人脐带间充质干细胞来源的细胞外囊泡增强纤维化肝脏再生能力

目的探讨人脐带间充质干细胞来源的细胞外囊泡(hUC-MSC-EV)在纤维化肝脏再生中的作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为正常肝脏70%肝切除组(Oil+PHx组)、肝纤维化70%肝切除组(CCl_(4)+PHx组)、肝纤维化70%肝切除+间充质干细胞来源的细胞外囊泡(MSC-EV)治疗组(CCl_(4)+PHx+MSC-EV组),每组8只。将LX-2细胞分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、转化生长因子(TGF)-β组、TGF-β+MSC-EV组。检测各组小鼠肝部分切除术后丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,分析各组小鼠肝组织纤维化及增殖相关指标的表达情况。检测各组LX-2细胞表皮细胞生长因子(EGF)、成纤维母细胞生长因子(FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)信使RNA(mRNA)的表达水平。观察对小鼠肝脏HGF表达的影响。结果与Oil+PHx组比较,CCl_(4)+PHx组小鼠血清AST、ALT、LDH水平升高,纤维化程度较高,天狼星红及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)染色阳性区域面积增大,α-SMA蛋白表达水平升高;与CCl_(4)+PHx组比较,CCl_(4)+PHx+MSC-EV组小鼠血清AST、ALT、LDH水平下降,纤维化程度较轻,天狼星红及α-SMA染色阳性区域面积缩小,α-SMA蛋白表达水平下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与Oil+PHx组比较,CCl_(4)+PHx组Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达水平降低;与CCl_(4)+PHx组比较,CCl_(4)+PHx+MSC-EV组Ki67、PCNA蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与PBS组比较,TGF-β组LX-2细胞内CollagenⅠmRNA表达水平升高,α-SMA蛋白表达水平升高,HGF蛋白表达水平下降;与TGF-β组比较,TGF-β+MSC-EV组LX-2细胞内CollagenⅠmRNA表达水平下降,HGF mRNA和蛋白表达水平升高,α-SMA蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。CCl_(4)+PHx组HGF蛋白表达水平较Oil+PHx组下降,但差异无统计学意义(P>0.05);CCl_(4)+PHx+MSC-EV组HGF蛋白表达水平较CCl_(4)+PHx组上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论纤维化肝脏再生能力较正常肝脏减弱,hUC-MSC-EV可以减轻肝纤维化,并可能通过促进活化的肝星状细胞分泌HGF,有效改善纤维化肝脏的肝再生能力。

劈离式供肝儿童肝移植门静脉并发症的诊断与治疗

目的探讨劈离式供肝儿童肝移植门静脉并发症的诊断及治疗策略。方法回顾性分析接受劈离式肝移植的88例儿童受者的临床资料。术中根据受者门静脉内径、发育情况,利用门静脉左右分支处进行吻合或间置供者髂静脉搭桥吻合,围手术期采用规范化的门静脉血流监测,术后按肝素钠桥接华法林的方案进行抗凝治疗。经增强CT或门静脉造影确诊门静脉狭窄或血栓形成后,予切开取栓、全身抗凝、介入下取栓、球囊扩张和(或)支架置入等处理。结果88例受者中共10例患儿确诊门静脉并发症,其中4例门静脉狭窄,确诊时间分别为术后1 d、2个月、8个月、11个月,6例门静脉血栓形成,确诊时间分别为术中、术后2 d、术后3 d(2例)、术后6 d、术后11个月。1例门静脉狭窄者和1例门静脉血栓形成者于围手术期死亡,门静脉并发症相关病死率为2%(2/88)。其余8例患者中,1例行全身抗凝治疗、2例行门静脉切开取栓术、1例行介入下球囊扩张、4例行介入下球囊扩张及支架置入,术后均长期随访,未再出现门静脉相关症状,复查门静脉血流参数正常。结论规范化的术中及术后门静脉血流监测有助于早期发现门静脉并发症,及时采取术中门静脉切开取栓,术后介入下球囊扩张、支架置入等手段可有效治疗门静脉并发症,减少门静脉并发症导致的移植物丢失和受者死亡。

