PGC-1α通过上调SIRT3表达发挥心肌保护作用

【目的】探讨第III类组蛋白去乙酰化酶成员3(SIRT3)在过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子1α(PGC-1α)的调控下发挥改善心肌肥大和心肌能量代谢的作用。【方法】建立血管紧张素II(Ang II)诱导的心肌肥大模型;利用质粒转染诱导PGC-1α基因过表达、si RNA干扰敲低SIRT3表达;Western blot检测PGC-1α、SIRT3及心肌肥大标志蛋白肌球蛋白重链β(β-MHC)的水平。TMRE染色法测定线粒体膜电位;测定ATP含量;DHE染色法测定活性氧水平;q RT-PCR法检测线粒体编码基因、能量代谢相关基因的表达水平。【结果】过表达PGC-1α能够显著提高SIRT3的蛋白表达水平和酶活性(P<0.05)。过表达PGC-1α抑制Ang II诱导的β-MHC上调(P<0.05),增加ATP水平(P<0.05),促进线粒体编码基因的转录水平(P<0.05),降低细胞内活性氧(P<0.05),上调脂肪酸氧化磷酸化代谢相关基因的表达(P<0.05)。SIRT3干扰可逆转PGC-1α的心肌保护作用(P<0.05)。【结论】PGC-1α通过上调SIRT3发挥调控心肌肥大、线粒体功能、活性氧清除、能量代谢等方面的作用。

RIP140通过抑制SIRT5表达介导心肌细胞能量代谢紊乱（英文）

【目的】探讨去琥珀酰化酶Sirtuin5(SIRT5)对受体相互作用蛋白140(RIP140)诱导的心肌线粒体能量代谢紊乱的影响。【方法】利用腺病毒感染心肌细胞诱导RIP140过表达,利用质粒转染诱导SIRT5基因过表达,si RNA干扰敲低RIP140、SIRT5表达;q RT-PCR和Western blot检测SIRT5、RIP140的表达变化;q RT-PCR检测线粒体编码基因的表达情况,TMRE染色法评估线粒体膜电位,试剂盒检测细胞耗氧和ATP生成情况。所有数据均来自至少3次的独立实验。【结果】过表达RIP140明显抑制SIRT5的表达(P<0.05);敲低内源性RIP140能增加SIRT5的表达(P<0.05)。过表达RIP140亦能诱导线粒体蛋白高度琥珀酰化,抑制SIRT5的去琥珀酰化酶活性。除此,RIP140能诱导线粒体功能紊乱和能量代谢损伤作用,表现为线粒体编码基因的表达抑制(P<0.05),线粒体膜电位降低(P<0.05),细胞耗氧和ATP合成减少(P<0.05),而过表达SIRT5能抑制RIP140介导的上述能量代谢损伤(P<0.05)。此外,SIRT5受RIP140的负性调控作用依赖于过氧化物增殖体激活受体α(PPARα)。【结论】RIP140通过抑制SIRT5诱导心肌细胞线粒体功能紊乱和能量代谢损伤。