肿瘤的生物治疗与分子靶向治疗

在肿瘤的治疗过程中,我们不光要把眼光对准局部异常生长的肿瘤细胞,还要努力纠正存在的全身性缺陷。生物治疗正是从这一角度来寻求自身的定位和价值。

DNA-PK的活性与鼻咽癌细胞株CNE1/CNE2放射敏感性的关系(英文)

本文土要研究DNA依赖的蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)与鼻咽癌细胞放射敏感性之间的关系。克隆形成实验分析鼻咽癌细胞CNE1/CNE2的剂量存活曲线,Signa TECT DNA-PK试剂盒检测DNA-PK活性,免疫荧光及激光显微共聚焦分析放疗前及放疗后15min、1h、6h、12h和24h CNE1/CNE2细胞中Kus及DNA-PKcs的亚细胞定位,Western blot分析两株细胞中Kus蛋白的表达。结果显示:CNE1细胞在每个剂量点的存活分数均高于CNE2细胞;同时发现放疗前后CNE1细胞中的DNA-PK活性也均高于CNE2细胞,但两株细胞中Ku70/Ku80蛋白表达无明显差异;放疗可使DNA- PK活性增加,且各个检测时间点CNE1细胞增加的幅度大于CNE2细胞;DNA-PK亚基可同时定位于胞浆和胞核,但主要位于胞核,细胞照射后Ku70、Ku80和DNA-PKcs从胞浆转运到胞核。结果表明:DNA-PK活性更高可能足CNE1细胞较CNE2细胞更能抵抗放射的原因之一;放疗所致DNA-PK活性增高可能与DNA-PK亚基从胞浆转运到胞核有关,而与Ku蛋白表达的总量无关。

开环及闭环羟基喜树碱对口腔鳞癌细胞株抗癌作用的研究

背景与目的:羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)的抗癌活性与其内酯环(包括闭环和开环)密切相关,但关于闭环HCPT和开环HCPT的抗癌活性仍有争议,研究已显示开环HCPT对口腔鳞癌具有明显的体内外抑制作用,本文比较开环及闭环HCPT对口腔鳞癌细胞株Tca8113的体内外抗瘤作用及其作用机理。方法:采用开环及闭环HCPT处理Tca8113细胞及其裸鼠移植瘤,MTT法及流式细胞仪(FCM)检测HCPT对Tca8113细胞的细胞毒作用及对细胞周期的影响;观察经HCPT处理后Tca8113细胞移植瘤的生长状态,计算肿瘤倍增时间和抑瘤率;高效液相色谱仪检测裸鼠血浆及移植瘤中HCPT的浓度,计算药代动力学参数。结果:开环及闭环HCPT对Tca8113细胞具有相同的强杀伤作用,FCM检测显示小于1μmol/LHCPT可将细胞阻滞在S期和G2/M期,100μmol/LHCPT则诱导细胞凋亡。与对照组比较,HCPT组移植瘤生长减慢,倍增时间延长,肿瘤抑制率分别为69.6%(3mg/kg开环HCPT)、65.0%(3mg/kg闭环HCPT)和74.1%(10mg/kg开环HCPT)。腹腔注射10mg/kgHCPT后裸鼠血浆曲线下面积分别为2.66μg·h·ml-1(闭环HCPT)和0.42μg·h·ml-1(开环HCPT),肿瘤组织中可检测到HCPT。HCPT3mg/kg组未见明显的毒副作用,开环HCPT10mg/kg组可见明显的胃肠道反应,闭环HCPT10mg/kg组所有裸鼠死亡。结论:开环及闭环HCPT均对口腔鳞癌细胞具有强的体内外细胞毒作用,其机理与阻断细胞于S期和G2/M期以及诱导细胞凋亡有关,但闭环HCPT毒性较开环HCPT毒性大。

p53通路相关基因和EZH2在鼻咽癌中的表达关系及意义

目的探讨p53通路相关基因p53、mdm2、p63蛋白和EZH2在鼻咽癌中的表达关系和意义。方法用免疫组化法检测47例鼻咽未分化癌及12例慢性鼻咽炎中p53、mdm2、p63和EZH2蛋白的表达状况并分析其与临床参数、预后,以及相互关系。结果 p53、mdm2、p63及EZH2蛋白在鼻咽癌的阳性表达率分别为31.9%,85.1%,95.7%;mdm2、EZH2与p53蛋白的表达无关,EZH2与p63蛋白的表达呈正相关,p53与p63蛋白的表达呈正相关;EZH2和p63蛋白的高表达与T分期和临床分期的升高有关(P<0.05);EZH2蛋白的高表达组的五年无疾病生存率明显低于低表达组(P<0.05)。结论在鼻咽癌中mdm2的表达可能与p53蛋白失活的关系不大,p63蛋白的过表达可能与p53蛋白的失活有关,EZH2的过表达与鼻咽癌的进展及不良预后有关。