酒精性肝炎自噬关键基因的筛选及生物信息学分析

目的筛选酒精性肝炎(AH)的自噬关键基因,探讨AH潜在的生物标志物和治疗靶点。方法采用基因表达综合数据库(GEO)中的2个AH基因芯片和从MSigDB、GeneCards数据库中获得的自噬相关数据集,通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)获取关键基因。对筛选的关键基因进行基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)功能富集分析,蛋白质相互作用(PPI)分析,免疫浸润分析,构建信使RNA(mRNA)-微小RNA(miRNA)网络,进行酒精性肝病不同分期的自噬相关关键基因的表达差异分析,并进一步通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)在AH患者和小鼠肝脏组织中验证。结果本研究筛选得到了11个与AH自噬相关的基因(EEF1A2、CFTR、SOX4、TREM2、CTHRC1、HSPB8、TUBB3、PRKAA2、RNASE1、MTCL1、HGF),均为上调基因。在AH患者和小鼠肝脏组织中,SOX4、TREM2、HSPB8、PRKAA2在AH组中的相对表达量均高于对照组。结论SOX4、TREM2、HSPB8、PRKAA2可能是AH潜在的生物标志物和治疗靶点。

Alagille综合征的肝移植治疗单中心经验分析

Alagille综合征(alagille syndrome,ALGS)是一类可累及多个脏器的常染色体显性遗传性疾病,其突变位点为JAG1或NOTCH2^([1])。ALGS的发病率约1/70000,是儿童慢性胆汁淤积的重要原因之一^([2-3])。ALGS累及的脏器包括肝脏、心脏、骨骼、眼、颜面部等,大多数ALGS患者因胆汁淤积导致的临床症状就诊,但导致患者死亡的原因多为心血管受累。约21%~31%的患者需行肝移植,严重的皮肤瘙痒、门静脉高压.

赤门思忖:记东京大学医学部附属病院肝胆胰外科访学

日本东京大学医学部附属病院(简称东大病院)作为日本的顶级医疗中心之一,享誉世界。在东大病院的诸多科室中,肝胆胰外科/人工脏器移植外科是其代表性的优势学科,诊断与治疗技术水平位居世界前列。笔者于2022年前往该科室参观学习,在东大的学习工作过程中,将其与国内医疗机构及西方国家的肝胆胰外科发展现状和技术水平进行多角度的对比和思考,旨在与国内外科同道分享交流,抛砖引玉,为国内外科医师专业精进带来助益或启迪。

肝脏移植标准数据集

为进一步提升肝脏移植大数据沟通交流和合作研究,中山大学附属第三医院肝脏外科暨肝移植中心在中华医学会和中国医师协会相关分会和学组的指导与支持下,参考国内外信息标准结合相关领域内的指南、数据规范及专家共识,同时兼顾中国肝移植注册等系统的填报需求,编写了《肝脏移植标准数据集》,以推进肝脏移植领域的信息标准化工作,提高临床信息资源采集质量,助力肝脏移植临床诊疗和科研水平的提高。

