荧光定量PCR快速检测食品中沙门氏菌方法的建立及初步应用

根据编码鼠伤寒沙门氏菌肠毒素stn基因的核苷酸序列设计1对引物和荧光探针,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立了检测沙门氏菌的核酸荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究结果显示,该方法检测沙门氏菌结果均为阳性,而非沙门氏菌均为阴性;对带有沙门氏菌肠毒素stn基因的阳性质粒的检测敏感性为4个/μL。用该方法对人工污染沙门氏菌的鲜猪肉和鲜鸡蛋进行检测,当检样中沙门氏菌初始含菌量分别为1 CFU/g(鲜猪肉)和1 CFU/g(鲜鸡蛋),经过12 h的增菌后,检测结果均为阳性。该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点。此研究为食品中沙门氏菌快速检测试剂盒的研制打下了良好的基础。

两种外周血淋巴细胞染色体显带方法的比较

目的比较两种外周血淋巴细胞染色体G显带方法的实际效果。方法制备人外周血淋巴细胞中期染色体标本,分别用GTG法和EDTA法进行处理后利用染色体自动分析系统观察,比较两种显带方法的利弊。结果GTG法深浅带带纹反差明显,但易出现显带不全、消化过头、分散度降低等问题。EDTA法不改变染色体分散度,不存在消化过头的问题,可利用核型多,可部分克服GTG法的不足,但此法所示带纹深浅带间反差不如GTG法明显。结论EDTA法显带染色体能基本满足辩识的要求,稳定性和可重复性较好,但在方法学上有进一步探索的必要,以提高染色体深浅带带纹反差。

应用荧光定量聚合酶链反应检测非典型尖锐湿疣HPV 6/11-DNA

目的探讨用FQ-PCR检测非典型尖锐湿疣HPV 6/11-DNA的可行性。方法采用FQ-PCR检测194例疑诊CA、107例单纯阴道炎、50例健康查体者的HPV6/11-DNA,同时对疑诊CA者进行病理组织学检测。结果194例疑诊CA样本,HPV 6/11-DNA的阳性率为77.83%(151/194),阳性标本DNA定量范围在1.4×10 cop ies/m l^1.78×107cop ies/m l,平均为1.27×106cop ies/m l;炎症组和正常对组均为0 copy/m l。病理组织学检测阳性率为70.10%(136/194),经χ2检验,FQ-PCR与病理组织学检测二者有显著性差异(χ2=4.787,P<0.05)。HPV6/11-DNA定量数值的高低与发病部位的多少有关(χ2=9.87,P<0.01),与CA的形态、大小、数量/部位及具体发病部位无关。结论FQ-PCR检测HPV 6/11-DNA,有助于正确判断尖锐湿疣和假性湿疣,HPV 6/11-DNA数值的高低可反应CA的严重程度。

炎琥宁联合清肺口服液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎的临床研究

目的观察及评估炎琥宁联合清肺口服液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎的临床疗效。方法将2013年12月至2015年12月期间我院收治的70例小儿呼吸道合胞病毒肺炎患儿作为本次研究对象,随机分为利巴韦林单用组与炎琥宁联合清肺口服液联合组,单用组35例患儿在常规治疗的基础上给予利巴韦林进行治疗,联合组35例患儿在常规治疗的基础上给予炎琥宁联合清肺口服液治疗,7 d为一疗程,比较两组疗效、T淋巴细胞亚群百分率、IL-4、IL-8、IFN-γ水平、RSV转阴时间。结果 (1)联合组患儿治疗总有效率为94.3%高于单用组82.9%(P<0.05);(2)治疗前两组患儿淋巴细胞亚群水平没有差异(P>0.05);治疗后联合组患儿CD4+水平高于单用组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);(3)治疗前两组患者IL-4、IL-8及IFN-γ水平没有差异(P>0.05);治疗后联合组患儿IL-4、IL-8显著低于单用组,IFN-γ水平高于单用组患者(P<0.05);(4)单用组治疗第3天及治疗第7天,RSV转阴率分别为20%及77.1%;联合组治疗第3天及治疗第7天时转阴率分别为51.4%及91.4%,组间比较差异显著(P<0.05)。结论炎琥宁联合清肺口服液中药组治疗儿童呼吸道合胞病毒肺炎具有理想的治疗效果,直接免疫荧光检测技术用于中医药治疗RSV肺炎RSV转阴检测,为临床判断治愈、停药时间、疗效评估提供可靠依据。