全身照射治疗中的半导体剂量监测

对患者进行照射现场中的剂量监测是放射治疗质量保证和质量控制的最有效的措施之一,文章结合工作实践,探讨如何有效地进行X射线全身照射过程中的半导体剂量监测。

放疗技术差错与质量控制

文章针对放疗技术摆位的过程中常出现的问题,分析其主、客观原因,在借鉴现有质量控制措施和总结作者实践经验的基础上,提出放疗技术质量控制思路。

基于GEPIA2和Oncomine数据库分析ITGA6基因在卵巢癌中的表达及意义

目的基于GEPIA2数据库和Oncomine数据库分析ITGA6基因在卵巢癌中的表达及意义。方法检索GEPIA2和Oncomine数据库中关于卵巢癌的数据集,并结合文献资料进行二次综合分析。对比卵巢癌与正常对照组织间ITGA6表达的差异,并利用GEPIA2数据库进行在线生存分析。结果Oncomine数据库中共收集了359项ITGA6在不同癌症与正常组织中表达对比的研究结果,表达差异有统计学意义的有81项,其中50项呈高表达,31项呈低表达。共有7项研究涉及ITGA6在卵巢癌与正常组织中的表达对比,共包括1043个肿瘤样本。与正常对照组相比,卵巢癌中的ITGA6呈显著的高表达(P<0.001)。利用GEPIA2数据库分析发现,ITGA6与卵巢癌的预后生存(总生存和无病生存)无相关性(P>0.05)。结论尽管ITGA6的表达与卵巢癌的预后无显著相关性,但是其在卵巢癌中的显著高表达,使其可作为卵巢癌分子成像及基因药物研制的靶标。

树突状细胞与肾癌融合细胞疫苗诱导抗肿瘤免疫

目的探讨自体树突状细胞(DC)与肾癌融合细胞疫苗诱导特异性抗肿瘤免疫应答。方法利用肿瘤细胞纯化技术,从手术切除的肾癌组织中分离出高纯度的肾癌细胞,用10%胎牛血清(FCS)的RPMI-1640进行原代培养。分离外周血单核细胞(PBMCs),在含重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和白细胞介素4(rhIL-4)的培养条件下,诱导分化为DC。用细胞融合技术将DC与肾癌细胞融合制备DC与肾癌融合细胞疫苗。用流式细胞仪检测肾癌细胞、DC和融合细胞的表型;用噻唑盐(MTT)比色法检测融合细胞刺激自体T细胞的增殖能力,乳酸脱氢酶(LDH)释放的细胞毒实验检测融合细胞刺激的细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)的杀瘤活性。结果DC高表达主要组织相融性复合体(MHC)Ⅰ类分子、MHCⅡ类分子和共刺激分子(CD86,CD80);原代肾癌细胞高表达一种高分子量的糖蛋白(MUC-1);自体DC与肾癌融合细胞疫苗同时表达肾癌细胞和DC细胞的表面抗原,并能有效刺激自体T细胞增殖,诱导产生的CTLs对自体肾癌细胞具有显著的杀伤活性。结论自体DC与肾癌融合细胞疫苗能诱导特异性抗自体肾癌细胞的免疫应答,为自体DC与肾癌融合细胞疫苗在治疗肾癌的临床应用中提供了实验依据。

膜型基质金属蛋白酶-1对乳腺癌细胞浸润能力的影响

目的研究膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)对乳腺癌细胞株浸润能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法用20μg/ml刀豆素(ConA)刺激乳腺癌细胞株MDA-MB-453,促使其表达MT1-MMP蛋白,并用免疫细胞化学和Western blot法检测;然后加入外源性MMP-2原酶(proMMP- 2),并用明胶酶谱分析法检测proMMP-2被激活的情况;最后用侵袭实验检测细胞株的浸润能力。实验中将细胞株分为4组:空白对照组、ConA组、MMP-2组和ConA+MMP-2组,各组实验结果进行对比分析。结果利用ConA刺激后,ConA组和ConA+MMP-2组的细胞均表达MT1-MMP蛋白,另两组无MT1-MMP蛋白表达。明胶酶谱分析实验发现,MMP-2组只检测到72 000原酶形式的MMP-2, ConA+MMP-2组同时检测到72 000原酶形式和64 000活酶形式的MMP-2,其余两组检测不到任何形式MMP-2。侵袭实验结果显示,ConA+MMP-2组细胞穿过Marigel胶的细胞数目明显多于其他组。结论MT1-MMP能显著增强乳腺癌细胞株的浸润能力,其机制主要是通过激活MMP-2原酶,降解肿瘤周围的基质成分实现的。

SMILE方案治疗复发难治NK／T细胞淋巴瘤的初步临床报告

目的探索SMILE方案治疗NK／T细胞淋巴瘤的疗效和不良反应。方法2006年11月至2008年2月，5例初治和5例复发NK／T细胞淋巴瘤患者接受SMILE方案（甲氨蝶呤、异环磷酰胺、左旋门冬酰胺酶、依托泊苷等）化疗。1例患者进一步接受了自体外周血造血干细胞支持下的超大剂量化疗，2例患者进一步接受局部放疗。结果10例患者中有8例可以评价疗效，总有效率50％（4／8），无完全缓解。其中初治和复发患者有效率均为50％。主要不良反应为骨髓抑制及氨基转移酶升高，其中Ⅲ-Ⅳ度粒细胞减少占65％，发热性粒细胞减少占25％，Ⅲ度氨基转移酶升高占10％，其他不良反应少见，无治疗相关死亡。26．1％患者由于严重的不良反应中止治疗。结论SMILE治疗复发耐药的NK／T细胞淋巴瘤有一定疗效，但不良反应明显，目前尚不能作为复发难治NK／T细胞淋巴瘤的标准一线方案。