不同途径移植人脐带间充质干细胞对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤修复研究

目的探讨不同途径移植人脐带间充质干细胞(HU-MSCs)对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤(HIRI)的修复效果。方法将40只雄性SD大鼠随机分为A组(对照组)、B组(模型组)、C组(门静脉移植干细胞组)、D组(尾静脉移植干细胞组),每组10只,B、C、D组采用Pringle法建立HIRI模型,其中B组不予进行干细胞移植,C组和D组分别经门静脉、尾静脉移植氯甲基苯甲酰氨(CM-DiL)标记的HU-MSCs 106个。分别于术前、移植后第1、3、5日抽血检测丙氨酸转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;移植后第5日处死各组大鼠,肝脏取材行苏木素-伊红(HE)及dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色观察肝脏损伤情况,在激光共聚焦显微镜下观察HU-MSCs在各组大鼠肝脏分布情况。结果干细胞移植后C、D组ALT水平较B组降低,且C组ALT水平低于D组(均为P<0.05);C、D组炎症因子TNF-α水平明显低于B组,且与D组相比,C组下降更显著(均为P<0.05)。肝组织HE染色提示B组肝脏损伤最严重,C组肝脏损伤轻于D组。肝组织TUNEL染色结果显示,C、D组的凋亡指数(AI)低于B组,且C组较D组低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。激光共聚焦显微镜下可见,移植后C组与D组均可见CM-DiL标记的HU-MSCs,且C组的HU-MSCs数量高于D组(P<0.05)。结论移植HU-MSCs能减轻HIRI,且门静脉移植效果优于尾静脉移植效果。

肝脏组织工程研究进展

随着科学技术的迅速发展,通过干细胞与组织工程的新技术来再造人类肝脏,为解决供肝短缺提供了新的思路,是未来科学研究的重点。本文从去细胞化基质支架构建肝脏类器官、生物材料微型模具构建肝脏类器官、细胞诱导的无支架培养构建肝脏类器官、构建嵌合体制备人工肝脏等方面介绍肝脏组织工程研究的最新进展。

医院丙型肝炎感染防控管理的探索与实践

本文旨在探讨医院开展丙型肝炎院内感染防控管理的必要性和可行性,以及如何采取有效的干预策略,建立相对规范、完善的管理体系,持续改进丙型肝炎院内感染的防控效果。我院通过加强宣传培训,引进联络员制度,充分做好患者知情同意等工作,使医务人员及患者提高了对丙型肝炎的认识和重视程度,各相关科室之间形成较为顺畅的联系与协作关系,使丙型肝炎院内感染防控取得显著成效。分析加强管理前2011年与加强管理后2012年比,全院非感染科抗HCV检测例数占全院手术例数的比例、非感染科抗-HCV阳性人群HCV RNA检测率分别增长了5.87%和28.4%。可见,医院有能力也有必要,通过采取有效的干预策略,加强丙型肝炎院内防控管理,保护医患人员的安全与权益。

β-arrestin-2通过上调PI3K/Akt信号抑制自噬以减轻小鼠肝脏缺血-再灌注损伤

目的验证β-arrestin-2是否通过上调PI3K/Akt信号抑制自噬对小鼠肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)发挥保护作用。方法将C57BL/6背景的β-arrestin-2基因敲除(KO)及野生型(WT)小鼠各12只,随机分为KO小鼠假手术组(KO+sham组),KO小鼠IRI组(KO+IRI组),WT小鼠假手术组(WT+sham组)和WT小鼠IRI组(WT+IRI组),每组各6只。分别建立70%肝脏IRI模型或进行假手术处理,于肝脏再灌注或手术后6 h进行相关研究。采用免疫组织化学(免疫组化)染色检测凋亡信号蛋白裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved Caspase-3)、增殖信号蛋白Ki-67及PI3K/Akt通路信号蛋白p-Akt的表达。结果免疫组化染色结果显示,与相应的sham组比较,KO+IRI组和WT+IRI组小鼠肝组织中的cleaved Caspase-3、Ki-67和p-Akt阳性细胞计数均增加(均为P<0.01);与WT+IRI组比较,KO+IRI组小鼠肝组织中cleaved Caspase-3阳性细胞计数增加,Ki-67和p-Akt阳性细胞计数均减少(均为P<0.05)。结论β-arrestin-2可减轻小鼠IRI后肝细胞凋亡、促进其损伤修复,其通过上调PI3K/Akt信号抑制自噬来减轻小鼠肝脏IRI。

