食管鳞癌RhoC和OPN蛋白的表达及其对患者预后的影响

目的研究食管鳞癌组织中RhoC和OPN蛋白的表达及其与食管鳞癌生物学行为之间的关系。方法采用免疫组织化学方法(二步法)检测80例食管鳞癌组织中RhoC和OPN蛋白的表达情况,探讨它们与食管鳞癌肿瘤大小、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后的关系。结果(1)RhoC蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为66.25%,其表达与淋巴结转移有关(rs=-2.115,P<0.05),而与肿瘤大小、组织分化程度和TNM分期无关(P>0.05);RhoC蛋白阳性表达组患者的术后生存时间较阴性表达组短,(P<0.001);(2)OPN蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为100%,OPN蛋白的表达水平与组织分化程度(χ2=10.766,P<0.05)及淋巴结转移有关(rs=-2.289,P<0.05),而与肿瘤大小和TNM分期无关(P>0.05);OPN蛋白的表达水平越高,患者术后生存时间越短(P<0.05);(3)RhoC蛋白和OPN蛋白在食管鳞癌组织中的表达之间存在正相关性(rs=0.408,P<0.001)。结论食管鳞癌组织RhoC和OPN蛋白的表达与淋巴结转移情况及患者的预后有密切关系,RhoC蛋白和OPN蛋白可作为食管鳞癌预后评价的参考指标。

不停跳心内直视手术的临床研究

【目的】评价不停跳心肺转流术(CPB)心内直视手术对心肌保护的影响和临床效果。【方法】回顾研究不停跳心内直视手术患者32例,对照组停跳心内直视手术患者40例,比较分析术中和术后心功能等诸项临床观察指标。【结果】不停跳组的体外循环时间、术后辅助呼吸时间明显短于停跳组(分别为P<0.001和p<0.05)。术中的酸碱平衡和血液稀释度较停跳组更易维持,术后需正性肌力药维持的比例低于停跳组。而两组患者的术后引流量、用血量之间的比较差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者均无气栓后遗症和神经系统并发症,无低心输出量综合征的发生。【结论】不停跳心内直视手术可安全应用于简单的心脏病手术患者,且有操作简便、减少体外循环时间和术后辅助呼吸时间等优点。

肿瘤干细胞标志物CD133和内皮素转化酶对非小细胞肺癌预后的影响

目的研究肿瘤干细胞标志物CD133和内皮素转化酶(ECE)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表达的临床意义。方法用免疫组织化学方法检测77例NSCLC组织中CD133和ECE的表达,分析其与肿瘤大小、组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后的关系。结果77例NSCLC组织中CD133与ECE的阳性表达率分别为51.9%(40/77)和45.5%(35/77)。CD133和ECE的表达与淋巴结转移呈正相关(r=0.246,P<0.05;r=0.339,P<0.05);CD133和ECE的表达均与患者术后生存时间呈负相关(P<0.05)。CD133和ECE的表达与肿瘤大小、组织学类型和组织分化程度均无关(P>0.05)。CD133与ECE的表达之间呈正相关(r=0.249,P<0.05)。结论肿瘤干细胞标志物CD133和ECE的表达与NSCLC的淋巴转移和预后密切相关,它们的高表达提示患者预后不良。

