脑胶质瘤组织中cyclin D1的表达及其意义

背景与目的:细胞周期素D1(cyclinD1)在许多肿瘤中有过度表达,过量的cyclinD1是许多肿瘤发生的重要原因。但在脑胶质瘤中是否存在cyclinD1的过度表达尚有争论,本研究旨在检测人脑胶质瘤组织中cyclinD1的表达水平,探讨cyclinD1与脑胶质瘤恶性程度及预后的关系。方法:采用免疫组化SP法检测84例脑胶质瘤组织中cyclinD1的表达水平;分析脑胶质瘤组织中的cyclinD1表达强度、阳性细胞率与肿瘤恶性程度、预后之间的关系。结果:(1)32例低级别胶质瘤中cyclinD1平均阳性细胞率为(9.82±9.75)%,52例高级别胶质瘤中平均阳性细胞率为(27.45±21.03)%,两组均数比较差异有显著性(P<0.01);(2)低级别胶质瘤cyclinD1阳性率为31.25%(10/32),高级别胶质瘤阳性率为61.53%(32/52),差异有显著性(P<0.01);(3)复发组cyclinD1阳性率为76.19%(16/21),未复发组的cyclinD1阳性率为24.00%(6/25),差异有显著性(P<0.01);(4)死亡组cyclinD1阳性率为66.67%(14/21),未死亡组的cyclinD1阳性率为32.00%(8/25),差异有显著性(P<0.05)。死亡组21例中,高级别胶质瘤cyclinD1阳性率为86.66%(13/15),低级别胶质瘤阳性率为16.66%(1/6),差异有显著性(P<0.01)。结论:CyclinD1表达水平随胶质瘤病理分级的增高而增高;cyclinD1表达水平越高,患者预后越差。

人脑胶质瘤组织中nm23与PCNA的表达及其意义

背景与目的:脑胶质瘤极少发生颅外转移,死亡的主要原因是肿瘤的原位复发,因此,通过检测基因表达进一步了解其生物学特性很重要。本研究旨在探讨胶质瘤组织中肿瘤转移抑制基因(non-metastasis,nm23)、增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的表达及其对肿瘤恶性程度的判断、患者预后评估和复发预测的意义。方法:用免疫组化SP法测定50例不同恶性程度的胶质瘤组织中nm23、PCNA的表达情况。结果:(1)低度恶性胶质瘤标记指数(labelindex,LI)nm23为3.40±0.27,PCNA为3.60±0.05;高度恶性胶质瘤nm23LI为1.72±0.18,PCNALI为6.20±0.23,有显著性差异(P<0.05);(2)25例低度恶性胶质瘤中nm23阳性14例(56%),PCNA阳性16例(64%);而25例高度恶性胶质瘤中nm23阳性3例(12%),PCNA阳性22例(88%)。低度和高度恶性胶质瘤两组nm23、PCNA表达阳性率有显著性差异(P<0.05);(3)复发组9例,无nm23阳性者(0%),PCNA全部阳性(100%),未复发组8例,4例nm23阳性(50%),4例PCNA阳性(50%),两组nm23、PCNA的表达阳性率均有显著性差异(P<0.05);(4)胶质瘤nm23与PCNA的标记指数呈负相关(r=-0.5335,P<0.001)。结论:(1)nm23的表达随胶质瘤恶性程度增加而下降;(2)PCNA的表达随胶质瘤恶性程度的增加而升高;(3)nm23、PCNA可作为胶质瘤恶?

聚醚醚酮在颅骨缺损个体化重建手术中的应用

目的探讨新型颅骨修补材料——聚醚醚酮(PEEK)进行个体化颅骨重建手术的方法及效果。方法回顾性分析6例颅骨缺损需行重建手术病人的资料,先行头颅CT薄层扫描,数据采集后将其转化生成颅骨缺损区PEEK植入物模型图,经医生确认满意后交付生产。按常规方法显露颅骨缺损区,将PEEK植入物直接放置于缺损区表面,周边用钛连接片和钛钉固定。结果 6例颅骨缺损病人均采用PEEK材料进行个体化颅骨重建手术,效果和外观均极为满意,未出现任何不良反应。结论 PEEK是一种半晶体-热可塑材料,具有优异的抗高温性、耐化学性和抗疲劳性,具有极好的强度、硬度和韧性,即使被外力碰撞也不会出现局部凹陷或变形。PEEK材料进行个体化颅骨重建手术可达到极为满意的美学效果。缺点是制作过程较长,且价格昂贵。