第九届羊城肝脏移植高峰论坛会议纪要

第九届羊城肝脏移植高峰论坛于2017年2月8日至9日在春意盎然的羊城广州隆重召开。本次论坛由中山大学附属第三医院、中山大学器官移植研究所、广东省器官移植研究中心、广东省医师协会器官移植医师分会、广东省肝脏疾病重点实验室共同举办。羊城肝脏移植高峰论坛自2004年起已经成功举办了九届,本届论坛以"移植与免疫"为主题。聚焦近年来在临床免疫耐受、长期免疫治疗对器官移植受体的影响、移植免疫研究体系的建立等热点问题,并对"加速康复外科优化重型肝炎肝脏移植围手术期管理的临床实践"形成了专家共识,顺利召开了中国医师协会器官移植医师分会移植免疫学专业委员会成立大会和《器官移植》杂志2016年总结会,会议取得圆满成功。

肝脏机械灌注的研究进展

肝移植是目前治疗终末期肝病唯一的有效手段,而供肝严重短缺与等待移植名单的不断增长间的矛盾在持续扩大。肝移植的供肝保存技术中,机械灌注可降低缺血-再灌注损伤,能评估供肝质量并且较好地保存离体肝脏,甚至拯救部分边缘供肝。虽然机械灌注技术给供肝保存带来了新的希望,但其仍存在包括主要技术参数设置未达成统一化,针对肝移植的机械灌注技术尚处于临床实验阶段,广泛应用还需大样本量、多中心的临床验证等问题。本文就机械灌注的发展以及不同类型的肝脏机械灌注技术展开综述。

5-脂氧合酶在大鼠外科脑损伤模型脑组织中的表达及作用

目的研究大鼠外科脑损伤(SBI)模型脑组织中5-脂氧合酶(5-LOX)表达的空间分布、细胞定位和随时间变化的规律,并探讨其在SBI发病中的可能作用机制。方法将72只健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组及SBI术后1d(SBI-1d)组、3d(SBI-3d)组、7d(SBI-7d)组,每组18只。对SBI-1d、SBI-3d和SBI-7d组大鼠采用右侧额叶切除法建立SBI模型,Sham组大鼠只移除相应部位的颅骨,不伤及硬脑膜。采用干湿质量法测量损伤同侧、对侧脑组织的含水量;Garcia评分和杠杆平衡评分评估各组大鼠的神经行为学功能;免疫荧光化学染色确定5-LOX的空间分布及细胞定位;蛋白质印迹法检测5-LOX和核转录因子(NF)-κB的蛋白表达;生物化学法测定损伤区周围脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果 (1)与Sham组相比,SBI-1d和SBI-3d组大鼠损伤侧脑组织含水量增加(P<0.05);SBI-1d、SBI-3d和SBI-7d组大鼠出现神经功能障碍(P<0.01),SBI-7d组大鼠的Garcia评分较SBI-1d、SBI-3d组改善(P<0.05)。(2)5-LOX主要分布在损伤区周围的脑组织中,其中以神经元表达为主,星形胶质细胞和小胶质细胞也有表达。(3)与Sham组相比,SBI-1d和SBI-3d组大鼠损伤区周围脑组织中5-LOX、NF-κB表达增加(P<0.05),而SBI-7d组两者表达低于SBI-1d和SBI-3d组(P<0.05),其中5-LOX表达增加在SBI术后第1天最明显。(4)与Sham组相比,SBI-1d、SBI-3d和SBI-7d组大鼠损伤区周围脑组织中SOD活性降低(P<0.05),SBI-1d和SBI-3d组MDA含量增加(P<0.05)。结论 SBI后,5-LOX主要表达于损伤区周围神经元,星形胶质细胞和小胶质细胞也有表达;且在SBI术后1d表达最多。5-LOX加重脑损伤可能与NF-κB表达增多以及氧化应激增加有关。

