姜黄素对人视网膜色素上皮细胞增殖和VEGF表达的影响

目的探讨姜黄素对人视网膜色素上皮(hRPE)细胞增殖和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法(1)采用不同浓度(5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL)的姜黄素干预hRPE细胞1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d,同时设置空白对照组(不给予姜黄素干预)。采用CCK-8法检测各时间点不同浓度姜黄素对hRPE细胞增殖的影响,采用流式细胞仪检测各时间点各组细胞周期时相分布情况。(2)将hRPE细胞分为姜黄素组和对照组,姜黄素组加入10μg/mL的姜黄素,对照组加入等体积培养液,采用实时荧光半定量PCR检测各组hRPE细胞VEGF mRNA的表达水平。结果(1)各浓度姜黄素对hRPE细胞均有抑制作用(均P<0.05),且随着药物浓度的增大、作用时间的延长,其抑制率呈升高趋势,整体呈现剂量和时间依赖性。(2)不同浓度姜黄素干预后,G_(0)/G_(1)期细胞比例均大于空白对照组,S期细胞比例和G_(2)/M期细胞比例均小于空白对照组(均P<0.05)。(3)姜黄素组hRPE细胞VEGF mRNA表达水平低于对照组(P<0.05)。结论姜黄素可以将hRPE细胞周期阻滞于S期从而抑制hRPE细胞的增殖,还可以降低hRPE细胞的VEGF表达水平。

姜黄素纳米微粒的制备及其对人视网膜色素上皮细胞周期的影响

目的探讨壳聚糖脱氧胆酸负载姜黄素纳米微粒的制备方法,观察姜黄素纳米微粒对人视网膜色素上皮细胞周期的影响。方法以脱氧胆酸基接枝的壳聚糖为载体,姜黄素为负载药物合成姜黄素纳米微粒,测定纳米微粒的负载率与载药量。观察纳米微粒的外形结构,测定其体外释放量。检测不同浓度的壳聚糖脱氧胆酸纳米粒作用于人视网膜色素上皮细胞24、48 h光密度(OD)值,同时观察其细胞形态。测定姜黄素纳米微粒及姜黄素对人视网膜色素上皮细胞周期时相变化。结果姜黄素与壳聚糖脱氧胆酸混合制成负载药物的壳聚糖脱氧胆酸纳米微粒为淡黄色,未负载药物的壳聚糖脱氧胆酸纳米微粒呈类球形或球形,平均粒径为30~50 nm,负载姜黄素的壳聚糖脱氧胆酸纳米微粒粒径为70~100 nm;载药量为27.5%,负载率为55.0%。96 h后药物从纳米微粒中的释放达到平衡,药物的累积释放量达31.6%。不同浓度的壳聚糖脱氧胆酸纳米微粒作用于人视网膜色素上皮细胞24、48 h后OD值与对照比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各浓度姜黄素纳米微粒与姜黄素分别对体外培养的人视网膜色素上皮细胞作用24 h后,均出现S期细胞百分比下降,G_(0)~G_(1)期细胞百分比上升。结论通过壳聚糖脱氧胆酸包载的姜黄素纳米微粒能持续释放出姜黄素,缓释功能较好。姜黄素纳米微粒可以阻滞人视网膜色素上皮细胞周期于S期。

姜黄素对翼状胬肉成纤维细胞抑制作用的研究

目的研究姜黄素对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞（human pterygium fibroblasts HPF）增殖的影响,探索翼状胬肉防治新方法。方法用0~80μg/mL姜黄素作用体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞,观察24~96h后不同浓度姜黄素对人翼状胬肉成纤维细胞的影响。CCK-8法检测细胞生长活性,流式细胞仪检测细胞周期时相变化。结果在0~80μg/mL浓度作用24~96h范围内,姜黄素可以抑制HPF细胞的增长,且呈剂量和时间依赖性。0、10、20、40、80μg/mL姜黄素作用24h后,姜黄素作用组均出现G0-G1期细胞百分比上升,S期细胞百分比下降,且姜黄素对成纤维细胞的抑制作用呈剂量依赖性。结论姜黄素可抑制体外培养人翼状胬肉成纤维细胞增殖。

