EZH1/2抑制剂UNC1999对外周血免疫细胞表型的影响

【目的】探讨EZH1/2抑制剂UNC1999对外周血免疫细胞表型的影响。【方法】用CCK-8法检测UNC1999作用于外周血单个核细胞(PBMC)后的细胞存活率;多色流式细胞术分析免疫细胞表型。【结果】相比对照组,UNC1999组经典型单核细胞(CD14^(++)CD16^(−))比例上调[(19.53±1.79)%vs.(66.60±5.02)%,t=13.31,P=0.006],中间型单核细胞(CD14^(++)CD16^(+))和非经典型单核细胞(CD14^(+)CD16^(+))比例下调[(35.08±3.97)%vs.(15.42±2.89)%,t=6.130,P=0.026;(35.50±3.53)%vs.(8.40±3.12)%,t=25.740,P=0.002];CD56^(dim)CD16^(+)、CD56^(dom)CD16^(+)NK细胞亚群比例下调[(3.39±0.86)%vs.(0.27±0.06)%,t=4.882,P=0.040;(80.50±0.64)%vs.(0.63±0.23)%,t=133.100,P<0.0001];初始B细胞比例上调[(10.67±1.76)%vs.(37.99±3.76)%,t=17.690,P=0.003],记忆B细胞、过渡B细胞、浆细胞比例下调[(23.39±4.20)%vs.(11.82±1.90)%,t=7.059,P=0.020;(3.58±0.47)%vs.(1.52±0.56)%,t=26.970,P=0.001;(0.18±0.03)%vs.(0.00±0.00)%,t=8.647,P=0.013];DC比例上调[(0.20±0.05)%vs.(1.38±0.13)%,t=16.500,P=0.004],其中pDC/DC下调[(24.90±1.95)%vs.(12.70±2.11)%,t=7.566,P=0.017],mDC/DC上调[(32.41±13.14)%vs.(60.87±8.43)%,t=8.252,P=0.014];CD8^(+)T细胞亚群中CD8^(+)中枢记忆T细胞、CD8^(+)PD-1^(+)比例上调[(5.62±1.24)%vs.(18.38±2.34)%,t=15.600,P=0.004;(2.50±1.02)%vs.(18.34±2.69)%,t=8.822,P=0.013],CD8^(+)效应记忆T细胞比例下调[(28.27±10.15)%vs.(15.62±9.48)%,t=19.480,P=0.003];CD4^(+)T细胞亚群中CD4^(+)CD27^(+)比例下调[(82.77±2.66)%vs.(56.00±9.01)%,t=5.715,P=0.029]。其余细胞亚群差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】UNC1999可以改变PBMC免疫细胞表型。

胰岛移植治疗胰腺移植术后移植物失功一例

近年,胰岛移植因其分离技术和移植方案的进步,已成为糖尿病晚期根治性治疗的有效方法,也成为胰腺移植失败后可靠的补救手段。我们对一例胰肾联合移植术后移植胰腺失功切除后患者,施行了补救性的同种异体胰岛移植,取得了较好疗效,现汇报并探讨如下。

胰肾联合移植术后11年并发胆囊结石行腹腔镜切除胆囊一例

患者男，41岁，因右上腹部不适并超声发现胆囊结石3年，急性胆囊炎伴呕吐、腹泻间断性发作1年，于2016年6月入院。患者于2005年1月因“1型糖尿病肾病伴肾功能衰竭”在我院行胰肾联合移植术，术程顺利，术后常规口服抗排斥药物并定期复查。患者近5年出现慢性肾功能减退，

吲哚菁绿清除试验在肝移植后肝功能评估中的价值

目的研究吲哚菁绿15min滞留率（retention rate of indoeyanine green at 15 minutes,ICG R15 ） 与肝移植术后肝功能恢复的相关性。方法回顾性分析2015年3月～12月实施的62例肝移植受者的临床资料，分析ICG R15与常规肝功能指标的关系，采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）计算Youden指数，获取具有最佳敏感度和特异度组合的ICG R15值作为ICG R15分组的界值，将受者分为高ICG R15组（ICG R15〉9％）和低ICGR15组（ICGR15≤9％）。采用Logistic回归多因素分析研究ICGR15对早期肝功能不全的影响。结果肝移植术后1、3、5、7、14d的ICGR15与相应时间点的血清胆红素总量（r=0．816，P〈0．001）、前白蛋白（r=-0．359，P〈0．001）、白蛋白（r=-0．312，P=0．001）、终末期肝病模型（MELD）评分（r=0．612，P〈0．001）显著相关，并且高ICGR15组的急性排斥反应发生率（x2=4．654，P=0．031）显著高于低ICGR15组。单因素及多因素分析显示ICGR15是早期肝功能不全的独立危险因素。结论肝移植术后ICG R15作为一项简便且有效的独立预后指标，可用来判断肝移植术后受者的预后状况。

预存供者特异性抗人类白细胞抗原抗体肾移植临床分析

目的分析预存供者特异性抗人类白细胞抗原抗体(DSA)肾移植的受者临床特征和移植效果。方法回顾性分析中山大学附属第一医院2011年1月至2019年10月预存DSA并经脱敏治疗行肾移植手术的16例受者资料。观察预后指标,包括受者和移植肾存活率、DSA水平变化、术后排斥反应发生情况及治疗预后。结果肾移植术后随访1~52个月,中位随访时间13个月。术后8例受者发生排斥反应,发生率50.0%。其中抗体介导的排斥反应(AMR)5例(31.3%),T细胞介导排斥反应(TCMR)2例(12.5%),亚临床排斥反应1例(6.3%)。其中1例受者术后发生排斥反应,病理确诊为AMR,术后6个月因并发重症感染导致多器官功能衰竭而死亡;1例受者术后病理确诊AMR,术后1个月发生移植肾破裂,后行移植肾切除术,术后维持血液透析治疗;其余14例受者移植肾功能恢复良好。受者1年存活率93.8%,死亡删失的移植肾1年存活率93.3%。结论肾移植术前预致敏产生DSA,经脱敏治疗后,可获得较好肾移植效果。