高剂量西罗莫司可能通过促进细胞自噬对老年小鼠肝脏缺血-再灌注损伤起保护作用

目的探讨高剂量西罗莫司(雷帕霉素)对老年小鼠肝脏缺血-再灌注损伤(HIRI)的保护作用及其作用机制。方法 20只C57BL/6系老年小鼠按随机数字表法随机分为4组:缺血-再灌注组(IRI组)、低剂量雷帕霉素预处理组(rpm组)、高剂量雷帕霉素预处理组(RPM组)、对照组(Sham组),每组5只。Sham组仅开腹、关腹;其余3组建立老年小鼠70%HIRI模型,缺血时间均为60 min;rpm组和RPM组分别在术前1 h腹腔注射雷帕霉素1 mg/kg和5 mg/kg。再灌注12 h后,采用苏木素-伊红(HE)染色检测各组小鼠肝组织病理学变化,并采用Suzuki评分法进行病理学评分;比较各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平、血清肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-10水平以及肝组织中细胞自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ蛋白水平。结果小鼠肝组织HE染色示Sham组为正常肝组织;IRI组和rpm组肝细胞损伤严重,炎症细胞大量浸润;RPM组可见肝窦轻度淤血,炎症细胞轻度浸润。病理学评分示RPM组为5(4~6)分,均低于rpm组[7(5~8)分]及IRI组[8(7~10)分](Z=-2.554、-2.731,均为P<0.05)。各组小鼠术后肝功能结果显示,RPM组AST[(691±207)U/L]显著低于IRI组[(2 032±575)U/L]、rpm组[(1 817±777)U/L](t=4.90、3.13,均为P<0.05);RPM组ALT[(996±584)U/L]均显著低于IRI组[(2 992±992)U/L]、rpm组[(2 373±687)U/L](t=3.86、3.41,均为P<0.05),而IRI组和rpm组的AST、ALT比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。各组小鼠血清中的TNF-α和IL-10水平比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。Western-blot法显示RPM组肝组织LC3B-Ⅱ蛋白的相对表达量明显高于Sham组、IRI组、rpm组(均为P<0.05)。结论高剂量雷帕霉素可能通过促进细胞自噬对老年小鼠HIRI起保护作用。

胆道闭锁的外科诊治进展

胆道闭锁是一种病因不明、以胆道梗阻为特点的儿童先天性罕见疾病,主要表现为肝内外胆道系统的进行性炎症以及纤维性梗阻,进而发展为胆汁淤积性肝硬化、肝衰竭。胆道闭锁虽然罕见,但它是婴幼儿胆汁淤积性疾病的最常见原因,如不经手术治疗(如Kasai手术、肝移植手术),患儿通常可在短期内死亡。Kasai手术可改善胆道引流,但不能改变胆道闭锁患儿的结局,大多数仍会因为胆汁淤积而遭受持续的肝损伤,最终需要进行肝移植。而目前关于肝移植术前是否行Kasai手术尚未达成一致意见。本文就胆道闭锁的诊断、外科治疗现状等进行综述,以期为临床胆道闭锁的诊断和治疗提供参考,改善胆道闭锁患儿的生存。

康复训练对肝移植术后患者肺功能和运动功能影响的初步研究

目的:探讨强化康复训练和常规康复训练对肝移植术后患者肺功能、运动功能、日常生活活动能力及焦虑抑郁情绪疗效的优劣。方法:选取符合入组标准的肝移植术后患者41例,按照患者意愿分为常规康复训练组21例和强化康复训练组20例,2组均接受术后常规治疗,常规康复组在此基础上按照护士提供的《肝移植术后康复执行单》在护工监督下进行康复训练;强化康复组由物理治疗师指导监督进行强化康复训练,包括功能活动训练、有氧训练、抗阻训练、呼吸训练、日常生活活动指导与宣教等,5次/周,从患者转入普通病房的第二天开始直至出院。分别于治疗前及出院前进行肺功能指标(肺功能测试仪测定的用力肺活量(FVC)、第一秒用力呼气量(FEV1)、一秒率(FEV1/FVC)及最大自主通气量(MVV))、运动能力(Rivermead运动指数)、四肢肌力(医学研究理事会评分)、改良Barthel指数(modified Barthel index,MBI)及心理状态(医院焦虑抑郁量表)评估,并记录2组患者的术后住院天数。结果:与治疗前相比,2组患者在治疗后肺功能(FVC、FEV1、MVV)、运动能力、四肢肌力、日常生活活动能力及焦虑抑郁均显著改善(P<0.05),而FEV1/FVC在治疗后改善不显著。2组患者在治疗前及治疗后组间比较,所有功能指标差异均无显著性意义(P>0.05),但与常规康复组相比,强化康复组治疗前后的FVC差值、MBI差值及焦虑抑郁得分差值有显著性意义(P<0.05),2组的普通病房住院时间和术后总住院时间组间比较差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:两种康复策略均能显著改善患者的肺功能、运动功能、日常生活活动能力及不良情绪。相较于常规康复训练,强化康复训练在改善肝移植术后患者肺功能、日常生活活动能力及焦虑抑郁情绪方面更具优势,但并未缩短术后住院时间。