非小细胞肺癌组织中VEGF-C和VEGFR-3的表达及其临床意义

背景与目的:血管内皮生长因子-C(vascularendothelialgrowthfactorC,VEGF-C)和VEGFR-3是促进恶性肿瘤淋巴管形成的重要因子,其表达与恶性肿瘤的淋巴结转移关系密切。本文旨在研究VEGF-C和VEGFR-3蛋白在非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化方法检测77例NSCLC组织中VEGF-C和VEGFR-3表达情况,分析其与肿瘤淋巴管密度(lymphaticvesseldensity,LVD)、肿瘤的大小、癌的组织类型、组织分化程度、淋巴结转移情况、临床复发和术后生存期的关系。结果:77例NSCLC组织中有45例(58%)VEGF-C阳性,32例(42%)VEGFR-3阳性。NSCLC组织中VEGF-C表达与肿瘤组织的分化程度有关(r=-0.32,P=0.018);VEGF-C及VEGFR-3表达与肿瘤的淋巴结转移、LVD、肿瘤大小及术后生存期有关。NSCLC组织中VEGF-C与VEGFR-3表达相关(r=0.23,P=0.045)。结论:VEGF-C和VEGFR-3表达与NSCLC的淋巴结转移、预后相关,它的高表达提示肺癌患者容易出现淋巴结转移和预后不良。

原代培养乳鼠窦房结细胞的形态和kir2.1蛋白表达

目的研究乳鼠窦房结细胞中kir2.1蛋白表达水平,建立一套可靠的乳鼠窦房结定位、细胞培养与鉴定技术,为进一步心脏生物起搏实验奠定基础。方法在石蜡切片中用HE染色、嗜银染色、髓鞘染色和Mallory磷钨酸-苏木素染色法(PTAH)进行乳鼠窦房结定位和形态学观察;取SD乳鼠的窦房结组织进行原代细胞培养,观察培养细胞的形态和搏动频率,免疫组织化学检测其kir2.1蛋白表达。结果综合嗜银染色、髓鞘染色和PTAH染色3种方法可准确定位乳鼠窦房结组织。在培养的窦房结细胞中观察到梭形细胞、三角形细胞和不规则形细胞3种有自发性收缩的细胞,其中梭形细胞最多且形态结构特点和搏动频率符合起搏细胞的特点,三角形和不规则细胞与心房肌细胞特征相似。乳鼠窦房结细胞的kir2.1蛋白表达低于心房和心室肌细胞。结论综合嗜银染色、髓鞘染色和PTAH染色3种方法可以准确定位SD乳鼠窦房结,乳鼠窦房结细胞中kir2.1蛋白表达水平低于心房和心室肌细胞。

非小细胞肺癌血管内皮生长因子-C和Survivin蛋白的表达及其对患者预后的影响

【目的】研究血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和survivin蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与肺癌生物学行为的关系。【方法】应用免疫组化方法检测77例NSCLC组织中VEGF-C和survivin蛋白的表达,分析其与肿瘤大小、肿瘤淋巴管密度(LVD)、组织类型、分化程度、淋巴结转移、临床复发情况和患者术后生存时间的关系。【结果】77例NSCLC组织中,有45例VEGF-C蛋白表达呈阳性(58.4%);有41例survivin蛋白表达呈阳性(53.2%)。VEGF-C蛋白的阳性表达组肿瘤大小和LVD均高于阴性组(P<0.05),VEGF-C蛋白的表达与患者术后生存时间呈负相关(P<0.05)。Survivin蛋白的阳性表达组的LVD高于阴性组(P<0.05),survivin蛋白的表达与NSCLC淋巴结转移(r=0.324,P<0.05)和临床复发呈正相关(r=0.233,P<0.05),与患者术后生存时间呈负相关(P<0.05)。VEGF-C和survivin蛋白在NSCLC组织中的表达之间呈正相关性(r=0.266,P<0.05)。【结论】VEGF-C和survivin蛋白的表达与非小细胞肺癌的生物学行为具有相关性,它们的高表达提示非小细胞肺癌患者预后不良。

乳腺癌肿瘤干细胞标记物CD44^+ESA^+CD24^(-Λow)在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义

