白细胞抗原G基因与肝癌肝移植的预后

背景:人类白细胞抗原G由非经典人类白细胞抗原Ⅰ类基因,其参与多种病理生理过程,尤其在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用,可能是肿瘤复发及转移的重要机制之一。目的:探讨人类白细胞抗原G在肝细胞肝癌组织中的表达及其在肝癌肝移植患者预后中的价值。方法:回顾性分析109例肝癌肝移植病例的临床资料,应用免疫组化方法检测其切除的肝癌组织和癌旁肝组织中人类白细胞抗原G的表达情况,并对患者进行移植后随访。应用Kaplan-Meier法计算累积生存率和无瘤生存率,采用Log-rank检验和Cox回归模型分别进行无瘤生存率单因素、多因素分析。结果与结论:肝癌组织有77例人类白细胞抗原G阳性表达,癌旁组织中20例。人类白细胞抗原G表达与肝癌直径(P<0.05)、病理分级(P<0.05)、血管侵犯显著相关性(P<0.05)。单因素分析显示人类白细胞抗原G表达(P<0.01)是影响肝癌肝移植后无瘤生存率的危险因素。Cox风险回归模型多因素分析发现,人类白细胞抗原G表达(P<0.05)是影响肝癌肝移植患者后无瘤生存率的独立危险因素。肝癌组织存在人类白细胞抗原G表达。人类白细胞抗原G表达是影响肝癌肝移植患者移植后无瘤生存率的独立危险因素。对人类白细胞抗原G表达患者采取干预治疗及严格筛选肝癌肝移植的适应证及可有效降低移植后肿瘤的复发率。

实时剪切波弹性成像评估兔急性肌肉损伤的实验研究

目的探讨实时剪切波弹性成像在评估兔急性肌肉损伤中的应用价值。方法选用健康成年雄性新西兰大白兔20只,将其中10只制作成急性肌肉损伤模型(损伤组),另10只为其对照(正常组)。应用实时剪切波弹性成像获取正常肌肉及损伤后12 h、1 d、3 d、5 d、7 d及14 d的杨氏模量平均值(Emean)和最大值(Emax),并在各时间点穿刺活检,比较两组上述各指标。结果损伤组损伤区肌肉各时间点Emean和Emax均显著高于正常组的Emean和Emax,差异均有统计学意义(F=10.216、11.286,均P=0.000),且于损伤后第1天最高[(45.00±7.45)kPa和(59.16±8.08)kPa],之后呈逐渐下降趋势。病理结果提示各时间点炎症细胞浸润程度比较差异有统计学意义(χ~2=46.588,P=0.000),以损伤后第1天炎症细胞浸润程度最高,之后逐渐减少。结论实时剪切波弹性成像能很好地观察兔急性肌肉损伤和修复的变化,有望为临床评估肌肉损伤提供可靠的依据。

吻合器痔上粘膜环切术(PPH)并发症的防治

目的探讨吻合器痔上粘膜环切术(PPH)并发症的原因及防治策略。方法回顾性分析本院自2002年1月至2008年10月PPH治疗的90例重度痔病患者并发症发生情况。结果术后出血6例、尿潴留43例、肛门部疼痛17例、痔粘膜回缩不良2例,术后精细控便障碍1例,并发肛瘘1例;无吻合口感染、肛门狭窄、大便失禁、痔复发、直肠阴道瘘病例。结论PPH术具有疗效好,恢复快、疼痛少的优点,但PPH存在多种并发症。严格掌握手术适应症、加强围手术期处理,可减少并发症的发生。

白细胞抗原G在结肠癌中的表达及意义

目的研究结肠癌切除标本中远癌组织、癌旁组织及癌组织白细胞抗原G(HLA-G)蛋白表达情况,探讨HLA-G在结肠癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP法,检测HLA-G蛋白在结肠癌远癌组织、癌旁组织及癌组织的表达情况。结果癌组织与癌旁组织、远癌组织比较具有统计学意义(P<0.01),癌旁组织与远癌组织比较具有统计学意义(P<0.01)。HLA-G与结肠癌血管侵犯、淋巴结转移及临床病理分期有关(P<0.01),而与性别、年龄、肿块大小、肿块部位、癌胚抗原(CEA)水平及组织学分级无关。结论 HLA-G在结肠癌中高表达。HLA-G在血管侵犯组、淋巴结转移组及临床分期较晚组表达显著升高,这些因素可能与结肠癌的侵袭和转移有关。

