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人小胶质细胞的分离、纯化、特异分子表达与吞噬功能研究
被引量:
8
1
作者
黄秀艳
曾耀英
+1 位作者
张彩
朱斌
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期939-944,共6页
目的:探讨人小胶质细胞(microglia)分离、纯化、培养及鉴定的方法,为深入研究小胶质细胞功能建立一种简便的、稳定的细胞模型。方法:取5个月人工药物引产的胎儿脑组织,将脑组织剪碎、研磨、过滤、离心获取混合胶质细胞悬液,用DMEM/F12...
目的:探讨人小胶质细胞(microglia)分离、纯化、培养及鉴定的方法,为深入研究小胶质细胞功能建立一种简便的、稳定的细胞模型。方法:取5个月人工药物引产的胎儿脑组织,将脑组织剪碎、研磨、过滤、离心获取混合胶质细胞悬液,用DMEM/F12完全培养基调整细胞密度为2×1010cells/L,接种于75cm2培养瓶中(记作first0d);7-10d后,进行第1次纯化。此次纯化采用轻柔摇动法将贴壁不牢的小胶质细胞和少突胶质细胞与底层的星形胶质细胞分离并转入另一培养瓶继续培养扩增(记作second0d);4-5d后,混合的小胶质细胞和少突胶质细胞汇合成片,采用胰酶-EDTA消化法结合差速贴壁法进行第2次纯化。此次纯化将消化得到的细胞悬液离心和重悬,接种于培养瓶(记作0h);2h后,小胶质细胞贴壁生长,少突胶质细胞依然漂浮在培养上清中,此时通过移走上清以去除少突胶质细胞,即得到高纯度的小胶质细胞;运用激光共聚焦显微镜技术、流式细胞术结合细胞表面或胞内免疫荧光抗体染色技术检测所分离的小胶质细胞CD45,CD11b和CD68的阳性率,以计算其纯度;通过吞噬荧光微球评价其吞噬功能;利用胞膜边缘波动(membrane ruffling)现象结合荧光标记的鬼笔环肽染色技术鉴定其活化水平。结果:我们所分离的小胶质细胞中,>98%的细胞表达CD45,CD11b和CD68,并且能够吞噬荧光微球。结论:我们成功地分离和纯化了人小胶质细胞,所得到的小胶质细胞高表达CD45,CD11b和CD68分子,并且具有很强的吞噬功能,为进一步进行其功能和蛋白质组研究奠定基础。
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关键词
小神经胶质细胞
CD68
吞噬作用
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职称材料
阿希米对阴道炎 宫颈糜烂疗效观察
被引量:
2
2
作者
林小慧
游泽山
张彩
《医药论坛杂志》
2005年第24期63-64,共2页
目的对女性阴道炎和宫颈炎采用阿希米治疗,观察治疗前后患者症状和体征的缓解情况。方法阴道炎患者289例,宫颈炎(宫颈糜烂)患者188例,用阿希米(片剂型)治疗。结果289例阴道炎的总有效率为97.9%,188例宫颈炎的总有效率为92.0%。使用后无...
目的对女性阴道炎和宫颈炎采用阿希米治疗,观察治疗前后患者症状和体征的缓解情况。方法阴道炎患者289例,宫颈炎(宫颈糜烂)患者188例,用阿希米(片剂型)治疗。结果289例阴道炎的总有效率为97.9%,188例宫颈炎的总有效率为92.0%。使用后无不良反应。结论阿希米(片剂型)使用方便,治疗阴道炎、宫颈炎疗效较好,无不良反应,不产生交叉感染,可进行临床推广。
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关键词
阴道炎
宫颈糜烂
纳米银
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职称材料
题名
人小胶质细胞的分离、纯化、特异分子表达与吞噬功能研究
被引量:
8
1
作者
黄秀艳
曾耀英
张彩
朱斌
机构
暨南
大学
组织移植与免疫研究中心
中山大学
附属
第一
医院
妇产科
(
黄埔
院区
)
广州市番禺区何贤纪念
医院
产科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期939-944,共6页
基金
“973”国家重点基础研究资助项目(No.2004CB720100
No.2006CB504201)
广州市科技计划资助项目(No.2006Z1-E0091)
文摘
目的:探讨人小胶质细胞(microglia)分离、纯化、培养及鉴定的方法,为深入研究小胶质细胞功能建立一种简便的、稳定的细胞模型。方法:取5个月人工药物引产的胎儿脑组织,将脑组织剪碎、研磨、过滤、离心获取混合胶质细胞悬液,用DMEM/F12完全培养基调整细胞密度为2×1010cells/L,接种于75cm2培养瓶中(记作first0d);7-10d后,进行第1次纯化。此次纯化采用轻柔摇动法将贴壁不牢的小胶质细胞和少突胶质细胞与底层的星形胶质细胞分离并转入另一培养瓶继续培养扩增(记作second0d);4-5d后,混合的小胶质细胞和少突胶质细胞汇合成片,采用胰酶-EDTA消化法结合差速贴壁法进行第2次纯化。此次纯化将消化得到的细胞悬液离心和重悬,接种于培养瓶(记作0h);2h后,小胶质细胞贴壁生长,少突胶质细胞依然漂浮在培养上清中,此时通过移走上清以去除少突胶质细胞,即得到高纯度的小胶质细胞;运用激光共聚焦显微镜技术、流式细胞术结合细胞表面或胞内免疫荧光抗体染色技术检测所分离的小胶质细胞CD45,CD11b和CD68的阳性率,以计算其纯度;通过吞噬荧光微球评价其吞噬功能;利用胞膜边缘波动(membrane ruffling)现象结合荧光标记的鬼笔环肽染色技术鉴定其活化水平。结果:我们所分离的小胶质细胞中,>98%的细胞表达CD45,CD11b和CD68,并且能够吞噬荧光微球。结论:我们成功地分离和纯化了人小胶质细胞,所得到的小胶质细胞高表达CD45,CD11b和CD68分子,并且具有很强的吞噬功能,为进一步进行其功能和蛋白质组研究奠定基础。
关键词
小神经胶质细胞
CD68
吞噬作用
Keywords
Microglia
CD68
Phagocytosis
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
阿希米对阴道炎 宫颈糜烂疗效观察
被引量:
2
2
作者
林小慧
游泽山
张彩
机构
中山大学
附属
第一
医院
妇产科
(
黄埔
院区
)
出处
《医药论坛杂志》
2005年第24期63-64,共2页
文摘
目的对女性阴道炎和宫颈炎采用阿希米治疗,观察治疗前后患者症状和体征的缓解情况。方法阴道炎患者289例,宫颈炎(宫颈糜烂)患者188例,用阿希米(片剂型)治疗。结果289例阴道炎的总有效率为97.9%,188例宫颈炎的总有效率为92.0%。使用后无不良反应。结论阿希米(片剂型)使用方便,治疗阴道炎、宫颈炎疗效较好,无不良反应,不产生交叉感染,可进行临床推广。
关键词
阴道炎
宫颈糜烂
纳米银
分类号
R711.32 [医药卫生—妇产科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人小胶质细胞的分离、纯化、特异分子表达与吞噬功能研究
黄秀艳
曾耀英
张彩
朱斌
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
8
下载PDF
职称材料
2
阿希米对阴道炎 宫颈糜烂疗效观察
林小慧
游泽山
张彩
《医药论坛杂志》
2005
2
下载PDF
职称材料
已选择
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