血浆置换在妊娠期重症肝病患者治疗中的应用价值

目的：探讨血浆置换在妊娠期重症肝病患者治疗中的作用及安全性。方法回顾性分析2009年3月至2013年11月在中山大学附属第三医院外科ICU接受诊治的28例妊娠期重症肝病患者临床资料。根据患者治疗方案分为治疗组与对照组，其中治疗组12例，年龄21～28岁，中位年龄25岁；对照组16例，年龄18～29岁，中位年龄24岁。所有患者均签署知情同意书，符合医学伦理学规定。入组患者均分娩后转入外科ICU，予以抗感染、抗病毒、护肝、利胆、补充人血白蛋白和丙种球蛋白、输注凝血物质等治疗。治疗组在上述治疗的基础上予以新鲜同型血浆置换治疗。比较两组临床检验指标和临床疗效，观察治疗组血浆置换后的不良反应情况。两组患者检验指标比较采用t检验，率的比较采用χ^2检验。结果治疗组患者治疗后血TB、ALB、Scr、空腹血糖（FPG）、凝血酶原活动度（PTA）和动脉血乳酸（Lac）分别为（197±69）μmol/L、（30±7）g/L、（111±42）μmol/L、（5.7±2.4）mmol/L、（55±24）%、（2.3±0.6）mmol/L，对照组相应为（299±113）μmol/L、（24±6）g/L、（165±82）μmol/L、（3.7±1.7）mmol/L、（33±11）%（、4.4±1.5）mmol/L，治疗组较对照组明显改善（t=-3.453，2.389，-4.892，2.798，6.079，-3.339；P〈0.05）。治疗组有效率为92%（11/12），明显高于对照组的56%（9/16）（χ2=4.215，P〈0.05）。治疗组患者中1例输注血浆后出现一过性低血压，予小剂量血管活性药物调控，1h后血压恢复正常。结论血浆置换能改善妊娠期重症肝病患者的临床检验指标，提高临床疗效，是一种安全、有效的治疗方法。

外科围手术期休克患者应用6%中分子羟乙基淀粉130/0.4的安全性初步研究

目的探讨6%中分子羟乙基淀粉(HES)130/0.4在外科围手术期休克患者中应用的安全性。方法回顾性研究2009年3月至2012年12月在中山大学附属第三医院外科重症监护病房(ICU)收治的279例围手术期休克患者临床资料。所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。根据患者发生休克48 h内有否应用6%HES 130/0.4,将患者分为HES组和白蛋白组。HES组患者168例,其中男109例,女59例;年龄(64±17)岁。白蛋白组患者111例,其中男72例,女39例;年龄(63±16)岁。所有患者进入外科ICU立即给予积极抗休克治疗。HES组患者以静脉输注6%HES 130/0.4作为主要补充的胶体液,白蛋白组以人血白蛋白作为主要补充的胶体液。观察两组患者病死率、急性肾损伤、新发的其他器官功能衰竭及皮肤不良事件的情况。计量资料两组间比较采用t检验或秩和检验;计数资料比较采用χ2检验。结果 HES组病死率为17.9%(30/168),白蛋白组病死率为17.1%(19/111),差异无统计学意义(χ2=2.01,P>0.05)。HES组患者中肾损伤危险期者占54.8%(92/168),肾损伤期者占34.5%(58/168),肾衰竭期者占10.7%(18/168);白蛋白组中分别占55.0%(61/111)、35.1%(39/111)、9.9%(11/111),差异均无统计学意义(χ2=1.98,1.82,1.04;P>0.05)。HES组中11.3%(19/168)患者需行肾脏替代治疗,白蛋白组相应为8.1%(9/111),差异有统计学意义(χ2=20.23,P<0.05)。HES组呼吸系统及血液系统衰竭发生率分别为26.8%(45/168)、5.4%(9/168),白蛋白组分别为25.2%(28/111)、5.4%(6/111),差异无统计学意义(χ2=1.07,2.30;P>0.05)。HES组的心血管系统衰竭发生率为36.3%(61/168),比白蛋白组的39.6%(44/111)明显降低,而肝衰竭发生率为2.4%(4/168),比白蛋白组的1.8%(2/111)明显升高(χ2=43.71,17.25;P<0.05)。两组患者的皮肤不良反应主要表现为皮肤红斑、皮疹、瘙痒。HES组皮肤不良反应发生率为4.8%(8/168),白蛋白组为4.5%(5/111),差异无统计学意义(χ2=1.78,P>0.05)。结论应用6%HES 130/0.4治疗外科围手术期休克患者并不能降低患者病死率,反而增加患者接受肾脏替代治疗的几率。

