间充质干细胞多模态示踪方法的应用

目的合成具备MR显像和基因传输功能的纳米载体,探讨载体对间充质干细胞(MSCs)的基因传输功能及其联合生物发光成像(BLI)和MRI对MSCs双模态示踪的能力。方法合成三元共聚物聚乙二醇-聚天冬氨酸(聚乙烯亚胺)-超顺磁性氧化铁纳米颗粒载体(PAI/SPION);利用凝胶阻滞实验分析载体携带质粒(pDNA)的能力;电位及粒度测定仪测量载体复合pDNA后的粒径和电位;采用大鼠股骨骨髓分离培养MSCs;采用流式细胞仪、激光共聚焦显微镜评估PAI/SPION/pDNA对MSCs的基因转染效率;联合BLI和MRI双模态示踪MSCs。结果成功合成了载体PAI/SPION。氨基与质粒磷酸根的摩尔比(N/P)=3.0时,PAI/SPION可完全复合pDNA。N/P=12时,粒径趋于稳定,为(74.8±8.1)nm,电位为(12.2±1.5)mV,载体对MSCs的基因转染率为(71.2±2.3)%。激光共聚焦显微镜下,胞浆内可见大量表征PAI/SPION的绿色荧光和表征pDNA的红色荧光,且MSCs生物发光强度最高,T2*WI标准化信号强度最低。结论本研究成功合成了MRI可视的基因传输载体PAI/SPION;载体可高效传输pDNA至大鼠MSCs,且可成功联合BLI和MRI双模态示踪MSCs。