膜型基质金属蛋白酶-1在乳腺癌中表达的预后价值

目的探讨膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)蛋白在乳腺癌中表达的临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测106例乳腺癌患者手术标本中MT1-MMP蛋白的表达;用统计学软件SPSS11.0作为统计分析的工具,MT1-MMP表达与临床病理因子的关系用卡方检验和Pearson等级相关分析检验;预后分析采用Kaplan-Meier检验CoxRe-gression。结果乳腺癌组织中MT1-MMP蛋白表达阳性率为62.3%,表达强度在不同分期和不同淋巴结转移数目患者间差异有统计学意义且呈正相关(P<0.050),在不同大小肿瘤间及在ER、PR和HER-2不同表达的患者间差异无统计学意义。MT1-MMP阴性患者与弱至中度阳性或强阳性患者间的无病生存期比较,MT1-MMP(-)为65.0%,MT1-MMP(+～■)为27.1%,MT1-MMP(■)为27.8%,差异有统计学意义(P<0.050)。不同MT1-MMP免疫组织化学染色强度患者的7年生存率也明显不同,MT1-MMP(-)为77.5%,MT1-MMP(+～)为60.4%,MT1-MMP()为50.0%,差异有统计学意义(P<0.050)。根据不同分期和不同淋巴结转移状态分层分析发现,MT1-MMP蛋白不同表达强度的患者预后差异有统计学意义(P<0.050);根据不同肿瘤大小的分层分析发现,不同MT1-MMP表达强度的T2期和T4期患者预后差别有统计学意义(P<0.050),但T1和T3期患者预后没有差别。多因素分析显示MT1-MMP是有意义的预后因子,MT1-MMP强阳性患者死亡风险增加2倍,弱到中度阳性患者死亡风险增加1.3倍。结论MT1-MMP的表达与乳腺癌侵袭转移有关,MT1-MMP是乳腺癌的预后因子。

面罩制作对鼻咽癌放射治疗相邻照射野衔接的影响

[目的]探讨在鼻咽癌放射治疗模拟定位过程中,面罩制作对耳前野与颈切线野之间衔接的影响。[方法]将准备进行鼻咽癌放疗计划设计的病人随机分成两组,A组病人用平常模拟定位设计的办法并摄取定位片;B组病人待面膜制作完成后起身休息片刻,再进行照射野的设计工作并摄取定位片。两组病人在照射野设计完成后,再以颈切线野的设计条件重新摄取一张体位验证片,将同一病人颈切线野的定位片与验证片进行比较。[结果]A组共有病例34例,发生体位偏差>±2mm的有13例,占38.2%;B组共有病例30例,发生偏差>±2mm的仅有4例,占13.3%,两组差异有统计学意义。B组病人的耳前野与颈切线野有较好的衔接。[结论]热塑面膜是一种很好的体位固定工具,但不能忽略它具有的收缩性能,在模拟定位时尽量将面膜的制作与照射野的设计分步进行,以减少不必要的误差产生。

胃癌免疫治疗的进展

胃癌是发病率及病死率极高的恶性肿瘤，化疗及靶向治疗等晚期胃癌的治疗方案非常有限。免疫治疗是抗肿瘤治疗的新生力量。目前研发的药物主要靶向CTLA-4及PD-1 /PD-L通路，Ipilimumab（全人源化的抗CTLA-4抗体）、Pembrolizumab（全人源化的抗PD-1抗体）和Nivolumab（全人源化的抗PD-1抗体）等数种药物已顺利通过临床试验，并被FDA批准用于黑色素瘤和非小细胞肺癌的治疗。多项临床试验正在验证这些药物在包括晚期胃癌在内的各种晚期实体瘤中的疗效。针对晚期胃癌或胃食管结合部腺癌的临床试验（KEYNOTE-012）发现，对于PD-L1阳性的晚期胃癌患者，抗PD-1治疗初步看来是一种安全有效的选择。此外，多项针对过继性细胞治疗和肿瘤疫苗治疗胃癌的临床试验也正在进行中。本文将对晚期胃癌免疫治疗方面的最新进展进行综述。

结直肠癌肝转移的分子机制研究进展

结直肠癌是全球高发恶性肿瘤之一,严重威胁人类健康。肝转移是造成结直肠癌患者死亡的最主要原因,但其发生机制尚不明确。我们以结直肠癌发生肝转移的关键步骤为主线,综合分析了参与调控该过程的相关基因和信号通路,试图为探索结直肠癌肝转移治疗提供新的思路和理论基础。