姜黄素纳米粒对人视网膜色素上皮细胞的示踪研究

目的:探讨脱氧胆酸基接枝的壳聚糖衍生物负载姜黄素纳米粒的合成方法及该药物纳米粒对人视网膜色素上皮(hRPE)细胞的作用。方法:合成姜黄素/壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒并分析其性能。将负载荧光染料异硫氰酸荧光素的壳聚糖-脱氧胆酸及姜黄素/壳聚糖-脱氧胆酸作用于hRPE细胞24h后,于倒置荧光显微镜下观察避光培养1、3、5d后二者与hRPE细胞的相互关系。结果:通过将姜黄素与壳聚糖-脱氧胆酸混合制成负载药的壳聚糖衍生物纳米粒为淡黄色;药物从纳米粒中的释放在96h后达到平衡,累积释放药物量为31.6%。异硫氰酸/壳聚糖-脱氧胆酸与hRPE细胞作用1d后,壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒大部分仍位于近细胞膜的部位;作用3d后,纳米粒逐渐向细胞核会聚,且大部分位于细胞核周围;作用5d后,可看到壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒已进入细胞核,且纳米粒可能在细胞内溶酶体的作用下有部分降解。姜黄素/壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒和hRPE细胞作用的关系与壳聚糖-脱氧胆酸大致相同。结论:通过壳聚糖-脱氧胆酸包载的姜黄素纳米粒能持续释放出姜黄素,具有较持久的缓释功能。

FP-7Ahmed青光眼引流阀治疗新生血管性青光眼的临床效果

目的评价FP-7Ahmed青光眼引流阀治疗新生血管性青光眼的初步临床效果。方法回顾性病例系列研究。收集2009年1月至2010年6月住院行FP-7Ahmed青光眼引流阀植入术治疗的36例（36只眼）新生血管性青光眼患者临床资料，进行回顾性分析。患者随访时间为术后1d、1周、1个月及之后的每3个月随访1次。随访内容主要包括患者术后眼压、最佳矫正视力、应用抗青光眼药物种类数及并发症等。手术成功标准为完全成功和条件成功。手术后不同时间点的眼压比较采用重复测量资料的方差分析，手术前后应用抗青光眼药物种类数比较采用秩和检验。结果患者术前眼压（39．5±9．7）mmHg（1mmHg=0．133kPa）；术后1d、1周、1个月、3个月及末次随访眼压分别为（19．2±8．9）、（11．8±3．8）、（13．7±4．8）、（16．9±5．3）及（16．9±6．8）mmHg。不同时间点的眼压比较，采用重复测量的方差分析，差异有统计学意义（F=9．26，P〈0．05）。术前应用抗青光眼药物1—6种，平均4种；术后应用抗青光眼药物0—3种，平均1种，术前后比较差异有统计学意义（Z=6．764，P〈0．05）。FP-7Ahmed引流阀植入术完全成功率80．6％，条件成功率91．7％。术后并发症主要包括引流管阻塞、引流管暴露、浅前房及引流盘周围包裹性囊状泡，对症处理后眼压均可控制。结论FP-7Ahmed青光眼引流阀植入术具有安全有效、并发症少等优点，可以作为新生血管性青光眼患者的首选治疗方式之一。

维替泊芬光动力疗法治疗息肉状脉络膜血管病变的随访观察

目的观察维替泊芬光动力疗法（photodyrnamic therapy，PDT）对息肉状脉络膜血管病变（polypoidal choroidal vasculopathy，PCV）的1年治疗效果。方法9例（10只眼）经眼底彩照、荧光素眼底血管造影（fundus fluorescein angiography，FFA）和吲哚青绿血管造影（indocyanine green angiography，ICGA）确诊的PCV患者，进行常规的PDT治疗，治疗后随访第2周、1月、3月、6月、1年，观察治疗前后的视力、眼底彩照、FFA和（或）ICGA。结果PDT治疗后1年视力提高3只眼，视力稳定6只眼，1只眼PDT治疗后出血吸收第2月复发黄斑区出血视力下降；1只眼治疗后第2周出现严重视网膜下出血，随访后渐吸收，其余患眼底出血、渗出均吸收消失。第3个月造影检查渗漏停止7只眼，3只眼轻微渗漏，末次随访3只眼仍轻微渗漏。PDT治疗过程无一例出现严重全身并发症。结论PDT是一种安全有效的PCV治疗方法，可以短期内减轻或封闭异常血管的渗漏，促进出血、渗出吸收，稳定或提高患者视力，个别患者治疗后出现严重网膜下出血能自行吸收。