根皮苷抑制体外LO2肝细胞脂肪变性作用的实验研究

目的研究根皮苷对体外LO2肝细胞脂肪变性的抑制作用。方法体外培养LO2细胞,实验分正常对照组、模型组、辛伐他汀组和不同剂量的根皮苷组。药物作用24,48,72h后分别检测油红O染色后脂滴吸光度,细胞内甘油三酯(TG)含量和细胞外培养基葡萄糖水平。结果与模型组比较,光镜下各给药组的细胞脂滴均明显减少。在24,48,72h时模型组吸光度均显著高于正常对照组(P<0.01),各给药组吸光度均显著低于模型组(P<0.05,P<0.01);在24,48,72h时模型组TG水平均显著高于正常对照组(P<0.05,P<0.01),辛伐他汀组及根皮苷高、中剂量组TG水平均显著低于模型组(P<0.05,P<0.01);在24h时模型组细胞培养基上清液葡萄糖含量均高于正常对照组(P<0.05),各给药组葡萄糖含量均显著低于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论根皮苷对油酸诱导的体外LO2肝细胞脂肪变性和糖代谢异常有显著的抑制作用。

根皮苷对LO2正常人肝细胞体外细胞毒性的实验研究

目的探究根皮苷对正常人肝细胞LO2的体外细胞毒性。方法实验分为正常组和根皮苷组。将从甜茶中提取根皮苷配以不同浓度根皮苷的培养液,浓度分别为4.0、8.0、16.0、32.0、64.0、128、256、512、800、1 000μmol/L。分别在24、48和72 h,使用MTT比色法测定并计算出细胞活力率。结果给药24、48和72 h后,根皮苷在4.0∽1 000μmol/L浓度的范围内对正常人肝细胞LO2无毒性作用,细胞的存活率在90%以上。结论在4.0∽1 000μmol/L浓度范围内,根皮苷对正常人肝细胞的正常增殖无明显抑制,未显示有肝细胞毒性作用。

根皮苷对肥胖小鼠的降脂保肝作用及机制研究

目的:探讨根皮苷对肥胖模型小鼠的降脂保肝作用及其机制。方法:采用高糖高脂饲料连续喂养12 w建立肥胖小鼠模型。小鼠分为正常对照组、模型组、辛伐他丁(3.03 mg/kg)阳性对照组、根皮苷(60.00 mg/kg)组,连续给药14 w;检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(Glu)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平及体质量、腹部脂肪系数、肝脏系数。采用油红O染色观察肝脏组织脂质沉积情况;采用Western blot法检测小鼠肝组织丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(mTOR)、磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-mTOR)、胆固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)及脂肪酸合成酶(FAS)的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠腹部脂肪系数、肝脏系数、体质量及血清TC、TG、Glu、AST、ALT水平显著升高(P<0.05或P<0.01);肝脏病理切片显示脂滴较多,脂质沉积较多;肝组织中mTOR、p-mTOR蛋白及其下游蛋白SREBP-1c表达显著升高,FAS蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,根皮苷组小鼠腹部脂肪系数、肝脏系数、体质量及血清TC、TG、Glu、AST、ALT水平显著降低(P<0.05或P<0.01);肝脏病理切片显示脂滴相对减少;肝组织中mTOR、p-mTOR、SREBP-1c蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01),而FAS蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:根皮苷可降低高脂饮食诱导肥胖小鼠的血脂水平,减轻肝脏脂质的形成及沉积,显示出降脂保肝作用;抑制mTOR/SREBP-1c信号通路的表达可能是其作用机制。