肝移植术后新发恶性肿瘤的发生和防治(附九例报告)

目的：探讨肝移植术后新发恶性肿瘤的危险因素和防治措施。方法回顾性研究2003年10月至2008年12月在中山大学附属第三医院肝移植中心行肝移植且接受完整随访的416例中9例新发恶性肿瘤患者临床资料。其中男7例，女2例；年龄30～60岁，中位年龄57岁。术前有吸烟史4例、长期二手烟接触史3例，1例有肝细胞癌（肝癌）家族史。所有患者均签署知情同意书，符合医学伦理学规定。肝移植手术方式均为同种异体改良背驮式肝移植术，采用甲泼尼龙＋他克莫司（FK506）或环孢素（CsA）免疫抑制方案。患者术后接受随访，观察新发恶性肿瘤的发生、治疗、预后等情况。结果肝移植术后新发恶性肿瘤发生率为2.2%（9/416），其中消化系统恶性肿瘤3例、呼吸系统恶性肿瘤3例、血液系统恶性肿瘤2例、软组织肉瘤1例。肝移植至肿瘤确诊的时间为10～73个月，中位时间49个月。患者接受相应的手术治疗、放射治疗（放疗）、化学药物治疗（化疗）。5例术后免疫抑制剂转换为西罗莫司，4例FK506用量为肿瘤确诊前的半量。随访期间6例死亡，均死于肿瘤进展和多器官功能衰竭。确诊距死亡的时间为2～25个月，中位时间9个月。结论吸烟和免疫抑制剂的应用可能为肝移植术后新发恶性肿瘤发生的高危因素，进行规范化随访并针对高危因素早期防治是提高疗效的关键。

妊娠期急性脂肪肝患者的主要临床检验指标分析

目的探讨妊娠期急性脂肪肝患者的主要临床检验指标变化特点。方法回顾性研究2009年3月至2013年8月在中山大学附属第三医院接受诊治的26例妊娠期急性脂肪肝患者临床资料。根据患者临床结局分为好转组与未好转组。好转组20例,年龄18～30岁,中位年龄25岁;未好转组6例,年龄20～29岁,中位年龄24岁。所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。观察两组患者转入重症监护病房(ICU)24 h外周静脉血总胆红素(TB)、凝血酶原活动度(PTA)、血清肌酐(Scr)、空腹血糖(FPG)和动脉血乳酸(Lac)等主要临床检验指标的差异。两组患者主要临床检验指标的比较采用t检验。结果好转组转入ICU 24 h TB、PTA、Scr、FPG、Lac分别为(193±99)μmol/L、(48±17)%、(114±84)μmol/L、(5.7±2.9)mmol/L、(2.8±1.0)mmol/L,未好转组分别为(259±119)μmol/L、(37±14)%、(161±79)μmol/L、(4.7±2.6)mmol/L、(3.9±1.5)mmol/L,两组患者相应指标比较差异有统计学意义(t=-8.178,8.231,-11.913,7.541,-10.032;P<0.05)。结论妊娠期急性脂肪肝患者TB、PTA、Scr、FPG、Lac等主要临床检验指标异常,预后差者其异常更为明显。