间充质干细胞来源的细胞外囊泡对放射性肝损伤的保护作用及其机制研究

目的探讨间充质干细胞来源的细胞外囊泡(MSC-EV)对照射诱导的小鼠放射性肝损伤和肝细胞系损伤的保护作用及相关机制。方法分别将C57BL/6小鼠随机分为空白组、造模组和MSC-EV治疗组(治疗组),每组9只;将AML12细胞随机分为对照组、照射组和MSC-EV干预组(干预组)。分别通过一次性15 Gy和6 Gy X线照射建立动物和细胞放射性损伤模型,照射后48 h取小鼠的肝组织与血清进行相关实验,照射后15 h对细胞进行相关检测。检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,肝组织和细胞丙二醛(MDA)含量,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、转化生长因子(TGF)-β、CXC趋化因子配体(CXCL)10信使RNA(mRNA)相对表达量,肝组织苏木素-伊红(HE)染色进行肝组织病理损伤评分,脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法、碘化丙啶(PI)染色法分别检测肝组织、细胞凋亡情况,蛋白质印迹法测定谷胱甘肽过氧化酶(GPX)4、铁死亡抑制蛋白(FSP)1的蛋白表达情况,二氢乙啶(DHE)染色检测活性氧簇(ROS)产生水平,并检测线粒体通透性转换孔(mPTP)荧光强度。结果与空白组比较,造模组小鼠血清AST、ALT水平均增高,小鼠肝组织IL-1β、TGF-β和CXCL10 mRNA相对表达量均增加,MDA含量增加,肝损伤评分升高,细胞凋亡率增加,细胞内ROS水平升高,小鼠肝组织GPX4、FSP1蛋白相对表达量下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与造模组比较,治疗组小鼠血清AST、ALT水平均降低,小鼠肝组织IL-1β、TGF-β和CXCL10 mRNA相对表达量均下降,MDA含量减少,肝损伤评分降低,细胞凋亡率下降,细胞内ROS水平降低,小鼠肝组织GPX4、FSP1蛋白相对表达量增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组比较,照射组细胞凋亡率增加,细胞内ROS水平升高,mPTP荧光强度减弱,IL-1β、TGF-β、IL-6的mRNA相对表达量均增加,MDA含量增加,GPX4、FSP1的蛋白相对表达量均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与照射组比较,干预组细胞凋亡率降低,细胞内ROS水平减少,mPTP荧光强度增强,IL-1β、TGF-β、IL-6的mRNA相对表达量均降低,MDA含量减少,GPX4、FSP1的蛋白相对表达量均增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论MSC-EV可通过减少肝细胞铁死亡、提高抗氧化水平、减少脂质过氧化物的产生,从而有效缓解照射导致的放射性肝损伤。

