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致敏动物模型的建立及其对造血干细胞植入的影响 被引量:6
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作者 许吕宏 方建培 +3 位作者 徐宏贵 翁文骏 陈凤英 郭芬芬 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第6期1339-1343,共5页
本研究目的是建立致敏的动物模型,探索致敏动物体内免疫功能的改变,并探讨致敏对造血干细胞植入的影响。经尾静脉分别输注不同数量的C57BL/6脾细胞(1×105、1×106、1×106,连续注射2次,间隔7天)于BALB/c小鼠,通过补体依赖... 本研究目的是建立致敏的动物模型,探索致敏动物体内免疫功能的改变,并探讨致敏对造血干细胞植入的影响。经尾静脉分别输注不同数量的C57BL/6脾细胞(1×105、1×106、1×106,连续注射2次,间隔7天)于BALB/c小鼠,通过补体依赖淋巴细胞毒性实验、混合淋巴细胞反应和ELISA等方法检测致敏模型的免疫功能。致敏BALB/c模型经8Gy60Coγ-线照射后通过尾静脉或骨髓腔移植1×107C57BL/6骨髓细胞,观察移植后生存情况。结果表明:致敏BALB/c模型均产生不同强度的供者反应性抗体,1×106及1×106连续注射2次,间隔1周的致敏组脾细胞体外增殖均明显高于正常小鼠。各组致敏模型小鼠经尾静脉注射C57BL/6骨髓细胞后,均于移植后第9-15天死亡,1×106连续注射2次,间隔1周的致敏BALB/c模型经骨髓腔注射骨髓细胞后亦于2周内死亡。结论:通过同种异基因的脾细胞输注建立不同致敏程度的动物模型,该致敏模型小鼠体内免疫功能的变化与致敏程度有关。脾细胞输注致敏使受者对供者造血干细胞产生排斥作用,而骨髓腔注射方法并不能改善植入。 展开更多
关键词 脾细胞 致敏模型 造血干细胞 骨髓移植
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含淤胆血清的培养体系体外诱导胚胎干细胞表达肝细胞功能的研究 被引量:10
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作者 方天翎 闵军 +6 位作者 邓小耿 钱世鹍 褚忠华 陈亚进 邵静 魏菁 陈积圣 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2004年第12期726-729,共4页
目的 探讨病理微环境体外诱导对小鼠胚胎干细胞(ESC)表达肝细胞功能的作用。 方法 悬滴培养ESC发育5-7 d的拟胚体,将其离散细胞种植于不同的分化体系,观察ESC在自主分化、肝细胞生长因子(HGF)或5%淤胆血清+HGF诱导下每天的分化情况(倒... 目的 探讨病理微环境体外诱导对小鼠胚胎干细胞(ESC)表达肝细胞功能的作用。 方法 悬滴培养ESC发育5-7 d的拟胚体,将其离散细胞种植于不同的分化体系,观察ESC在自主分化、肝细胞生长因子(HGF)或5%淤胆血清+HGF诱导下每天的分化情况(倒置相差显微镜),以及细胞的糖原、甘油三酯、白蛋白及尿素氮合成功能,细胞吲哚氰绿(ICG)和荧光二乙酯(FDA)染色的情况。 结果 ESC自主分化难以控制,分化为3个胚层的细胞。HGF促进ESC向内脏内胚层和中胚层(心肌)分化,但两者仅能表达低水平的肝细胞特异性功能。引入淤胆血清的HGF诱导体系中ESC能分化为较为均一的多角形细胞,具有较高水平的糖原、甘油三酯、白蛋白和尿素氮合成能力,ICG和FDA染色阳性。 结论 自主分化和HGF诱导ESC表达肝细胞代谢的能力有限。体外模拟病理性微环境可诱导ESC定向分化为肝系细胞,并具有较高水平的肝细胞代谢功能。 展开更多
关键词 ESC 分化 HGF 表达 血清 肝细胞功能 体外诱导 高水平 自主 培养体系
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MUC1启动子驱动人钠/碘共转运体基因靶向表达于胰腺癌细胞的研究
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作者 周泉波 陈汝福 +4 位作者 李志花 潘秋辉 周嘉嘉 唐启彬 陈积圣 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第39期2780-2784,共5页
目的克隆人 Mucin (MUC1)黏蛋白的启动子序列,并研究其驱动人钠/碘共转运体(hNIS)基因在胰腺癌细胞内的靶向性表达功能。方法利用巢式 PCR 方法从人胰腺癌细胞株CAPAN-Ⅱ细胞中扩增出 MUC1启动子。采用基因重组方法构建质粒 pDC316-MUC1... 目的克隆人 Mucin (MUC1)黏蛋白的启动子序列,并研究其驱动人钠/碘共转运体(hNIS)基因在胰腺癌细胞内的靶向性表达功能。方法利用巢式 PCR 方法从人胰腺癌细胞株CAPAN-Ⅱ细胞中扩增出 MUC1启动子。采用基因重组方法构建质粒 pDC316-MUC1/hNIS。采用脂质体转染的方法把 pDC316-MUC1/hNIS 导入到 MUCI 阳性的人胰腺癌细胞株 CAPAN一Ⅱ、PANC-1和MUC1阴性的人宫颈癌细胞株 HeLa,转染后48h 采用 RT-PCR 方法及免疫组化方法检测转染细胞内的 hNIS mRNA 水平和蛋白表达,转染48h 后检测肿瘤细胞内 NIS 对125碘吸收功能。结果扩增的MUC1启动子核心调控区序列与参考序列一致。重组 pDC316-MUC1/hNIS 转染后48h,hNIS 蛋白在CAPAN-Ⅱ、PANC-1细胞阳性表达,而在 Hela 细胞内不表达。pDC316-MUC1/hNIS 转染后仅在CAPAN-Ⅱ、PANC-1细胞内检测到高水平吸碘,分别是 pDC316-MUC1转染组的7和12倍。结论MUC1启动子能驱动 NIS 基因在 MUC1阳性的肿瘤细胞内靶向功能表达,为进一步在体内运用放射碘靶向治疗胰腺癌奠定了基础。 展开更多
关键词 基因疗法 胰腺肿瘤 钠/碘同向转运体
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