在不同的细胞系进行基因转染过程中Lipo应进行浓度梯度筛选。

慢病毒载体携带的VEGFR_2 shRNA对HL60的体外杀伤作用

目的:为寻找高效低毒的选择性抗白血病药物,研究慢病毒载体携带的血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)基因短发夹RNA(shRNA)对肿瘤细胞株HL60的体外杀伤作用。方法:制备并筛选VEGFR2基因的最有效siRNA,并据此设计shRNA寡核苷酸链,构建pU6/shVEGFR2入门克隆。瞬时转染细胞,采用MTT法、RT-PCR法及Western blotting测定VEGFR2表达抑制情况。构建表达克隆,与ViraPowerTMPackaging Mix共转染到293FTTM细胞中,产生携带Lenti6/shVEGFR2的慢病毒载体。将病毒上清加入HL60细胞中转导,测定HL60细胞抑制率并与pU6/shVEGFR2入门克隆脂质体转染结果比较。结果:VEGFR2siRNAc抑制HL60细胞效率最高,利用其shRNA和pENTRTM/U6构建的入门克隆转染HL60,抑制细胞效率达84·9%;显著抑制HL60细胞VEGFR2基因mRNA和蛋白的表达。pU6/shVEGFR2入门克隆转染、Lenti6/shVEGFR2表达克隆转导HL60细胞后48h细胞抑制率相近,48h后入门克隆转染组细胞抑制率明显下降;而表达克隆转导组细胞抑制率变化缓慢,在96h达高峰,120h稍降,变化无显著差异。结论:在体外慢病毒载体携带的VEGFR2shRNA可有效阻断HL60细胞VEGF/VEGFR自分泌链,有效抑制白血病生长。

同种异基因小鼠骨髓腔内脐血移植模型的建立及其对造血干细胞植入的影响

【目的】建立同种异基因小鼠骨髓腔内脐血移植模型，研究该技术对造血干细胞(HSC)归巢、植入率、移植后免疫造血重建、移植物抗宿主病(GVHD)等方面的影响。【方法】用C57BL／6胎鼠及新生鼠外周血(FNPB)作供体，以单侧胫骨骨髓腔内注射(IBMI)和尾静脉注射(IV)两种途径移植经亚致死量^(60)Coγ射线辐照预处理的BALB／c鼠。200只受鼠随机分为4组：骨髓腔内注射组(IBM组)；尾静脉注射组(IV组)；放疗对照组；正常对照组，每组50只。用组织冰冻切片和流式细胞术动态了解CFSE标记FNPB在受体内的分布变化，并观察移植后受鼠存活状况、植入水平、造血与免疫功能恢复及GVHD情况。【结果】①荧光际记FNPB体内动力学显示直至输注后72h，供体FNPB经IBMI后主要积聚于注射侧骨髓腔内，肺部滞留很少。而IV组及IBM组非注射侧骨髓中的FNPB细胞数显著少于IBM组注射侧，IV组非造血组织器官如肺部有明显供体细胞滞留。②同种异基因小鼠CBT模型中IBM组造血、免疫功能的恢复明显快于IV组，无GVHD，移植后90d存活率达到90％，注射侧胫骨植入水平(29.53±6.64)％，较IV组有显著改善。③IBM输注侧骨髓中供体HSCs植入水平及造血重建速度明显优于非注射侧骨髓。【结论】成功建立同种异基因小鼠骨髓腔内脐血移植模型，并证实IBMI途径对促进HSCs植入，造血免疫功能重建，提高UCBT效果方面优于IV途径，多部位IBMI可能更有利于HSC归巢骨髓。