程序性死亡受体(PD)-1单克隆抗体治疗肝癌肝移植术后复发诱发急性免疫性肝炎:附1例报告

目的探讨程序性死亡受体(PD)-1单克隆抗体治疗肝细胞癌(肝癌)肝移植术后复发的安全性。方法回顾性分析1例因使用PD-1单克隆抗体(pembrolizumab)治疗肝癌肝移植后复发而诱发急性免疫性肝炎患者的临床资料。结果患者因原发性肝癌行肝移植术,术后4个月发现肝癌肺转移,术后12个月予pembrolizumab治疗(150 mg静脉滴注1次),治疗后第5日发现肝功能异常,行肝穿刺活组织检查病理提示轻至中度急性排斥反应。结合患者临床表现、实验室检查以及pembrolizumab的药物说明书,诊断为急性免疫性肝炎。给予肾上腺皮质激素及加强免疫抑制治疗,随访8个月患者带瘤生存,但肝功能仍持续异常。结论肝移植术后免疫抑制状态下不宜应用PD-1单克隆抗体等免疫检查点抑制剂,有诱发免疫性肝炎的风险。

Zwint高表达对肝癌细胞增殖和肝癌肝移植预后的影响

目的探讨Zw10结合因子(Zwint)在原发性肝癌(肝癌)中的表达情况及其对肝癌肝移植预后的影响。方法收集50例肝癌肝移植受体的肝癌组织、癌旁组织及临床资料。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)、蛋白免疫印迹(Western Blot)法和免疫组织化学(免疫组化)法,分别比较20例肝癌肝移植受体的20对肝癌组织及癌旁组织中Zwint信使核糖核酸(m RNA)表达情况和Zwint蛋白的表达水平;选取两个成功干扰Zwint表达的肝癌细胞系Hep G-2(si-Zwint-1组和si-Zwint-2组),以空白对照作为si-NC组,采用细胞计数试剂盒(CCK)-8实验、平板克隆实验和细胞周期实验,比较各组细胞的增殖能力和细胞周期;采用Western Blot法和免疫组化法,分析肝癌组织和肝癌细胞中Zwint与细胞周期蛋白D1(cyclin D1)表达的一致性;以Zwint蛋白表达水平的中位数为分割点,将入组病例分高表达组(22例)和低表达组(28例),分析Zwint蛋白表达水平与肝癌肝移植受体临床特征、总体存活率及无复发存活率的关系。结果实时荧光定量PCR结果提示肝癌组织中Zwint m RNA表达水平高于癌旁组织(P=0.03)。Western Blot及免疫组化结果均提示肝癌组织中Zwint蛋白的表达水平高于癌旁组织(均为P<0.05)。干扰肝癌细胞系Hep G-2的Zwint基因后,CCK-8及平板克隆实验显示细胞增殖能力明显减弱(均为P<0.01),细胞周期阻滞于G1期(均为P<0.05)。Zwint蛋白表达水平与肿瘤直径和肿瘤、淋巴、转移(TNM)分期密切相关(均为P<0.05)。Zwint高表达组肝癌肝移植受体的总体存活率低于低表达组(P=0.02)。结论 Zwint高表达于肝癌组织,其通过调节细胞周期促进肝癌细胞增殖,且Zwint表达水平与肝癌肝移植后预后呈负相关。

公民逝世后器官捐献供肝质量评估和维护的体会

目的总结公民逝世后器官捐献供肝质量评估和功能维护的经验。方法回顾性分析2012年7月至2015年6月在中山大学附属第三医院器官移植中心成功实施的93例器官捐献供者和87例器官捐献供肝肝移植的临床资料。介绍该中心对供肝质量的评估和功能维护经验,总结器官捐献器官获取和利用的情况,以及接受器官捐献肝移植受体恢复情况。结果供者器官的平均热缺血时间为8 min（1～12 min）,器官切取手术操作顺利,器官切取手术平均耗时为32 min（20～52 min）。93例供体获取了93个肝脏,成功用于肝移植87例,弃用6例（重度脂肪肝3例、肝纤维化2例、肝脏撕裂伤1例）,含2例肝肾联合移植。移植肝功能恢复良好,仅有1例出现原发性移植肝无功能。结论对公民逝世后器官捐献的供者进行早期正确的评估和维护,能够提高移植器官质量,改善移植效果。