低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞环状RNAs的生物信息学分析

目的采用生物信息学方法预测低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞环状RNAs相对应的miRNA及其靶基因,并分析靶基因所参与的生物学过程和信号通路。方法用Arraystar公司的商业软件为环状RNAs预测其相对应的miRNAs,分别用targetScan7.1和mirdbV5数据库预测miRNAs的靶基因,并取两个预测结果的合集,应用在线网站http://www.geneontology.org和http://www.genome.ad.jp/kegg对靶基因进行功能富集分析和信号通路富集分析。结果功能富集分析表明,circRNAs的靶基因主要涉及到细胞发育、细胞分化和细胞发育调控。东京基因和基因组百科全书信号通路富集分析表明肿瘤中转录失控和有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路最有意义,而且分析发现MAPK信号通路为核心通路。本研究表明,低氧预处理使得间充质干细胞中部分circRNAs的表达量发生差异性变化。结论低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞环状RNAs同低氧预处理间充质干细胞的生物学特性变化密切有关,为了解低氧预处理影响间充质干细胞特性发生变化的分子机制提供新思路。

建立靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统及其应用

目的构建靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统,并应用于HEK 293T细胞系。方法设计两对靶向CXCR7基因的sgRNAs,分别插入PX458载体中,并转化DH5α大肠埃希菌。经菌液PCR和测序验证,挑选序列正确的sgRNA-CXCR7-PX458质粒,转染HEK 293T细胞,用流式分选转染阳性细胞,提取其DNA,PCR扩增后测序验证。结果经测序验证,成功构建了靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9系统,转染HEK 293T细胞后,测序鉴定发现成功编辑CXCR7基因。结论成功构建了靶向CXCR7的sgRNA-CXCR7-PX458质粒,可在HEK 293T上成功编辑CXCR7基因,为进一步的功能研究奠定基础。

2014年广州市新生儿登革热12例临床特点分析并文献复习

目的探讨新生儿登革热病例的临床表现和实验室检查特征。方法回顾性分析2014年广东省妇幼保健院和中山大学附属广州市妇女儿童医学中心收治的新生儿登革热共12例的临床资料，并进行相关文献复习。结果12例登革热患儿男9例，女3例；年龄生后30min～29d，发病年龄为生后30rain-24d。（1）临床特征：发热11例，皮疹6例，出血点1例，黄疸5例，咳嗽l例，凝血功能异常2例。（2）母亲围产期情况：确诊登革热7例，疑似登革热2例，排除登革热3例。母亲产前发热8例。（3）实验室检查：血小板减少11例（19×10^9-156×10^9／L），部分活化凝血酶原时间延长11例（44．0～89．8s），纤维蛋白原降低5例（1．17—3．02g／L），天冬氨酸转氨酶（AST）升高5例（28～78U／L），肌酸激酶同工酶（CK．MB）升高4例（13—86U／L），低钾血症1例（2．8—5．1mmoL／L），C反应蛋白（CRP）增高6例（0．04—46．05mg／L）。（4）治疗及预后：输注血小板2例，抗感染6例，静脉注射丙种球蛋白治疗5例，住院时间4～17d，10例治愈，2例病情好转后自动出院。以“新生儿登革热”为关键词，在万方、维普、CNKI全文数据库中检索国内文献，未见相关报道。以“neonataldengue”“casereport”作为关键词通过Pubmed检索1990至2014年的文献，共检索到15篇文献，其中报道的30例登革热病毒感染患儿均为母婴垂直传播，主要的临床表现有发热、皮疹、瘀斑、贫血、黄疸、心率增快、肝肿大；实验室检查均可见血小板减少，经抗感染、输注血小板及对症治疗，30例患儿均治愈。结论新生儿登革热临床表现以发热、凝血功能障碍为主。临床症状较轻缺乏特异性，预后良好。母婴垂直传播是感染登革病毒传染途径之一。

低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞环状RNA筛选

目的探讨环状RNA在人胎盘绒毛膜间充质干细胞低氧预处理和常氧培养中表达谱的差异。方法利用芯片技术检测3例低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞及其相应对照的常氧培养细胞的环状RNA表达,分析两者差异表达的环状RNA及其结合mi RNA。结果在检测的13 617条环状RNA中,有分析结果的环状RNA12 114条,低氧和常氧培养人胎盘间充质干细胞差异表达环状RNA共102条,其中低氧中表达上调的85条,下调的17条(倍数变化>1.5倍且P<0.05),而表达差异倍数变化大于2倍以上的环状RNA有27条,且均为上调表达。每个环状RNA预测到5个结合mi RNA。结论低氧预处理使得人胎盘绒毛膜间充质干细胞的环状RNA表达谱发生了显著变化,这些环状RNA可能和低氧预处理有关。