腹腔镜胆总管切开探查一期缝合治疗肝外胆管结石29例

目的探讨运用腹腔镜纤维胆道镜联合对肝外胆管结石进行切开探查取石及一期缝合的临床价值和治疗经验。方法回顾性分析增城市人民医院以及广东医学院附属医院2012年1月至2014年1月选择性运用腹腔镜联合胆道镜探查取石一期缝合治疗肝外胆管结石29例。结果 29例手术均获成功,无中转开腹;手术时间55-165 min,平均（95±22）min。术中出血5-45 ml,平均（20±11）ml。术后1-2 d拔除引流管,全部治愈出院,术后平均住院时间为（7.5±0.7）d。术后随访复查6-12个月,无残余结石、胆瘘及其他严重并发症。结论严格选择性运用腹腔镜联合胆道镜探查取石一期缝合切实可行、安全、可靠,有条件的医疗单位可对适宜的病例选择性地进行推广应用。

肿瘤干细胞表面标志物CD133在肝细胞肝癌组织中的表达及其与肝移植患者预后的关系

目的探讨肿瘤干细胞表面标志物分化群抗原（CD）133在肝细胞肝癌（肝癌）组织中的表达及其与肝移植患者预后的关系。方法本回顾性研究的109例肝癌组织标本来源于2004年1月至2007年12月在中山大学附属第三医院肝移植中心施行同种异体原位肝移植，组织病理学检查证实为肝癌的手术切除标本，另取41例肝穿刺正常肝组织作为正常对照。收集109例肝癌患者的临床病理学资料，并对其进行术后随访，收集患者存活时间，肿瘤复发、转移及死亡情况的随访资料。所有患者均签署知情同意书，符合医学伦理学规定。应用免疫组织化学方法检测109例肝癌组织和41例正常肝组织中CD133的表达水平，分析CD133阳性表达与患者年龄、性别、甲胎蛋白（AFP）、外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）、肿瘤直径、肿瘤数量、分化程度、血管侵犯等肝癌临床病理学参数的关系。应用Kaplan—Meier法计算患者移植后存活率，应用Log—rank检验比较各参数对存活率的影响。结果全组肝癌患者均接受随访，随访时间6～77个月。随访期间肿瘤复发37例，复发部位分别为肝内24例、肺部6例、腹腔3例、全身多发性转移或骨转移4例。随访期间死亡40例，分别死于肿瘤复发35例、胆道并发症3例、肺部感染和急性粒细胞白血病各1例。肝癌组织中CD133阳性表达44例，阳性率为40．4％，正常肝组织无CD133表达，比较差异有学意义（P〈0．01）。CD133阳性表达与肿瘤直径、肿瘤分化程度有关（均为P〈0．05）。CD133阳性组患者肝移植的1、3、5年存活率明显低于CD133阴性组患者（χ2=8．008，P〈0．05）。结论肝癌组织存在CD133表达，CD133阳性表达的肝癌肝移植患者预后较差。