背景与目的:人体各种组织都存在干细胞,肿瘤组织也存在肿瘤干细胞(tumor stem cell,TSC)。乳腺癌TSC已经被分离出来,其标记物也已被确定,但肺癌的TSC仍未被分离出来。本研究旨在探讨乳腺癌肿瘤干细胞标记物(CD44+ESA+CD24-Λow)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学法检测77例NSCLC组织中CD44、ESA与CD24的表达,分析其与患者吸烟、肿瘤的大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后的关系。结果:77例NSCLC组织中CD44、ESA与CD24的阳性率分别为63.6%、66.2%和7.8%。低分化及未分化组CD44的阳性率明显高于高分化组,高分化组ESA的阳性率明显高于中度分化组和低分化及未分化组;腺癌组ESA的阳性率明显高于鳞癌组(P<0.05)。CD44+ESA+CD24-Λow标记的阳性率为36.4%,与患者吸烟、肿瘤的大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后无关(P>0.05)。结论:乳腺癌肿瘤干细胞标记物(CD44+ESA+CD24-Λow)表达与NSCLC肿瘤的大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后等临床病理学指标无关。

腺病毒介导血管内皮细胞生长因子基因体外转染骨髓间充质干细胞

【目的】探讨腺病毒介导血管内皮细胞生长因子(VEGF165)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后目的基因表达情况及对MSCs增殖分化的影响。【方法】构建含VEGF基因的腺病毒表达载体,利用贴壁法分离培养MSCs后,用荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效果和转染率,用免疫组化、Western-Blot和ELISA方法分别检测VEGF基因转染MSCs后VEGF的表达情况。【结果】腺病毒介导的VEGF基因对于MSCs具有很高的转染效率,转染效率与病毒感染复制数(multiplicyties of infection,MOI)具有量效关系。MOI为150倍时,转染效率>95%,转染VEGF后,MSCs可有效表达VEGF,9d时达到表达高峰(1125pg/mL),13d后仍可检测到VEGF的表达。转染VEGF对MSCs的增殖分化没有明显影响。【结论】腺病毒介导的VEGF基因可以有效的转染MSCs,MSCs是一种理想的基因载体细胞,其携带的VEGF基因可获得较高的表达水平。

停跳或不停跳心脏手术对血清S-100B蛋白表达的影响

【目的】研究心脏手术围术期血清S-100B蛋白表达及其与停跳或不停跳心肺转流方式和时间的关系。【方法】体外循环心脏手术患者23例,测转流前、转流10min、转流末、转流后24h的血清S-100B蛋白表达水平。【结果】①血清S-100B蛋白质量浓度在体外循环前后动态变化:转流前(M)为0.27μg/L,转流10min后升至0.57μg/L(P<0.01),转流末达峰值1.80μg/L(P<0.01),转流后24h降为0.22μg/L(P>0.05)。转流末的血清S-100B蛋白质量浓度与转流时间呈正相关(r=0.488,P<0.05)。②停跳组(n=6)转流前、转流10min、转流末、转流后24h平均血清S-100B蛋白质量浓度分别为(0.17±0.09)μg/L、(0.48±0.13)μg/L、(1.65±0.52)μg/L和(0.19±0.04)μg/L,不停跳组(n=6)分别为(0.26±0.14)μg/L、(0.71±0.41)μg/L、(1.59±0.84)μg/L和(0.23±0.11)μg/L,两组差别无统计学意义(P>0.05)。【结论】体外循环可导致血清S-100B蛋白表达增高,其表达水平与心肺转流时间呈正相关,但与停跳或不停跳转流方式无关。

非小细胞肺癌中EMMPRIN和HGF的表达及其对淋巴结转移和预后的影响

目的:研究细胞外基质蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)和肝细胞生长因子(HGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法:免疫组织化学方法检测77例NSCLC组织中EMMPRIN与HGF的表达,分析其与患者吸烟情况、肿瘤大小、组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后的关系。结果:77例NSCLC组织中EMMPRIN与HGF的阳性表达率分别为68%和44%。EMMPRIN与HGF的表达均与淋巴结转移呈正相关(r=0.371和0.339,P<0.01),与患者术后生存时间呈负相关(P<0.01)。EMMPRIN与HGF的表达均与患者吸烟、肿瘤大小、组织学类型和组织分化程度无关(P>0.05)。EMMPRIN与HGF的表达之间呈正相关(r=0.281,P<0.01)。结论:EMMPRIN和HGF的表达与NSCLC的淋巴结转移和预后密切相关,它们的高表达提示NSCLC患者预后不良。