胰肾联合移植八例早期疗效观察

目的探讨器官捐献胰肾移植术后受者早期疗效。方法8例胰肾联合移植手术，受者均为糖尿病肾病患者。供者8例，其中男性6例，女性2例，供者年龄为（26±10）岁（15-42岁）。供者中4例为中国过渡时期脑-心双死亡器官捐献，3例为国际标准化脑死亡器官捐献，1例为国际标准化心死亡器官捐献。供、受者血型相同。结果8例受者均于术后4～6h清醒，8～14h撤除呼吸机；术后2～3d从外科重症监护病房转回普通病房开始正常康复治疗。术后血清C肽、胰岛素水平在1～2周内达正常范围，血糖在术后2～3周恢复正常；肌酐在术后1～2周内降至正常范围。其中，1例受者术中出现十二指肠肠壁血肿，遂切除移植胰腺，其余受者均于2周内恢复胰腺及肾脏功能。结论器官捐献胰肾联合移植术后器官早期功能恢复良好，在术前严格评估下，年轻供者捐献器官可安全用于胰肾联合移植。

Gd—EOB—DTPA增强1．5T磁共振成像评估脑死亡供者供肝质量的研究

目的探讨钆乙氧基苯甲基二乙烯五胺乙酸（Gd-EOB-DTPA）增强1．5T磁共振成像（MRI）在脑死亡器官捐献（DBD）供者供肝功能评估中的应用价值。方法纳入2014年9月3日至2014年12月3日间DBD供者16例。前瞻性收集供者实验室检查结果，按照其终末期肝病模型（MELD）评分，分为肝功能正常（NLF）组（MELD评分≤10分）及肝功能不全（ILF）组（MELD评分〉10分）。对供者行Gd-EOB-DTPA增强扫描，比较两组间肝实质增强前后信号值、相对增强值、肝肾增强比及造影剂胆管显影时间的差异。最后，根据造影剂排泄时间将全部受者分为两组：延迟显影组（〉20min）与正常显影组（≤20min），分析两组受者术后肝功能恢复及预后的差异。结果NLF组及ILF组的肝实质增强值分别为1920．7±304．6和1523．5±376．0，相对增强值分别为（36．6±7．9）％和（21．9±6．7）％，肝肾增强比分别为49．5±14．1和31．2±17．4，以及造影剂排泄时间分别为（15．6±7．7）min和（28．8±9．1）min，两组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。16例受者全部得到随访，随访时间为术后90d。正常组无受者死亡，延迟组出现2例受者死亡。正常组受者术后7d内各项肝功能指标恢复较快。结论应用Gd-EOB-DTP增强1．5T MRI可有效评估DBD供者的供肝质量。

Wnt/β－catenin信号调控EMT水平对小鼠胚胎干细胞向肝脏组织结构分化的影响

目的在前期体外诱导小鼠胚胎干细胞（ESC）向肝系细胞分化基础上，从细胞上皮间质转化（EMT）角度研究ESC分化为肝脏组织结构的可行性。方法选用Balb/c小鼠ESC，首先利用肝细胞生长因子（HGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）等体外诱导ESC向肝系细胞方向分化，然后在分化中期（13 d）、成熟期（17 d）两个时间点动态抑制细胞Wnt/β－catenin信号以降低其EMT水平。最后在分化系统中观察分化细胞保持三维组织结构生长情况，检测其中肝系细胞和血管标志物白蛋白（ALB）、血管内皮生长因子（VEGFR）等表达情况，综合判断有无肝脏组织形成，并研究该过程中EMT水平变化的规律和机制。结果ESC分化过程中，分化前期实验组EMT水平与对照组差别不明显，分化中、后期实验组EMT水平较对照组明显降低，分化第18天和20天，实验组上皮钙黏蛋白（E－cad）基因mRNA相对表达水平分别为0.61±0.15和0.47±0.05，对照组分别为0.07±0.05和0；实验组的ALB/AFP/CK8/CK19表达水平在同期内较对照组普遍偏高，标志物CD31/VEGFR1在分化中后期较对照组下降缓慢。在ESC培养上清液中，实验组ALB于第11天可检测到，浓度为（0.32±0.02）mg/L，而对照组ALB为（0.19±0.05）mg/L；实验组尿素于第13天开始检测到，浓度为（8.7±1.0）μmol/L，对照组尿素浓度为（3.1±1.2）μmol/L。ALB和尿素合成在ESC分化系统培养上清中浓度随分化时间延长而明显升高，并且实验组的ALB、尿素浓度值在相同的时间段内明显多于对照组。另外，实验组分化细胞可保持三维组织状态生长，对照组分化细胞最终呈单细胞状态。实验组可检测到肝系细胞标志物以及血管细胞标志物的表达，免疫荧光结果显示类肝细胞和血管结构紧密层状排列，HE染色提示有类肝小叶结构形成，而对照组无血管成分标志物表达。结论ESC向肝系细胞分化中，在分化中、后期降低EMT水平，可有效促进ESC向肝脏组织结构分化。