罗格列酮抑制胰腺癌细胞侵袭和转移的机制

目的 观察胰腺癌细胞是否存在过氧化物酶体增殖剂激活受体γ（PPARγ）/第10 号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）/基质金属蛋白-9（MMP-9）信号通路,以及基因PTEN和MMP-9 的变化,探讨罗格列酮对胰腺癌细胞侵袭和转移的机制.方法 培养人胰腺导管上皮癌细胞（PANC-1）,经40μmol/L PPARγ配体罗格列酮和10μmol/L抑制剂GW9662 处理24h后,用细胞的活力测定[四唑氮化合物（MTS）法]测胰腺癌细胞活力,用伤口愈合实验和基质胶（Matrigel）体外侵袭实验检测细胞的迁移能力,用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞PTEN 和MMP-9 mRNA的相对表达.结果 罗格列酮对PANC-1胰腺癌细胞的增殖具有抑制作用,且呈剂量依赖性,明显抑制胰腺癌细胞侵袭和转移,增加（2.51±0.05）倍PTEN mRNA,减少（0.39±0.02）倍MMP-9 mRNA;而GW9662无此作用.结论 胰腺癌细胞可能存在PPARγ/PTEN/MMP-9信号通路,通过上调PTEN和下调MMP-9的表达,来抑制胰腺癌细胞的侵袭和转移.

肝癌白细胞抗原-G的表达及其在肝癌肝移植预后中的价值

目的探讨人类白细胞抗原-G(human leukocyte antigen-G,HLA-G)在肝细胞肝癌组织中的表达及其在肝癌肝移植患者预后中的价值。方法回顾性分析2004年1月至2008年5月期间中山大学附属第三医院肝移植中心收治的83例肝癌肝移植患者的临床资料。应用免疫组化方法检测肝细胞肝癌组织及其癌旁组织中HLA-G的表达情况,应用Kaplan-Meier法计算累积生存率和无瘤生存率,采用log-rank检验和Cox回归模型分别进行无瘤生存率单因素和多因素分析。结果 83例肝癌肝移植患者中,35例(42.2%)肿瘤复发。全部病例1、3和5年累积生存率分别为97.2%、89.8%和43.1%,1、3和5年无瘤生存率分别为93.6%、68.9%和38.7%。肝癌组织中HLA-G表达阳性率(68.7%)明显高于癌旁组织(15.7%,P<0.01)。HLA-G的表达与肿瘤直径、病理分级和血管侵犯有关(P<0.05)。单因素分析显示,影响肝癌肝移植术后无瘤生存率的危险因素有HLA-G表达(P<0.01)、肿瘤直径(P<0.05)、肿瘤侵犯血管(P<0.01)及病理分化程度(P<0.01)。HLA-G表达阳性组移植后的无瘤生存率低于HLA-G表达阴性组(P<0.01)。Cox风险回归模型结果表明,HLA-G表达(P<0.05)、肿瘤侵犯血管(P<0.01)及病理分化程度(P<0.05)是影响肝癌肝移植患者术后无瘤生存率的独立危险因素。结论肝癌组织存在HLA-G表达。HLA-G表达、肿瘤侵犯血管及病理分化程度是影响肝癌肝移植患者术后无瘤生存率的独立危险因素。对HLA-G表达阳性患者采取干预治疗及严格筛选肝癌肝移植的适应证可有效降低术后肿瘤的复发率。

人类白细胞抗原-GRNA干扰载体的构建及效应检测

目的构建表达人类白细胞抗原-G(HLA-G)基因shRNA载体,探讨其对NK细胞杀伤效应的影响。方法构建4个HLA-G-shRNA真核表达质粒,瞬时转染至人肝癌Bel-7402细胞,检测HLA-G mRNA和蛋白水平的表达。将NK-92MI细胞(效应细胞)与转染后的Bel-7402细胞(靶细胞)共同培养,以LDH释放法观察不同效靶比时NK-92MI细胞对靶细胞的杀伤效应。结果经酶切及测序鉴定证实,插入序列与设计的序列相符。RT-PCR和Western blot结果均表明重组载体抑制了Bel-7402细胞HLA-G基因的表达。NK-92MI细胞对转染HLA-GshRNA的Bel-7402细胞杀伤作用明显增强(P<0.01)。封闭NK-92MI细胞KIR2DL4受体后,杀伤作用减弱(P<0.01)。结论成功构建了HLA-G shRNA载体,下调HLA-G可以增强NK细胞对肝癌细胞的杀伤效应,HLA-G与NK细胞表面KIR2DL4受体结合后,向NK细胞传递抑制效应。