不停跳心内直视手术对心肌细胞凋亡的影响

【目的】评价不停跳体外循环心内直视手术对心肌细胞凋亡的影响和探讨其临床意义。【方法】停跳心内直视手术患者25例(A组),不停跳心内直视手术患者20例(B组),取心肌组织作TUNEL细胞凋亡检测,比较分析术前和术后心肌细胞凋亡率并参照围手术期肌钙蛋白T(cTnT)检测。【结果】两组患者均无低心输出量综合征的发生。心肌细胞凋亡指数A组(0.003±0.002)和B组(0.004±0.003)术前无明显差别(P>0.05);术后心肌细胞凋亡指数A组(0.012±0.008,P<0.001)和B组(0.006±0.004,P<0.001)均高于术前;A、B两组术后心肌细胞凋亡指数差别有明显差别(P<0.05)。围手术期cTnT水平A组在CPB末和术后2 h明显高于B组(P<0.05)。【结论】本实验提示不停跳体外循环心内直视手术引起心肌细胞凋亡和心肌损害小于停跳手术。

纳米血管生成素-2小干扰RNA质粒制备及功能研究

【目的】制备血管生成素-2小干扰RNA(Ang-2siRNA)质粒纳米微粒,并观察其基因转染能力和基因沉默效果。【方法】应用分子克隆的方法构建Ang-2siRNA质粒,将其与聚乳酸、O-羧甲基壳聚糖用水/油/水(W/O/W)双乳化溶剂蒸发法制备纳米微球,扫描电镜观察其形态和粒径。然后转染原代人脐带静脉内皮细胞, 观察纳米Ang-2siRNA微粒干扰Ang-2基因表达的效果及其细胞保护功能。【结果】扫描电镜观察到Ang- 2siRNA纳米微球呈球形和椭球形,粒径150—200 nm,大小分布均匀,包封完整,分散性良好。有较强转基因能力,良好的RNA干扰效果和血管内皮细胞保护功能。【结论】成功制备纳米Ang-2siRNA微粒。并证实其载基因能力和RNA干扰效果,对血管内皮细胞损伤因素有良好保护作用,为进一步研究心肌梗死的血管修复机制奠定了坚实的基础。

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子和内皮素转化酶对非小细胞肺癌患者术后淋巴结转移和预后的影响

目的:研究细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPR IN)和内皮素转化酶(ECE)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表达的临床意义。方法:用免疫组织化学方法检测77例NSCLC组织中EMMPR IN和ECE的表达情况,分析其与肿瘤大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后的关系。结果:77例NSCLC组织中EMMPR IN和ECE的阳性表达率分别为66%和45%。EMMPR IN和ECE的表达均与淋巴结转移呈正相关(均P<0.01,r=0.371和0.467),两者表达阳性组术后生存期均明显短于阴性组(均P<0.01)。NSCLC组织中EMMPR IN和ECE的表达之间呈正相关(P<0.05,r=0.243)。EMMPR IN和ECE的表达与肿瘤大小、癌组织学类型和组织分化程度均无相关性(P>0.05)。结论:EMMPR IN和ECE的表达与NSCLC的淋巴结转移和预后密切相关,它们的高表达提示非小细胞肺癌患者预后不良。