人脐带间充质干细胞和他克莫司联合应用对T淋巴细胞增殖的影响

目的探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)和他克莫司(FK506)联用在体外对T淋巴细胞增殖的影响。方法脐带来自中山大学附属第三医院产科足月妊娠的健康剖宫产产妇,采用酶联合消化法分离hUC-MSC。根据处理方式不同分为hUC-MSC+T淋巴细胞组(MSC组)、FK506+T淋巴细胞组(FK506组)、hUC-MSC+FK506+T淋巴细胞组(联合组)、24 h延迟给药联合组(延迟联合组)、实验对照组(对照组)、空白对照组(空白组)。MSC组取1×104个hUC-MSC接种于96孔板,丝裂霉素C处理0.5 h后洗净,hUC-MSC:外周血单个核细胞(PBMC)按1∶10加入1×105个PBMC;FK506组取1×105个PBMC接种于96孔板,加入终浓度为10 ng/ml的FK506;联合组在MSC组基础上加入终浓度为10 ng/ml的FK506;延迟联合组为MSC组培养24 h再加入终浓度为10 ng/ml的FK506;对照组仅接种1×105个PBMC;空白组为丝裂霉素C处理后的1×104个hUC-MSC接种96孔板。各组均加入终浓度1μg/ml的植物血凝素(PHA),培养3 d,采用BrdU化学发光法,应用多功能酶标仪检测各组的发光度。各组发光度的比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果 MSC组发光度为(6.56±0.91)×106RLU/s,FK506组为(2.07±0.38)×106RLU/s,对照组为(9.53±0.72)×106RLU/s,MSC组和FK506组发光度明显低于与对照组,显示hUC-MSC和FK506均能明显抑制PHA刺激的T淋巴细胞增殖(LSD-t=-6.06,-15.21;P<0.05)。联合组发光度为(7.80±1.07)×106RLU/s,延迟联合组为(5.55±0.35)×106RLU/s,联合组发光度较MSC组明显升高,延迟联合组较MSC组明显降低,显示hUC-MSC和FK506同时加入共培养系统时,对于T淋巴细胞增殖的抑制作用,两者表现为明显拮抗效应,而延迟24 h加入共培养系统时,两者表现为明显的协同效应(LSD-t=2.53,-2.06;P<0.05)。结论单独使用hUC-MSC或FK506均能明显抑制T淋巴细胞增殖;两者联合应用时表现为拮抗效应;当延迟24 h加入FK506则表现为协同效应。

Cylex ImmuKnow免疫细胞功能检测在肝移植术后感染诊断中的价值

目的探讨Cylex Immu Know免疫细胞功能检测在肝移植术后感染诊断中的价值。方法前瞻性研究对象为2010年7月至2012年12月在中山大学附属第三医院肝移植中心接受同种异体原位肝移植术的48例患者。所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。根据肝移植术后有否临床感染将患者分为感染组(14例)、非感染组(34例),另设健康对照组(对照组,20例)。其中感染组男11例,女3例,平均年龄(47±10)岁;非感染组男29例,女5例,年龄(45±9)岁;对照组男10例,女10例,年龄(42±10)岁。患者肝移植术后7 d和对照组入组时,抽取外周静脉血2 ml,应用Cylex Immu Know免疫细胞功能测定试剂盒检测分化群(CD)4+淋巴细胞的三磷酸腺苷(ATP)含量,检测数据比较采用t检验。结果感染组、非感染组和对照组的ATP含量分别为(178±58)、(345±62)、(467±84)mg/L,感染组ATP含量明显低于非感染组(t=-4.6,P<0.05)。Cylex Immu Know免疫细胞功能检测诊断肝移植术后感染的灵敏度为0.79,特异度为0.85;阳性预测值为0.69,阴性预测值为0.91。结论 Cylex Immu Know免疫细胞功能检测能够简便、快速检测患者免疫细胞功能水平,对肝移植术后感染具有一定的监测和诊断价值。

糖原合成酶激酶3β抑制剂CHIR99021诱导人胚胎干细胞分化为限定性内胚层细胞

目的探讨糖原合成酶激酶(GSK)3β抑制剂CHIR99021诱导人胚胎干细胞分化为限定性内胚层细胞的可行性。方法将人胚胎干细胞H1细胞置于无滋养层培养基(Essential 8)培养。采用免疫荧光法检测人胚胎干细胞多能性标志物Oct4、Nanog的表达。于细胞中加入0.33、1.00、3.00、9.00、27.00μmol/L浓度的CHIR99021培养3 d,以不加CHIR99021的细胞作对照。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞多能性相关基因OCT4、SOX2和限定性内胚层相关基因GATA4、SOX17的表达水平。实验数据比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果免疫荧光法能够检测到人胚胎干细胞多能性标志物Oct4、Nanog的表达。经0.33、1.00、3.00μmol/L CHIR99021处理后的人胚胎干细胞生长状态良好,CHIR99021浓度较高时细胞生长状态较差或死亡。经1.00、3.00μmol/L CHIR99021处理后的细胞多能性相关基因OCT4表达均下调(LSD-t=-40.54,-59.12;P<0.05),SOX2表达亦明显下调(LSD-t=-20.46,-3.87;P<0.05)。经1.00、3.00μmol/L CHIR99021处理后的细胞限定性内胚层相关基因GATA4表达上调(LSD-t=137.21,65.29;P<0.05),SOX17表达亦明显上调(LSD-t=50.93,6.56;P<0.05)。结论人胚胎干细胞应用无滋养层培养仍然保持良好的干细胞生物学特性。CHIR99021可以高效诱导人胚胎干细胞向限定性内胚层细胞分化。