人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养的新方法

建立一种简便、快捷的人胎盘绒毛膜间充质干细胞(human placental chorionic-derived mesenchymal stem cells,hpc MSCs)分离培养方法。用手持电动匀浆器处理人绒毛膜,经酶消化后接种培养,用倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8测定细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面标记,成脂、成骨诱导分化试剂盒鉴定细胞的分化潜能。获得的人胎盘绒毛膜间充质干细胞为成纤维细胞样细胞,呈平行排列或漩涡状生长,高表达CD73、CD105、CD90,而CD34、CD45、CD14、CD19、HLA-DR呈阴性,生长曲线为"S"型,经成骨或成脂诱导后,茜素红染色或油红O染色呈阳性。符合国际细胞治疗学会认可的间充质干细胞标准。建立了人胎盘绒毛膜间充质干细胞的分离培养新方法,结合了组织块法和酶消化法的优点,为绒毛膜间充质干细胞的应用提供基础。

儿童重症脑炎液体疗法

儿童重症脑炎液体疗法是保护脑功能、治疗脑损伤和促进康复的基础措施,包括水的出入平衡、钠平衡与晶体内环境平衡,胶体内环境、体液疗法与循环稳定的关系等。为达到遵循传统的经验,遵守以病理和病理生理变化为基础的共性原则,更要注重在特殊病情下个体化治疗的原则。本文就儿童重症脑炎病理生理依据、维持治疗原则,避免因医源性水、电解质紊乱、循环波动造成的继发性脑损伤等问题进行阐述。

儿童重症有机酸 氨基酸代谢障碍常见临床表现及处理

儿科重症监护室(PICU)中原发或继发有机酸、氨基酸代谢障碍性疾病并不少见,其临床表现复杂多样。原发者多数在新生儿期、婴幼儿期起病,均起病急、病情危重。继发者多在其他原发病危重状态下发病。但由于缺乏特异性症状与体征,常常被漏诊或误诊。儿科医生应重视对该类疾病的认识,提高对该类疾病的诊治水平。本文就小儿重症有机酸、氨基酸代谢障碍常见临床表现及处理做一阐述。

3例新生儿社区登革热感染临床分析

回顾性分析2014年广东省妇幼保健院和中山大学附属广州市妇女儿童医疗中心收治的社区感染新生儿登革热3例的临床资料。3例登革热患儿均为男性,出生22~29 d,发病时间为出生后20~24 d。临床特征:发热3例,皮疹2例,出血点1例,均为休克表现;传播途径:有明确蚊虫叮咬1例,登革热患者密切接触史1例。实验室检查:血小板减少3例(42×10~9/L^98×10~9/L),白细胞增高2例(5.6×10~9/L^13.8×10~9/L),凝血功能、肝功能、心肌酶、C-反应蛋白(CRP)均正常。经抗感染、静脉注射丙种球蛋白治疗,住院时间4~10 d,均治愈出院。资料显示社区新生儿登革热感染临床表现以发热、血小板减少为主,临床症状较轻,缺乏特异性,预后良好。

孕晚期及产时应用生育舞蹈对产妇分娩结局的影响研究

目的探讨在孕晚期及产时应用生育舞蹈对分娩结局的影响。方法将助产士门诊就诊者中自愿参加生育舞蹈训练的98例孕妇作为实验组,采用随机数字表抽取同期不参加生育舞蹈训练的120例孕妇作为对照组。实验组怀孕28周以后每周于医院内参加生育舞蹈课程,同时在家中保证每周至少练习3次生育舞蹈,临产后至少每小时活动1次,直至第二产程胎儿娩出;对照组采用常规的孕期保健及临产后指导方法。比较两组分娩方式、产程时间、新生儿1 min Apgar评分、早产发生率。结果实验组98例完成研究,对照组用随机数字表剔除15例,剩余98例与实验组匹配。实验组剖宫产率、第一产程及总产程持续时间均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两组第二、三产程持续时间,新生儿1 min Apgar评分,早产发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在孕晚期及产时应用生育舞蹈降低了剖宫产率,缩短第一产程及总产程时间,可促进自然分娩,且较为安全。