VEGF-C和MMP-2蛋白表达对非小细胞肺癌预后的影响

目的研究血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与肺癌生物学行为的关系。方法应用免疫组化方法检测42例NSCLC组织中VEGF-C和MMP-2蛋白的表达情况,分析其与肿瘤大小、肿瘤淋巴管密度、组织类型、分化程度、临床分期、临床复发、淋巴结转移情况和术后生存时间的关系。结果42例NSCLC组织中,有23例VEGF-C蛋白表达呈阳性,阳性表达率为54.8%;有26例MMP-2蛋白表达呈阳性,阳性表达率为61.9%。VEGF-C蛋白的表达与淋巴管密度、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与组织分化程度、患者术后生存时间呈负相关(P<0.05)。MMP-2蛋白的表达与NSCLC的淋巴结转移正相关(P<0.05),与患者术后生存时间呈负相关(P<0.05)。VEGF-C和MMP-2蛋白的表达之间呈正相关(r=0.469,P<0.05)。结论VEGF-C和MMP-2蛋白的表达与NSCLC的生物学行为具有相关性,它们的高表达提示NSCLC患者容易出现淋巴结转移和预后不良。

COX-2和MMP-2蛋白的表达对肺癌预后的影响

背景与目的:研究发现,环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)蛋白在肿瘤组织中的表达多有增高,而实验和临床研究提示,这两种蛋白的抑制剂可抑制肿瘤的生长、发展。本研究旨在探讨COX-2和MMP-2蛋白在人肺癌组织中的表达及其对患者预后的影响。方法:应用免疫组化方法检测42例肺癌组织中COX-2和MMP-2蛋白的表达情况,通过生存曲线法比较阳性组和阴性组患者的预后情况。结果:COX-2和MMP-2蛋白的阳性率分别为31%和62%;COX-2蛋白阳性组患者的生存期明显较阴性组短(P=0.019);MMP-2蛋白阳性组淋巴结癌转移的发生率明显较阴性组高(P=0.009),而患者生存期则明显较阴性组短(P=0.001);COX-2蛋白与MMP-2蛋白的表达之间无相关性(P=0.257)。结论:COX-2和MMP-2蛋白的表达与肺癌患者的预后相关,其高表达提示患者预后不良。

人类抗凋亡基因bcl-xL的克隆及其在大鼠心肌细胞内的高效表达

【目的】克隆人类抗凋亡基因 bcl-xL cDNA,构建两种不同的真核表达载体,评价大鼠心肌细胞表达外源性bcl-xL 的效果,并比较不同转染方法对 bcl-xL 表达的影响。【方法]】RT-PCR 法从人肝脏组织获取 bcl-xL cDNA,连接至pTargeT^(TM)载体,并亚克隆至真核表达载体 pEGFP-C1上;细菌内同源重组构建重组腺病毒质粒,腺病毒纯化试剂盒获取高滴度的重组腺病毒;脂质体和腺病毒介导分别转染体外培养的大鼠心肌细胞,荧光显微镜观察转染效率,RT-PCR 和免疫细胞化学染色法检测 bcl-xL mRNA 和 bcl-xL 蛋白的表达。【结果】获取的 bcl-xL cDNA 测序正确,成功克隆真核表达质粒 pEGFP-bcl-xL;病毒颗粒滴度高达5.3×10^(12)pfu/L;脂质体和腺病毒转染心肌细胞效率分别为40.3%和95.4%,转染后bcl-xL mRNA 和 bel-xL 蛋白的表达均增加,但两种方法之间差异有统计学意义(P<0.01)。【结论】成功获取人类 bcl-xL基因并制备真核表达质粒和重组腺病毒,心肌细胞能高效表达外源性 bcl-xL,并以腺病毒介导更为理想。为 bcl-xL 基因治疗缺血性心脏病提供实验基础。