延长垂直下斜方肌岛状肌皮瓣修复颅颌面软组织缺损

目的：探讨延长垂直下斜方肌岛状肌皮瓣修复颅颌面巨大软组织缺损的临床效果。方法：对4例累及颅底的颌面部恶性肿瘤患者(男3例,女1例,年龄36～63岁,平均51岁)行颅面根治术,颅面软组织缺损用颈横动脉供血的延长垂直下斜方肌岛状肌皮瓣修复,皮瓣蒂长为32～34cm,皮岛长8～12cm,宽5～7cm。结果：除1例皮瓣远端小部分坏死外,其余皮瓣全部成活,供区皮肤直接拉拢缝合,无明显肩臂功能障碍。术后随访3～12个月(平均7．3个月),1例术后6个月肿瘤复发,1例术后12个月死于肺转移。结论：延长垂直下斜方肌肌皮瓣制作较简单,效果可靠,瓣足够大,可用于颅面根治术后大面积软组织缺损的修复。

光动力法制备DC胶质瘤疫苗抗肿瘤作用的研究

目的:研究光动力法(photodynamic therapy,PDT)处理后,用酸洗法获取C6胶质瘤细胞的抗原肽,制备树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗,诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)在体外杀伤C6细胞的活性,以及PDT对C6胶质瘤细胞免疫原性的直接影响。方法:自大鼠骨髓分离DC前体细胞于体外诱导、扩增获得成熟DC。C6细胞经PDT处理后,对尚贴壁的细胞以酸洗法获取其表面抗原,从上清液中提取全细胞抗原,未作PDT处理的C6细胞以酸洗或冻融法提取抗原。分别以这4种抗原致敏DC,制成DC疫苗接种SD大鼠后,取脾作CTL的体外杀伤活性测定。结果:用PDT处理后酸洗法获得的抗原刺激DC成熟的能力最强,它制备的DC疫苗诱导的CTL的体外杀伤率最高,为(95.5±1.6)%,而光照后上清组为(90.2±2.4)%,酸洗组为(73.3±2.7)%,冻融组为(63.6±4.9)%,PBS对照组为0。结论:PDT能直接增强肿瘤细胞的免疫原性,用酸洗法获取PDT处理后的肿瘤细胞的抗原肽制备DC疫苗是一种有前景的新方法。

逆转录病毒介导的Flt-1M基因对大鼠胶质瘤的治疗作用

目的观察Flt-1M基因治疗对大鼠胶质瘤血管形成及肿瘤生长的影响。方法将转染了pLXSN-Flt-1M的产病毒细胞注入大鼠额叶胶质瘤瘤体内。随后处死动物,检测肿瘤的直径、微血管密度及凋亡细胞。结果肿瘤的微血管密度和直径都较对照组明显降低,而凋亡细胞则显著增多。结论Flt-1M基因治疗对大鼠胶质瘤具有显著的抗血管形成和抗肿瘤生长作用。

脑星形细胞瘤临床综合治疗分析

目的评价脑星形细胞瘤手术加放疗的疗效。方法 1990年1月～1999年1月共收治48例经病理证实的脑星形细胞瘤,经手术切除后常规使用榄香烯化疗及外照射治疗。结果 3～5年生存率分别为85.4%、60.4%、45.8%。影响疗效的因素是肿瘤切除程度、肿瘤病理分级、联合化疗、放疗等。结论手术、化疗与放射治疗综合治疗可提高脑星形细胞瘤的5年生存期。

“自体血清+鸡尾酒法”诱导外周血DC成熟的研究

目的比较三种不同的分离诱导外周血树突状细胞(DC)成熟的方法。方法取正常成人外周血约180ml,分成三组。分离单核细胞后,经典脂多糖(LPS)诱导组(A组):接种于含RPMI1640+胎牛血清完全培养基的25cm2培养瓶中,2h后弃悬浮细胞,将贴壁单核细胞,用粒-巨噬细胞集落刺激因子和白介素4培养,培养到第6天时加入LPS诱导24h;鸡尾酒诱导组(B组):单核细胞的培养同A组,培养到第6天时用细胞因子组合(1000U/ml肿瘤坏死因子、10ng/ml白介素6、10ng/ml白介素1β、1μg/ml前列腺素E2)诱导24h;自体血清+鸡尾酒诱导组(C组):单核细胞用RPMI1640+10%自体血清完全培养基培养,诱导方法同B组。用流式细胞仪检测各组收集的DC细胞成熟表型CD80、CD86、CD83以及白细胞表面抗原HLA-DR的表达;动态观察各组细胞成熟过程中形态的改变以及其激活淋巴细胞增殖的能力。结果C组DC成熟过程中形态好、突起多;其成熟表型CD86、CD83、CD80以及HLA-DR的平均表达率分别是(88.60±6.34)%、(50.55±4.03)%、(73.89±6.15)%、(93.24±7.78)%,明显高于A、B组(P<0.05);激活淋巴细胞增殖指数为2.03,亦明显高于A、B组(P<0.05)。结论自体血清+鸡尾酒诱导法是一种简单、方便、经济的外周血DC分离诱导成熟的新方法。

