红花黄色素上调miR-140-5p影响IL-1β诱导的骨关节炎软骨细胞自噬、凋亡及炎性因子分泌的机制研究

目的探讨红花黄色素对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的骨关节炎软骨细胞自噬、凋亡及炎性因子的影响和机制。方法将关节软骨细胞分成对照组、模型组(10 ng·mL^(-1)IL-1β处理)、实验组(10 ng·mL^(-1)IL-1β和20 mg·L^(-1)红花黄色素处理)、实验组+Anti-miR-NC组(转染inhibitor control后,20 mg·L^(-1)红花黄色素和10 ng·mL^(-1)IL-1β处理)、实验组+Anti-miR-140-5p组(转染miR-140-5p inhibitor后,20 mg·L^(-1)红花黄色素和10 ng·mL^(-1)IL-1β处理)。用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测miR-140-5p表达,用噻唑蓝(MTT)法检测增殖,用流式细胞术检测凋亡,用蛋白质印迹法(Western blot)方法检测Beclin-1蛋白表达,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果对照组、模型组、实验组、实验组+Anti-miR-NC组和实验组+Anti-miR-140-5p组的骨关节炎软骨细胞中miR-140-5p表达量分别为1.00±0.11,0.42±0.05,0.86±0.09,0.89±0.10和0.43±0.06;这5组的细胞存活率分别为(100.00±13.64)%,(57.35±6.24)%,(86.20±9.56)%,(85.57±9.31)%和(70.22±7.15)%;这5组的细胞凋亡率分别为(6.12±0.05)%,(27.36±3.59)%,(11.20±1.40)%,(10.86±12.47)%和(17.54±1.62)%;这5组的Beclin-1/GAPDH分别为0.82±0.09,0.36±0.04,0.65±0.04,0.63±0.06和0.42±0.06。以上指标,模型组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组+Anti-miR-140-5p组与实验组+Anti-miR-NC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论红花黄色素上调miR-140-5p促进IL-1β诱导的骨关节炎软骨细胞自噬,减少细胞凋亡和炎症因子分泌。