非小细胞肺癌FHIT和Caspase-3蛋白的表达及临床意义

【目的】研究脆性组氨酸三联体(FHIT)和 Caspase-3蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其与淋巴结转移和预后的关系。【方法】用免疫组化方法检测77例非小细胞肺癌组织中 FHIT 和 Caspase-3蛋白的表达,分析其与肿瘤微血管密度(MVD)、肿瘤的大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移、临床复发,以及手术后生存期长短的关系。【结果】非小细胞肺癌组织中 FHIT 和 Caspase-3蛋白阳性率分别为42%和10%。FHIT 蛋白表达与非小细胞肺癌组织分化程度呈负相关(P=0.035);阴性表达组淋巴结癌转移发生率明显较阳性组高(P=0.004),患者术后生存期则明显较阳性组短。Caspase-3蛋白阳性表达组非小细胞肺癌组织的微血管密度明显较阴性组大(P=0.012)。【结论】FHIT 蛋白的表达与非小细胞肺癌患者的组织分化程度、淋巴结转移和预后密切相关,它的低表达提示非小细胞肺癌患者预后不良。Caspase-3蛋白在非小细胞肺癌中所起的作用可能不大。

肺癌组织中p63和Survivin蛋白的表达及其意义

[目的]研究p63和survivin两种蛋白在肺癌组织中的表达及其临床意义。[方法]通过免疫组织化学染色检测77例肺癌组织和10例非肿瘤性肺组织中的p63和survivin两种蛋白的表达及其与肺癌的组织类型、分化程度、复发转移和预后的关系。[结果]①10例非肿瘤性肺组织中,仅在支气管的假复层柱状上皮中见到P63的表达,未见survivin表达。②肺癌组织中p63的阳性细胞百分数为(51.7±32.7)％;其在无淋巴结转移组的阳性细胞百分数明显较淋巴结转移组低(P=0.010);p63的阳性细胞百分数与肿瘤大小、组织类型、分化程度、临床分期、复发和预后均无关(P>0.05)。③肺癌组织中survivin的阳性表达率为53.2％;其在复发组和淋巴结转移组的阳性表达率均明显高于无复发组和无淋巴结转移组(P=0.025和0.015);survivin(++～+++)组的生存期明显较(-～+)组短。[结论]p63和survivin均与肺癌的发生发展有关,survivin尤其与肺癌的复发、淋巴结转移有着密切关系,它的高表达提示肿瘤患者预后不良。

体外循环心脏术后并发精神障碍相关因素分析及护理策略

目的探讨体外循环（CPB）心脏手术后精神障碍发生的相关因素及护理策略。方法对805例体外循环心脏术后6例精神障碍患者临床资料进行回顾性分析。结果本组6例精神障碍患者中表现为抑郁1例，谵妄2例，认知障碍3例。经过治疗和护理，1例并发心力衰竭死亡，1例有阳性家族史的患者好转出院，4例治愈出院。结论高龄是体外循环心脏术后精神障碍发生的高危因素之一；抑郁、谵妄及认知障碍是常见的临床表现；采取个性化的综合护理策略对病情恢复具有重要作用。

重组bcl-xL腺病毒对心肌细胞凋亡的影响

【目的】探讨转染人类抗凋亡基因bcl-xL能否提高心肌细胞对缺氧的耐受性,评价它对心肌细胞的抗凋亡作用。【方法】体外培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,建立模拟心肌缺氧模型;将携带人类bcl-xL基因的重组腺病毒感染心肌细胞;免疫细胞化学染色法分析bcl-xL蛋白的表达;TUNEL法检测凋亡指数;荧光显微镜下观察心肌细胞表达绿色荧光蛋白,用Hoechst33342染色观察细胞核的形态变化。【结果】转染rAd-bcl-xL/s的心肌细胞表达bcl-xL蛋白阳性单位(PU)(17.84±3.42)明显高于正常对照组(11.02±2.56)与rAd-bcl-xL/as转染组(8.53±2.25)(P<0.01);缺氧诱导后心肌细胞凋亡指数为(45.67±8.47)%,而转染rAd-bcl-xL/s后的细胞凋亡指数减少至(9.42±2.48)%,有显著性差异(P<0.01),未见典型的凋亡小体。【结论】腺病毒介导的bcl-xL基因能高效转染心肌细胞,并表达目的基因;外源性bcl-xL基因对体外培养的心肌细胞具有抗凋亡作用,能够提高心肌细胞对缺氧的耐受性,促进损伤心肌的恢复。