脑挫裂伤患者脑脊液ApoE多态性与周围脑组织水肿的关系

目的探讨脑挫裂伤患者脑脊液载脂蛋白E基因(ApoE)多态性与周围脑组织水肿的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片段多态性(PCR-RFLP)技术检测36例脑挫裂伤患者ApoE基因型频率,根据CT片计算脑水肿指数,统计学分析它们之间的关系。结果脑水肿指数与ApoE3呈负相关,而与ApoE4呈正相关,两者都具有统计学意义,脑挫裂伤患者脑脊液ApoE3和ApoE4与周围脑组织水肿具有相关性。结论脑挫裂伤患者脑脊液ApoE多态性可能是影响周围脑组织水肿的因素之一。

光动力疗法与免疫疗法在肿瘤治疗中的联合应用

近年来．光动力疗法（photodynamic therapy．PDT）在胶质瘤治疗中日渐得到重视．并且随着对中枢神经系统和胶质瘤免疫学特性研究的深入．发现中枢神经系统并非以前认为的“免疫特赦器官”．免疫疗法大有可为。在研究PDT中人们发现，PDT治疗肿瘤时所引发的免疫反应对于控制肿瘤的复发起着至关重要的作用．而这种免疫反应机制复杂，几乎涉及免疫系统的各个方面。因此每一个方面都可能成为一个切人点．可以设计用相应的免疫疗法针对性地与PDT相结合．从而增强PDT激发的抗肿瘤免疫作用．减弱或抑制其引起的免疫抑制反应。

水通道蛋白AQP9在帕金森病脑组织中的表达及作用

目的观察大鼠帕金森病(Parkinson’disease,PD)水通道蛋白9(aquaporin 9,AQP9)在脑组织中的表达变化,研究AQP9在帕金森病脑组织发病机制中的作用。方法制造帕金森病动物模型,应用HE染色、免疫组织化学、RT-PCR等方法观察大鼠脑组织AQP9表达变化。结果免疫组织化学和RT-PCR检测结果显示,帕金森病组脑组织AQP9和AQP9mRNA的表达呈动态变化过程,帕金森病组大鼠术后各时间点(除外术后2周时间点)在鼠左侧黑质致密部(SNC)及中脑腹侧被盖区(VTA)区AQP9和AQP9mRNA表达均比假手术组高。结论高表达的AQP9,可能通过调节水电解质与能量代谢,从而在帕金森病发病机制中起重要作用。

血卟啉单甲醚光动力治疗对人胶质瘤细胞U87-MG抗原加工相关转运体1的影响

目的 观察光动力学疗法（PDT）对人胶质瘤细胞株U87-MG抗原加工相关转运体1（TAP1）表达的影响.方法 CCK-8法确立光敏剂最适浓度.实验随机分为5组：A、B、C、D组细胞与光敏剂避光孵育2h后,接受激光照射,能量密度分别0、1.2,2.4A.2J/cm2；E组未予处理（无光敏剂、无激光）.PDT后2、12 h分别收集细胞,实时定量聚合酶链反应（realtime-PCR）检测；12、24 h提取蛋白,进行Western blot分析.结果 处理后TAP1基因转录水平明显升高：2h时,1.2、2.4A.2 J/cm2组分别上调11.070、5.925、4.175倍；12h时,分别上调10.400、4.560、4.023倍.TAP1蛋白在PDT后12 h,0、1.2、2.4、4.2 J/cm2组分别上调1.17、2.65、1.92、1.37倍；24 h,分别上调1.13、2.43、2.38、2.09倍,差异有统计学意义（P〈0.01）.结论 PDT上调TAP1基因的转录和表达,并呈剂量依赖性和时间依赖性,从而增强肿瘤细胞抗原处理及提呈能力.